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Leucobacter triazinivorans sp. JW-1代谢扑草净中间产物降解酶分离纯化及特性研究

致谢第5-6页
摘要第6-8页
ABSTRACT第8-9页
术语与缩略语表第10-16页
第一章 文献综述第16-27页
    1.1 三嗪类除草剂的概况第16-17页
    1.2 蛋白质分离纯化技术第17-20页
        1.2.1 蛋白质的提取第17-18页
        1.2.2 蛋白质的粗提第18页
        1.2.3 蛋白质精细纯化第18-20页
    1.3 微生物参与均三嗪类除草剂代谢途径的关键酶第20-24页
        1.3.1 催化均三嗪类除草剂N-脱烷基反应的氧化酶第20-21页
        1.3.2 催化均三嗪类除草剂水解的水解酶第21-24页
        1.3.3 催化含甲硫基均三嗪类除草剂氧化的氧化酶第24页
    1.4 扑草净微生物降解研究现状第24-27页
第二章 引言第27-28页
    2.1 研究背景及意义第27页
    2.2 研究内容第27-28页
第三章 材料和方法第28-38页
    3.1 实验材料与仪器第28-31页
        3.1.1 供试菌株第28页
        3.1.2 供试药品和试剂第28-30页
        3.1.3 仪器设备第30-31页
        3.1.4 培养基第31页
        3.1.5 工作溶液的配制第31页
    3.2 菌株Leucobacter triazinivorans sp. JW-1胞内蛋白硫酸铵分级沉淀和降解酶检测方法的建立第31-34页
        3.2.1 菌株Leucobacter triazinivorans sp. JW-1的培养第31页
        3.2.2 Leucobacter triazinivorans sp. JW-1胞内总蛋白的提取第31页
        3.2.3 硫酸铵分级沉淀第31-32页
        3.2.4 扑草净降解酶活性的定性检测方法的建立第32页
        3.2.5 菌株Leucobacter triazinivorans sp. JW-1胞内降解酶活性定量检测方法第32-33页
        3.2.6 蛋白含量的测定第33-34页
    3.3 N-异丙基氰尿酰胺降解酶的分离纯化第34-36页
        3.3.1 N-异丙基氰尿酰胺降解酶硫酸铵沉淀获取第34页
        3.3.2 N-异丙基氰尿酰胺降解酶疏水层析第34页
        3.3.3 N-异丙基氰尿酰胺降解酶凝胶层析第34-35页
        3.3.4 N-异丙基氰尿酰胺降解酶离子交换层析第35页
        3.3.5 SDS-PAGE电泳实验第35-36页
        3.3.6 N-异丙基氰尿酰胺降解酶N端测序第36页
    3.4 N-异丙基氰尿酰胺降解酶酶学性质的测定第36-37页
        3.4.1 pH对N-异丙基氰尿酰胺降解酶活性和稳定性的影响第36页
        3.4.2 温度对N-异丙基氰尿酰胺降解酶活性的影响第36-37页
        3.4.3 金属离子对N-异丙基氰尿酰胺降解酶活性的影响第37页
        3.4.4 化学试剂对N-异丙基氰尿酰胺降解酶活性的影响第37页
        3.4.5 N-异丙基氰尿酰胺降解酶动力学参数测定第37页
    3.5 N-异丙基氰尿酰胺降解酶底物特异性测定第37-38页
第四章 结果与分析第38-55页
    4.1 菌株JW-1胞内扑草净降解酶活性定性检测方法建立和硫酸铵分级沉淀中活性定性检测第38-39页
    4.2 菌株JW-1胞内蛋白硫酸铵分级沉淀中降解酶定量检测第39-45页
        4.2.1 硫酸铵分级沉淀组分中扑草净降解酶活性定量检测第39-41页
        4.2.2 硫酸铵分级沉淀组分中2-羟基扑灭津降解酶活性定量检测第41-43页
        4.2.3 硫酸铵分级沉淀组分中N-异丙基氰尿酰胺降解酶活性定量检测第43-45页
    4.3 N-异丙基氰尿酰胺降解酶分离纯化第45-49页
        4.3.1 N-异丙基氰尿酰胺降解酶疏水层析第45-46页
        4.3.2 N-异丙基氰尿酰胺降解酶凝胶层析第46-47页
        4.3.3 N-异丙基氰尿酰胺降解酶离子交换层析第47-48页
        4.3.4 降解酶N端测序第48-49页
    4.4 酶学性质研究第49-53页
        4.4.1 温度对降解酶活性和稳定性的影响第49-50页
        4.4.2 pH对降解酶活性和稳定性的影响第50-51页
        4.4.3 金属离子对降解酶活性的影响第51页
        4.4.4 化学试剂对降解酶活性的影响第51-52页
        4.4.5 降解酶动力学研究第52-53页
    4.5 N-异丙基氰尿酰胺降解酶底物特异性测定第53-55页
第五章 讨论第55-59页
    5.1 菌株Leucobacter triazinivorans sp. JW-1胞内蛋白硫酸铵分级沉淀第55页
    5.2 N-异丙基氰尿酰胺降解酶的分离纯化第55-56页
    5.3 酶学性质研究第56-57页
    5.4 酶动力学参数与底物特异性研究第57-59页
第六章 结论第59-60页
参考文献第60-67页
个人简介第67页
在读期间发表的学术论文第67页

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