| 摘要 | 第5-6页 |
| Abstract | 第6页 |
| 第1章 引言 | 第11-18页 |
| 1.1 肌萎缩侧索硬化症(ALS)背景及研究现状 | 第11-17页 |
| 1.1.1 ALS简介 | 第11页 |
| 1.1.2 ALS治疗现状 | 第11-13页 |
| 1.1.2.1 FDA批准治疗用药 | 第12页 |
| 1.1.2.2 基因疗法 | 第12页 |
| 1.1.2.3 其它治疗药物 | 第12-13页 |
| 1.1.3 病理学机制 | 第13-17页 |
| 1.1.3.1 病理学机制简介 | 第13页 |
| 1.1.3.2 SOD1基因突变 | 第13-15页 |
| 1.1.3.3 神经胶质细胞 | 第15-16页 |
| 1.1.3.4 谷氨酸兴奋性毒性 | 第16页 |
| 1.1.3.5 内质网应激以及蛋白质降解功能受损 | 第16页 |
| 1.1.3.6 轴突解体和运输中断 | 第16页 |
| 1.1.3.7 RNA生物学 | 第16-17页 |
| 1.2 研究目的与意义 | 第17-18页 |
| 第2章 单链抗体W20对SOD1-G93A转基因小鼠的治疗作用研究 | 第18-37页 |
| 2.1 前言 | 第18-19页 |
| 2.2 实验材料与方法 | 第19-25页 |
| 2.2.1 实验动物 | 第19页 |
| 2.2.2 实验试剂 | 第19-20页 |
| 2.2.3 主要实验仪器 | 第20页 |
| 2.2.4 主要溶液配制 | 第20-21页 |
| 2.2.5 实验方法 | 第21-24页 |
| 2.2.5.1 SOD1-G93A小鼠分组及治疗策略 | 第21-22页 |
| 2.2.5.2 体重监测 | 第22页 |
| 2.2.5.3 转棒实验 | 第22页 |
| 2.2.5.4 抓握实验 | 第22页 |
| 2.2.5.5 后肢紧抱实验 | 第22-23页 |
| 2.2.5.6 小鼠组织冰冻切片与组织提取液制备 | 第23页 |
| 2.2.5.7 免疫组织化学染色 | 第23-24页 |
| 2.2.5.8 Western-blot检测组织提取液中蛋白水平 | 第24页 |
| 2.2.5.9 Dot-blot检测组织中SOD1寡聚体的水平 | 第24页 |
| 2.2.5.10 组织提取液中IL-1β、IL-6、TNF-α的测定 | 第24页 |
| 2.2.6 统计学分析 | 第24-25页 |
| 2.3 结果与分析 | 第25-35页 |
| 2.3.1 W20能够抑制SOD1-G93A小鼠体重的减轻 | 第25-26页 |
| 2.3.2 W20改善了SOD1-G93A小鼠的运动机能 | 第26-27页 |
| 2.3.3 W20降低了SOD1-G93A小鼠脑干和脊髓中SOD1聚集物及其寡聚体水平 | 第27-29页 |
| 2.3.4 W20提高了SOD1-G93A小鼠运动神经元的存活并且抑制其凋亡 | 第29-31页 |
| 2.3.5 W20降低了SOD1-G93A小鼠脊髓及脑干中的胶质细胞活化水平 | 第31-33页 |
| 2.3.6 W20抑制了SOD1-G93A小鼠脊髓中炎症因子的产生及NF-κB通路的激活 | 第33-35页 |
| 2.4 讨论 | 第35-36页 |
| 2.5 本章小结 | 第36-37页 |
| 第3章 IL-1β表位疫苗A1β对SOD1-G93A小鼠的治疗作用研究 | 第37-54页 |
| 3.1 前言 | 第37页 |
| 3.2 实验材料与方法 | 第37-41页 |
| 3.2.1 实验动物 | 第37页 |
| 3.2.2 实验试剂 | 第37-38页 |
| 3.2.3 主要实验仪器 | 第38-39页 |
| 3.2.4 主要溶液配制 | 第39页 |
| 3.2.5 实验方法 | 第39-41页 |
| 3.2.5.1 A1β的制备 | 第39页 |
| 3.2.5.2 SOD1-G93A小鼠分组及免疫方式 | 第39页 |
| 3.2.5.3 抗体效价的测定 | 第39-40页 |
| 3.2.5.4 体重的检测 | 第40页 |
| 3.2.5.5 转棒实验 | 第40页 |
| 3.2.5.6 后肢紧抱实验 | 第40页 |
| 3.2.5.7 抓握实验 | 第40页 |
| 3.2.5.8 小鼠脊髓及脑干组织切片及提取液的制备 | 第40-41页 |
| 3.2.5.9 免疫组织化学染色 | 第41页 |
| 3.2.5.10 Western-blot检测组织提取液中蛋白水平 | 第41页 |
| 3.2.5.11 Dot-blot检测组织中SOD1寡聚体的水平 | 第41页 |
| 3.2.5.12 组织提取液中IL-1β、IL-6、TNF-α的测定 | 第41页 |
| 3.2.6 统计学分析 | 第41页 |
| 3.3 结果与分析 | 第41-52页 |
| 3.3.1 A1β免疫SOD1-G93A小鼠诱导产生了较高的免疫应答并抑制了小鼠体重降低 | 第41-43页 |
| 3.3.2 A1β免疫改善了SOD1-G93A小鼠的运动机能 | 第43-44页 |
| 3.3.3 A1β免疫降低了SOD1-G93A小鼠脑干和脊髓中的SOD1聚集物及寡聚体水平 | 第44-47页 |
| 3.3.4 A1β免疫提高了SOD1-G93A小鼠脊髓及脑干中的乙酰胆碱转移酶水平 | 第47-48页 |
| 3.3.5 A1β免疫抑制了SOD1-G93A小鼠脊髓及脑干中胶质细胞的过度激活 | 第48-50页 |
| 3.3.6 A1β免疫降低了SOD1-G93A小鼠脊髓和脑干中炎症因子的水平 | 第50-52页 |
| 3.4 讨论 | 第52-53页 |
| 3.5 本章小结 | 第53-54页 |
| 第4章 结论和展望 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-63页 |
| 致谢 | 第63-64页 |
| 作者简历及攻读学位期间发表的学术论文与研究成果 | 第64页 |
