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禽偏肺病毒通用型抗原和抗体检测方法的建立

致谢第5-9页
英文缩写词表第9-10页
摘要第10-12页
文献综述第12-21页
    1 aMPV的病原学第12-14页
        1.1 aMPV的病原学特性第12-13页
        1.2 aMPV的分类第13页
        1.3 aMPV对禽的致病性第13-14页
    2 禽偏肺病毒的检测方法研究进展第14-20页
        2.1 病毒的分离鉴定第14-15页
        2.2 分子生物学方法第15-17页
        2.3 血清学方法第17-20页
    3 本研究的目的和意义第20-21页
试验研究第21-44页
    试验一:禽偏肺病毒通用型EvaGreen荧光定量RT-PCR检测方法的建立第21-29页
        1 材料和方法第21-23页
            1.1 毒株和临床样品第21页
            1.2 主要试剂和仪器第21-22页
            1.3 引物设计第22页
            1.4 病毒RNA的提取与cDNA合成第22页
            1.5 标准质粒的构建第22-23页
            1.6 aMPVEvaGreen荧光定量RT-PCR方法的建立第23页
            1.7 aMPVEvaGreen实时荧光定量RT-PCR方法特异性试验第23页
            1.8 aMPVEvaGreen实时荧光定量RT-PCR方法敏感性试验第23页
            1.9 aMPVEvaGreen实时荧光定量RT-PCR方法重复性试验第23页
            1.10 临床样品检测第23页
        2 结果第23-27页
            2.1 aMPVEvaGreen实时荧光定量RT-PCR标准曲线的建立第23-25页
            2.2 aMPVEvaGreen实时荧光定量RT-PCR的特异性第25页
            2.3 aMPVEvaGreen实时荧光定量RT-PCR的敏感性第25-26页
            2.4 aMPVEvaGreen实时荧光定量RT-PCR的重复性第26-27页
            2.5 临床样品检测第27页
        3 小结第27-29页
    试验二:aMPVN蛋白的原核表达和免疫反应性分析第29-37页
        1 材料与方法第29-31页
            1.1 材料与试剂第29页
            1.2 主要仪器第29页
            1.3 重组质粒pET32a-N的构建第29-30页
            1.4 重组蛋白的表达第30页
            1.5 N蛋白的回收纯化第30页
            1.6 多克隆抗体的制备第30-31页
            1.7 N蛋白的Westernblotting鉴定第31页
        2 结果第31-35页
            2.1 重组表达载体的鉴定第31-32页
            2.2 重组蛋白的表达与纯化第32-34页
            2.3 N蛋白的Westernblotting分析第34-35页
        3 小结第35-37页
    试验三:基于N蛋白的禽偏肺病毒通用型间接ELISA抗体检测方法的建立第37-44页
        1 材料与方法第37-39页
            1.1 材料第37页
            1.2 包被抗原的制备第37页
            1.3 aMPVN蛋白间接ELISA诊断方法的建立第37-38页
            1.4 间接ELISA方法判定标准的确定第38页
            1.5 特异性试验第38页
            1.6 敏感性试验第38页
            1.7 重复性试验第38-39页
            1.8 准确性试验第39页
            1.9 临床血清样品检测第39页
        2 结果第39-43页
            2.1 包被抗原的制备第39页
            2.2 间接ELISA最佳反应条件的确定第39-40页
            2.3 间接ELISA方法判定标准的确定第40页
            2.4 特异性试验第40页
            2.5 敏感性试验第40-41页
            2.6 重复性试验第41-42页
            2.7 准确性试验第42页
            2.8 临床血清样品检测第42-43页
        3 小结第43-44页
全文总结第44-45页
参考文献第45-52页
ABSTRACT第52-54页
附:作者读研期间发表文章第55页

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