| 中文摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 缩略语 | 第12-16页 |
| 前言 | 第16-19页 |
| 研究现状、成果 | 第16-17页 |
| 研究目的、方法 | 第17-19页 |
| 对象和方法 | 第19-57页 |
| 1.1 实验试剂 | 第19-24页 |
| 1.1.1 常用的普通化学试剂 | 第19页 |
| 1.1.2 细胞分离和培养相关试剂 | 第19页 |
| 1.1.3 蛋白质提取和免疫蛋白质印迹(WesternBlotting)相关试剂 | 第19-20页 |
| 1.1.4 免疫荧光染色相关试剂 | 第20-21页 |
| 1.1.5 抗体 | 第21页 |
| 1.1.6 小分子干扰RNA技术相关试剂 | 第21-22页 |
| 1.1.7 RNA提取,逆转录和实时定量荧光PCR(qRT-PCR)相关试剂 | 第22页 |
| 1.1.8 蛋白质免疫沉淀(co-immunoprecipitation,co-IP)相关试剂 | 第22页 |
| 1.1.9 质粒转化、提取和转染相关试剂 | 第22页 |
| 1.1.10 染色质免疫沉淀(ChIP)相关试剂 | 第22-23页 |
| 1.1.11 其他试剂和材料 | 第23-24页 |
| 1.2 主要实验试剂配制 | 第24-30页 |
| 1.2.1 分离原代人脐静脉内皮细胞(HUVECs)所需试剂的配制 | 第24页 |
| 1.2.2 细胞培养所需试剂的配制 | 第24-26页 |
| 1.2.3 WesternBlotting所需试剂的配制 | 第26-27页 |
| 1.2.4 蛋白质免疫沉淀所需试剂的配制 | 第27-28页 |
| 1.2.5 质粒转化所需试剂的配制 | 第28页 |
| 1.2.6 染色质免疫沉淀所需试剂的配制 | 第28-30页 |
| 1.3 实验设备 | 第30-31页 |
| 1.4 实验动物 | 第31-37页 |
| 1.4.1 内皮特异性YAP蛋白过表达小鼠的构建和繁育 | 第32页 |
| 1.4.2 内皮特异性YAP蛋白过表达小鼠的基因鉴定 | 第32-34页 |
| 1.4.3 内皮特异性YAP蛋白过表达小鼠视网膜血管生成实验 | 第34-36页 |
| 1.4.4 内皮特异性YAP蛋白过表达小鼠异体移植肿瘤中血管生成实验 | 第36-37页 |
| 1.4.5 内皮特异性YAP蛋白过表达小鼠体内细胞外基质(Matrigel)中血管生成实验 | 第37页 |
| 1.5 实验方法 | 第37-57页 |
| 1.5.1 HUVECs的分离与培养 | 第37-39页 |
| 1.5.2 小鼠肺内皮细胞的分离与培养 | 第39-40页 |
| 1.5.3 牛主动脉内皮细胞(BAECs)的分离与培养 | 第40页 |
| 1.5.4 HEK293细胞的培养 | 第40页 |
| 1.5.5 蛋白质的提取与定量 | 第40-41页 |
| 1.5.6 细胞核与细胞质蛋白的分离 | 第41-42页 |
| 1.5.7 WesternBlotting | 第42-43页 |
| 1.5.8 细胞免疫荧光染色 | 第43页 |
| 1.5.9 RNA干扰技术 | 第43页 |
| 1.5.10 内皮细胞增殖实验 | 第43-44页 |
| 1.5.11 内皮细胞迁移实验 | 第44页 |
| 1.5.12 内皮细胞成血管实验 | 第44页 |
| 1.5.13 总RNA的提取和定量 | 第44-45页 |
| 1.5.14 实时定量荧光PCR分析 | 第45-47页 |
| 1.5.15 YAP过表达腺病毒的构建与转染 | 第47-50页 |
| 1.5.16 YAP蛋白和STAT3突变质粒的构建和转染 | 第50-52页 |
| 1.5.17 蛋白质免疫沉淀 | 第52-53页 |
| 1.5.18 银染 | 第53-54页 |
| 1.5.19 质谱(MassSpectrometer,MS) | 第54页 |
| 1.5.20 荧光素酶活性和β-半乳糖苷酶活性测定 | 第54-55页 |
| 1.5.21 染色质免疫沉淀 | 第55-56页 |
| 1.5.22 统计学分析 | 第56-57页 |
| 结果 | 第57-86页 |
| 2.1 YAP蛋白在VEGF介导的内皮细胞功能和血管新生中的作用及机制研究 | 第57-67页 |
| 2.1.1 Hippo/YAP通路及其调控机制 | 第57-58页 |
| 2.1.2 VEGF在内皮细胞中调控YAP蛋白的磷酸化水平和亚细胞定位 | 第58-62页 |
| 2.1.3 敲低YAP蛋白抑制VEGF介导的内皮细胞增殖和迁移 | 第62-63页 |
| 2.1.4 敲低YAP蛋白抑制VEGF介导的内皮细胞血管新生 | 第63-64页 |
| 2.1.5 过表达YAP蛋白促进内皮细胞功能改变和血管新生 | 第64-67页 |
| 2.2 Hippo/YAP通路与IL-6/STAT3的相互作用及在血管新生中作用机制研究 | 第67-86页 |
| 2.2.1 YAP蛋白的结构 | 第67-68页 |
| 2.2.2 内皮细胞中转录因子STAT3与YAP蛋白相互作用 | 第68-70页 |
| 2.2.3 YAP蛋白延长IL-6介导的STAT3在内皮细胞细胞核中的转位 | 第70-73页 |
| 2.2.4 过表达YAP蛋白促进IL-6/STAT3通路下游目的基因的表达 | 第73-76页 |
| 2.2.5 YAP蛋白与STAT3结合遮挡了STAT3的出核信号 | 第76-79页 |
| 2.2.6 YAP/STAT3转录复合体在内皮细胞血管新生中的作用 | 第79-81页 |
| 2.2.7 YAP蛋白促进小鼠视网膜血管新生作用依赖转录因子STAT3 | 第81-83页 |
| 2.2.8 STAT3促进的ANG2生成在YAP蛋白介导的血管新生中的作用 | 第83-86页 |
| 讨论 | 第86-90页 |
| 3.1 Hippo/YAP通路参与VEGF对内皮细胞的调控 | 第86-87页 |
| 3.2 内皮细胞中YAP蛋白与STAT3的相互作用 | 第87-88页 |
| 3.3 YAP/STAT3转录复合体诱导ANG2表达 | 第88-90页 |
| 小结 | 第90-92页 |
| 全文结论 | 第92-93页 |
| 论文创新点 | 第93-94页 |
| 参考文献 | 第94-99页 |
| 发表论文和参加科研情况说明 | 第99-101页 |
| 综述 Hippo-YAP通路及其在心血管系统中的作用 | 第101-114页 |
| 综述参考文献 | 第111-114页 |
| 致谢 | 第114-116页 |
| 个人简历 | 第116页 |
