| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 第1章 综述 | 第10-22页 |
| 1.1 结核病病原学 | 第10页 |
| 1.2 结核病流行情况 | 第10-11页 |
| 1.3 结核病防治 | 第11页 |
| 1.4 结核分枝杆菌基因组分析 | 第11-12页 |
| 1.5 分枝杆菌细胞壁 | 第12-13页 |
| 1.6 脂肪酶 | 第13-22页 |
| 1.6.1 脂解酶概述 | 第13-15页 |
| 1.6.2 结核分枝杆菌中的脂解酶 | 第15-22页 |
| 第2章 引言 | 第22-24页 |
| 第3章 材料与方法 | 第24-44页 |
| 3.1 实验材料 | 第24-29页 |
| 3.1.1 供试菌株、细胞和质粒 | 第24页 |
| 3.1.2 培养基 | 第24-25页 |
| 3.1.3 引物 | 第25-26页 |
| 3.1.4 主要试剂 | 第26-27页 |
| 3.1.5 主要溶液 | 第27-28页 |
| 3.1.6 主要仪器 | 第28-29页 |
| 3.2 实验方法 | 第29-44页 |
| 3.2.1 LipU保守性及活性中心分析 | 第29页 |
| 3.2.2 Rv1076基因克隆 | 第29-32页 |
| 3.2.3 Rv1076蛋白表达 | 第32页 |
| 3.2.4 Rv1076蛋白纯化与复性 | 第32-33页 |
| 3.2.5 LipU酶活测定 | 第33-34页 |
| 3.2.6 最适底物测定 | 第34页 |
| 3.2.7 温度和pH值对酶活的影响 | 第34页 |
| 3.2.8 酶动力学参数测定 | 第34页 |
| 3.2.9 表面活性剂对LipU活性的影响 | 第34页 |
| 3.2.10 LipU活性位点验证 | 第34-35页 |
| 3.2.11 Rv1076在不同胁迫条件下的表达分析 | 第35-37页 |
| 3.2.12 Rv1076同源基因MSMEG_5271敲除 | 第37-39页 |
| 3.2.13 回补菌株构建 | 第39页 |
| 3.2.14 回补菌株鉴定 | 第39-40页 |
| 3.2.15 LipU对分枝杆菌生长的影响 | 第40-41页 |
| 3.2.16 rLipU诱导的细胞因子检测 | 第41-42页 |
| 3.2.17 3D模型构建 | 第42页 |
| 3.2.18 统计分析 | 第42-44页 |
| 第4章 结果与分析 | 第44-60页 |
| 4.1 Rv1076理化性质分析 | 第44页 |
| 4.2 Rv1076保守性分析 | 第44-45页 |
| 4.3 LipU蛋白二级结构分析 | 第45-46页 |
| 4.4 成功构建pET-28a-Rv1076重组质粒 | 第46-47页 |
| 4.5 LipU蛋白表达与纯化 | 第47页 |
| 4.6 LipU活性测定 | 第47-48页 |
| 4.7 LipU底物特异性分析 | 第48-49页 |
| 4.8 LipU的最适温度与pH及其稳定性分析 | 第49页 |
| 4.9 表面活性剂对LipU活性的影响 | 第49-50页 |
| 4.10 LipU动力学参数测定 | 第50-51页 |
| 4.11 LipU活性位点突变 | 第51页 |
| 4.12 LipU活性位点验证 | 第51页 |
| 4.13 LipU晶体结构分析 | 第51-52页 |
| 4.14 Rv1076在不同胁迫下的表达分析 | 第52-53页 |
| 4.15 Rv1076敲除与回补菌株构建 | 第53-54页 |
| 4.16 LipU有利于分枝杆菌存活 | 第54-55页 |
| 4.17 rLipU定位于细胞壁 | 第55-56页 |
| 4.18 rLipU重组蛋白促进细胞因子表达 | 第56-60页 |
| 第5章 结论与展望 | 第60-64页 |
| 5.1 结论 | 第60-62页 |
| 5.2 展望 | 第62-64页 |
| 参考文献 | 第64-76页 |
| 英文缩写一览表 | 第76-78页 |
| 致谢 | 第78-80页 |
| 硕士期间发表和撰写的文章 | 第80页 |
