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结核分枝杆菌脂解酶Rv1076(LipU)促进细菌生存及宿主细胞因子的表达

摘要第6-8页
Abstract第8-9页
第1章 综述第10-22页
    1.1 结核病病原学第10页
    1.2 结核病流行情况第10-11页
    1.3 结核病防治第11页
    1.4 结核分枝杆菌基因组分析第11-12页
    1.5 分枝杆菌细胞壁第12-13页
    1.6 脂肪酶第13-22页
        1.6.1 脂解酶概述第13-15页
        1.6.2 结核分枝杆菌中的脂解酶第15-22页
第2章 引言第22-24页
第3章 材料与方法第24-44页
    3.1 实验材料第24-29页
        3.1.1 供试菌株、细胞和质粒第24页
        3.1.2 培养基第24-25页
        3.1.3 引物第25-26页
        3.1.4 主要试剂第26-27页
        3.1.5 主要溶液第27-28页
        3.1.6 主要仪器第28-29页
    3.2 实验方法第29-44页
        3.2.1 LipU保守性及活性中心分析第29页
        3.2.2 Rv1076基因克隆第29-32页
        3.2.3 Rv1076蛋白表达第32页
        3.2.4 Rv1076蛋白纯化与复性第32-33页
        3.2.5 LipU酶活测定第33-34页
        3.2.6 最适底物测定第34页
        3.2.7 温度和pH值对酶活的影响第34页
        3.2.8 酶动力学参数测定第34页
        3.2.9 表面活性剂对LipU活性的影响第34页
        3.2.10 LipU活性位点验证第34-35页
        3.2.11 Rv1076在不同胁迫条件下的表达分析第35-37页
        3.2.12 Rv1076同源基因MSMEG_5271敲除第37-39页
        3.2.13 回补菌株构建第39页
        3.2.14 回补菌株鉴定第39-40页
        3.2.15 LipU对分枝杆菌生长的影响第40-41页
        3.2.16 rLipU诱导的细胞因子检测第41-42页
        3.2.17 3D模型构建第42页
        3.2.18 统计分析第42-44页
第4章 结果与分析第44-60页
    4.1 Rv1076理化性质分析第44页
    4.2 Rv1076保守性分析第44-45页
    4.3 LipU蛋白二级结构分析第45-46页
    4.4 成功构建pET-28a-Rv1076重组质粒第46-47页
    4.5 LipU蛋白表达与纯化第47页
    4.6 LipU活性测定第47-48页
    4.7 LipU底物特异性分析第48-49页
    4.8 LipU的最适温度与pH及其稳定性分析第49页
    4.9 表面活性剂对LipU活性的影响第49-50页
    4.10 LipU动力学参数测定第50-51页
    4.11 LipU活性位点突变第51页
    4.12 LipU活性位点验证第51页
    4.13 LipU晶体结构分析第51-52页
    4.14 Rv1076在不同胁迫下的表达分析第52-53页
    4.15 Rv1076敲除与回补菌株构建第53-54页
    4.16 LipU有利于分枝杆菌存活第54-55页
    4.17 rLipU定位于细胞壁第55-56页
    4.18 rLipU重组蛋白促进细胞因子表达第56-60页
第5章 结论与展望第60-64页
    5.1 结论第60-62页
    5.2 展望第62-64页
参考文献第64-76页
英文缩写一览表第76-78页
致谢第78-80页
硕士期间发表和撰写的文章第80页

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