| 摘要 | 第7-9页 |
| Abstract | 第9-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-20页 |
| 1.1 昆虫病原真菌的研究概况 | 第12页 |
| 1.2 昆虫病原真菌的侵染机制 | 第12-13页 |
| 1.3 影响昆虫病原真菌致病性的主要因素 | 第13-15页 |
| 1.3.1 温度 | 第13-14页 |
| 1.3.2 湿度 | 第14页 |
| 1.3.3 光照 | 第14页 |
| 1.3.4 氧化胁迫 | 第14-15页 |
| 1.4 锌指蛋白研究进展 | 第15-16页 |
| 1.4.1 锌指蛋白 | 第15-16页 |
| 1.4.2 锌指蛋白的分类 | 第16页 |
| 1.5 真菌锌指蛋白的功能研究 | 第16-20页 |
| 1.5.1 锌指蛋白调控真菌碳源和氮源代谢 | 第16页 |
| 1.5.2 锌指蛋白调控分生孢子的形成 | 第16-17页 |
| 1.5.3 锌指蛋白调控逆境胁迫应激反应 | 第17-20页 |
| 第二章 引言 | 第20-22页 |
| 2.1 研究的目的和意义 | 第20-21页 |
| 2.2 技术路线 | 第21-22页 |
| 第三章 材料与方法 | 第22-28页 |
| 3.1 实验材料 | 第22页 |
| 3.1.1 供试菌株 | 第22页 |
| 3.1.2 试虫 | 第22页 |
| 3.1.3 主要培养基配方 | 第22页 |
| 3.1.4 主要缓冲液配方 | 第22页 |
| 3.2 实验方法 | 第22-28页 |
| 3.2.1 同源敲除载体、超量表达载体及回复载体的构建 | 第22-23页 |
| 3.2.2 eGFP载体的构建及胁迫条件下荧光观察 | 第23-24页 |
| 3.2.3 大肠杆菌菌株DH5α的转化 | 第24页 |
| 3.2.4 农杆菌(AGL-1)感受态的制备 | 第24页 |
| 3.2.5 电激法转化农杆菌 | 第24-25页 |
| 3.2.6 农杆菌介导的球孢白僵菌遗传转化 | 第25页 |
| 3.2.7 真菌芽孢子感受态的制备及转化 | 第25-26页 |
| 3.2.8 转化子的筛选 | 第26页 |
| 3.2.9 RNA提取方法 | 第26页 |
| 3.2.10 分生孢子产量测定 | 第26-27页 |
| 3.2.11 孢子萌发测定 | 第27页 |
| 3.2.12 毒力测定 | 第27-28页 |
| 第四章 结果与分析 | 第28-46页 |
| 4.1 Bbstr1与Bbstr2基因序列分析 | 第28-29页 |
| 4.2 Bbstr1与Bbstr2的表达分析 | 第29-32页 |
| 4.2.1 RT-PCR检测Bbstr1与Bbstr2的表达 | 第29页 |
| 4.2.2 PBbstr1::eGFP与PBbstr2::eGFP在不同培养基中的表达分析 | 第29-30页 |
| 4.2.3 胁迫条件下PBbstr1::eGFP与PBbstr2::eGFP的表达分析 | 第30-31页 |
| 4.2.4 PBbstr1::eGFP与PBbstr2::eGFP在虫菌体中荧光观察 | 第31-32页 |
| 4.3 同源重组、回复互补和超量表达突变株的筛选及分子验证 | 第32-35页 |
| 4.3.1 同源敲除载体的构建 | 第32-33页 |
| 4.3.2 敲除突变株与回复互补突变株的筛选 | 第33-34页 |
| 4.3.3 超量表达突变株的筛选 | 第34-35页 |
| 4.4 Bbstr1与Bbstr2对球孢白僵菌生长发育的影响 | 第35-42页 |
| 4.4.1 Bbstr1与Bbstr2影响球孢白僵菌在不同氮源的生长 | 第35-36页 |
| 4.4.2 Bbstr1与Bbstr2影响球孢白僵菌氮源利用相关基因的表达 | 第36-37页 |
| 4.4.3 Bbstr1与Bbstr2对球孢白僵菌逆境胁迫反应的影响 | 第37-39页 |
| 4.4.4 ROS分解酶基因的表达 | 第39-40页 |
| 4.4.5 逆境胁迫相关响应基因表达分析 | 第40-41页 |
| 4.4.6 分生孢子表位碳源染色观察 | 第41-42页 |
| 4.5 Bbstr1与Bbstr2对球孢白僵菌分生孢子的影响 | 第42-43页 |
| 4.6 Bbstr1与Bbstr2对球孢白僵菌分生孢子萌发的影响 | 第43页 |
| 4.7 菌株毒力分析 | 第43-46页 |
| 第五章 讨论 | 第46-48页 |
| 第六章 结论 | 第48-50页 |
| 参考文献 | 第50-58页 |
| 附录1 英文缩写 | 第58-59页 |
| 附录2 引物序列 | 第59-61页 |
| 附录3 载体构建图 | 第61-62页 |
| 附录4 在校期间撰写和发表的论文 | 第62-64页 |
| 致谢 | 第64-65页 |
