摘要 | 第10-12页 |
Abstract | 第12-13页 |
第1章 绪论 | 第14-20页 |
1.1 微量元素铁的研究概况 | 第14-15页 |
1.1.1 微量元素铁的概述 | 第14页 |
1.1.2 微量元素铁缺乏的概述 | 第14-15页 |
1.2 补铁剂的研究现状 | 第15-16页 |
1.3 铁载体概述 | 第16-18页 |
1.3.1 铁载体的发现及检测 | 第16-17页 |
1.3.2 铁载体的研究现状 | 第17-18页 |
1.4 研究的目的及意义 | 第18-20页 |
第2章 耐高铁菌株及产铁载体的筛选鉴定 | 第20-28页 |
2.1 引言 | 第20页 |
2.2 实验材料 | 第20-22页 |
2.2.1 样品 | 第20页 |
2.2.2 主要试剂 | 第20-21页 |
2.2.3 培养基及溶液配制 | 第21-22页 |
2.2.3.1 培养基 | 第21页 |
2.2.3.2 溶液配制 | 第21-22页 |
2.2.4 主要仪器 | 第22页 |
2.3 实验方法 | 第22-24页 |
2.3.1 耐高铁菌株的耐高铁活性分析 | 第22页 |
2.3.1.1 耐高铁真菌的活化及耐高铁活性分析 | 第22页 |
2.3.1.2 耐高铁细菌的活化及耐高铁活性分析 | 第22页 |
2.3.1.3 耐高铁放线菌的活化及活性分析 | 第22页 |
2.3.2 耐高铁菌株产铁载体的筛选确定 | 第22-23页 |
2.3.3 铁载体类型的检测 | 第23-24页 |
2.3.3.1 铁载体粗液的样品的制备 | 第23页 |
2.3.3.2 Arow实验 | 第23页 |
2.3.3.3 Csaky试验 | 第23页 |
2.3.3.4 高氯酸铁实验 | 第23页 |
2.3.3.5 FeCl_3实验 | 第23-24页 |
2.4 结果与分析 | 第24-26页 |
2.4.1 耐高铁菌株的耐高铁活性分析 | 第24页 |
2.4.2 产铁载体菌株的鉴定结果 | 第24-25页 |
2.4.3 耐高铁菌株铁载体类型检测结果 | 第25-26页 |
2.5 讨论 | 第26-27页 |
2.6 小结 | 第27-28页 |
第3章 耐高铁菌株中产高活性铁载体优势菌的筛选鉴定及铁载体的初步分离纯化 | 第28-43页 |
3.1 引言 | 第28页 |
3.2 实验材料 | 第28-30页 |
3.2.1 样品 | 第28页 |
3.2.2 主要试剂 | 第28-29页 |
3.2.3 培养基和溶液配制 | 第29页 |
3.2.3.1 培养基配制 | 第29页 |
3.2.3.2 溶液的配制 | 第29页 |
3.2.4 主要仪器 | 第29-30页 |
3.3 实验方法 | 第30-33页 |
3.3.1 耐高铁菌株胞内铁含量的测定 | 第30页 |
3.3.1.1 铁含量测定标准曲线的绘制 | 第30页 |
3.3.1.2 胞内铁含量的测定 | 第30页 |
3.3.2 铁载体含量的测定 | 第30-31页 |
3.3.2.1 铁载体测定的标准曲线的制作 | 第30页 |
3.3.2.2 菌株产铁载体含量的测定 | 第30-31页 |
3.3.3 产铁载体优势菌的筛选 | 第31页 |
3.3.4 不同因素对耐高铁菌株产铁载体的影响 | 第31页 |
3.3.4.1 不同发酵时间对菌株产铁载体TZT-11 的影响 | 第31页 |
3.3.4.2 铁离子浓度对产铁载体TZT-11 的影响 | 第31页 |
3.3.4.3 pH产铁载体TZT-11 的影响 | 第31页 |
3.3.4.4 温度对铁载体TZT-11 活性的影响 | 第31页 |
3.3.5 产铁载体菌T-G-G-Y的菌种鉴定 | 第31-32页 |
3.3.5.1 形态学鉴定 | 第31页 |
3.3.5.2 菌株T-G-G-Y总DNA提取 | 第31-32页 |
3.3.5.3 18s rDNA及 26s rDNA基因PCR扩增 | 第32页 |
3.3.5.4 目的DNA序列系统发育学分析 | 第32页 |
3.3.6 高活性铁载体TZT-11 分离纯化条件的初步摸索 | 第32-33页 |
3.3.6.1 优势菌T-G-G-Y的发酵培养及铁载体TZT-11 粗样制备 | 第32-33页 |
3.3.6.2 铁载体TZT-11 粗样的分离纯化实验 | 第33页 |
3.4 结果与分析 | 第33-40页 |
3.4.1 耐高铁微生物铁含量测定方法的建立 | 第33-34页 |
3.4.2 铁载体含量测定方法的建立 | 第34页 |
3.4.3 产铁载体优势菌的筛选结果 | 第34-36页 |
3.4.4 不同因素对高产铁载体菌株T-G-G-Y的影响 | 第36-38页 |
3.4.4.1 不同发酵时间对菌株产铁载体TZT-11 的影响 | 第36页 |
3.4.4.2 铁离子浓度对菌株产铁载体的影响 | 第36-37页 |
3.4.4.3 不同pH产铁载体的影响 | 第37页 |
3.4.4.4 温度对铁载体活性的影响 | 第37-38页 |
3.4.5 菌种鉴定结果 | 第38-40页 |
3.4.5.1 形态学鉴定结果 | 第38页 |
3.4.5.2 分子生物学鉴定 | 第38-39页 |
3.4.5.3 系统分类分析 | 第39-40页 |
3.4.6 高活性铁载体TZT-11 分离纯化条件的初步摸索 | 第40页 |
3.4.6.1 活性炭分离结果 | 第40页 |
3.4.6.2 树脂静态吸附实验结果 | 第40页 |
3.5 讨论 | 第40-41页 |
3.6 小结 | 第41-43页 |
第4章 耐高铁菌铁载体的铁转运活力的验证性研究 | 第43-56页 |
4.1 引言 | 第43页 |
4.2 实验材料 | 第43-44页 |
4.2.1 样品 | 第43页 |
4.2.2 主要试剂 | 第43-44页 |
4.2.3 培养基的配制 | 第44页 |
4.2.4 主要仪器 | 第44页 |
4.3 实验方法 | 第44-47页 |
4.3.1 产铁载体耐高铁菌株的活化及铁载体的收集 | 第44页 |
4.3.2 耐高铁菌株产铁载体加入酿酒酵母铁转化实验 | 第44-45页 |
4.3.3 耐高铁菌铁载体TZT-12 对酿酒酵母生长的影响 | 第45页 |
4.3.4 耐高铁菌所产铁载体TZT-12 对酿酒酵母胞内铁含量的影响 | 第45页 |
4.3.5 不同因素对耐高铁菌株产铁载体TZT-12 的影响 | 第45页 |
4.3.5.1 不同发酵时间对产铁载体TZT-12 的影响 | 第45页 |
4.3.5.2 铁离子浓度对铁载体TZT-12 产生的影响 | 第45页 |
4.3.5.3 pH铁载体TZT-12 产生的影响 | 第45页 |
4.3.5.4 温度对铁载体TZT-12 活性的影响 | 第45页 |
4.3.6 产铁载体菌株YP-12 的鉴定 | 第45-47页 |
4.3.6.1 形态学鉴定 | 第45-46页 |
4.3.6.2 产铁载体菌株YP-12 总DNA提取 | 第46页 |
4.3.6.3 26s rDNA基因PCR扩增 | 第46页 |
4.3.6.4 目的DNA序列系统发育学分析 | 第46页 |
4.3.6.5 G+C mol%含量测定 | 第46-47页 |
4.3.7 碳源同化法鉴定 | 第47页 |
4.3.8 酵母样真菌微量生化管鉴定 | 第47页 |
4.4 结果与分析 | 第47-54页 |
4.4.1 耐高铁菌株铁载体加入酿酒酵母铁转化实验 | 第47-48页 |
4.4.2 耐高铁菌铁载体TZT-12 对酿酒酵母生长的影响 | 第48-49页 |
4.4.3 耐高铁菌株铁载体TZT-12 对酿酒酵母胞内铁含量的影响 | 第49页 |
4.4.4 不同因素对耐高铁菌株产铁载体TZT-12 的影响 | 第49-51页 |
4.4.4.1 不同发酵时间对产铁载体TZT-12 的影响 | 第49页 |
4.4.4.2 铁离子浓度对铁载体TZT-12 产量的影响 | 第49-50页 |
4.4.4.3 pH铁载体TZT-12 产量的影响 | 第50页 |
4.4.4.4 温度对铁载体TZT-12 活性的影响 | 第50-51页 |
4.4.5 产铁载体菌株YP-12 鉴定结果 | 第51-53页 |
4.4.5.1 菌株YP-12 形态学鉴定结果 | 第51页 |
4.4.5.2 分子生物学鉴定 | 第51-52页 |
4.4.5.3 系统分类分析 | 第52页 |
4.4.5.4 G+C含量测定结果 | 第52-53页 |
4.4.6 优势菌生理生化鉴定结果 | 第53-54页 |
4.5 讨论 | 第54-55页 |
4.6 小结 | 第55-56页 |
第5章 铁载体TZT-12 添加制备富铁酵母及其对贫血模型小鼠药效评价研究 | 第56-66页 |
5.1 引言 | 第56页 |
5.2 实验材料 | 第56-57页 |
5.2.1 样品 | 第56页 |
5.2.2 实验动物 | 第56页 |
5.2.3 主要试剂 | 第56-57页 |
5.2.4 主要仪器 | 第57页 |
5.2.5 溶液配制 | 第57页 |
5.3 实验方法 | 第57-60页 |
5.3.1 利用铁载体TZT-12 制备富铁酵母 | 第57页 |
5.3.2 铁载体TZT-12 制备富铁酵母对缺铁性贫血小鼠的药效评价 | 第57-58页 |
5.3.2.1 缺铁性贫血模型的建立 | 第57-58页 |
5.3.2.2 恢复实验 | 第58页 |
5.3.3 检测指标 | 第58-60页 |
5.3.3.1 血液指标检测 | 第58-59页 |
5.3.3.2 脏器系数的测定 | 第59页 |
5.3.3.3 脏器中铁含量的测定 | 第59页 |
5.3.3.4 血清总超氧化物气化酶、丙二醛及谷胱甘肽过氧化物酶的测定 | 第59页 |
5.3.3.5 红细胞内游离原卟啉的测定 | 第59页 |
5.3.3.6 数据分析 | 第59-60页 |
5.4 结果与分析 | 第60-64页 |
5.4.1 富铁酵母的制备 | 第60页 |
5.4.2 缺铁性模型小鼠的药效评价 | 第60-64页 |
5.4.2.1 体重增长指数 | 第60页 |
5.4.2.2 富集铁酵母对小鼠血红蛋白含量的影响 | 第60-61页 |
5.4.2.3 富铁酵母对小鼠脏器指数的影响 | 第61页 |
5.4.2.4 富铁酵母对血清铁和总铁结合力的影响 | 第61-62页 |
5.4.2.5 富铁酵母对小鼠红细胞内游离原卟啉含量的影响 | 第62页 |
5.4.2.6 富铁酵母对小鼠转铁蛋白和转铁蛋白受体含量的影响 | 第62-63页 |
5.4.2.7 富铁酵母对小鼠肝脏和脾脏中铁含量的影响 | 第63页 |
5.4.2.8 富铁酵母对小鼠血清中SOD、MDA和GSH-XP的影响 | 第63-64页 |
5.4.2.9 血液指标 | 第64页 |
5.5 讨论 | 第64-65页 |
5.6 小结 | 第65-66页 |
结论 | 第66-68页 |
参考文献 | 第68-74页 |
致谢 | 第74-75页 |
附录(硕士期间发表论文) | 第75页 |