| 摘要 | 第3-6页 |
| ABSTRACT | 第6-9页 |
| 英文缩略词表 | 第10-13页 |
| 第一章 前言 | 第13-30页 |
| 第一节 帕金森病的背景 | 第13页 |
| 第二节 Α-SYN与帕金森病 | 第13-19页 |
| 2.1 α-syn的结构与生理功能 | 第13-18页 |
| 2.2 异常α-syn与帕金森病 | 第18-19页 |
| 第三节 Α-SYN与自噬 | 第19-27页 |
| 3.1 自噬与帕金森病 | 第19-23页 |
| 3.2 α-syn与自噬的联系 | 第23-25页 |
| 3.3 自噬调节在帕金森病治疗中的前景 | 第25-27页 |
| 第四节 GM1神经节苷脂 | 第27-29页 |
| 4.1 GM1的结构及生理功能 | 第27-28页 |
| 4.2 GM1在神经退行性疾病中的作用研究 | 第28-29页 |
| 第五节 立题依据和研究内容 | 第29-30页 |
| 第二章 GM1促进Α-SYN降解的作用机制研究 | 第30-52页 |
| 第一节 实验材料 | 第30-33页 |
| 1.1 细胞株 | 第30页 |
| 1.2 主要药品与试剂 | 第30-33页 |
| 1.3 主要仪器 | 第33页 |
| 第二节 实验方法 | 第33-42页 |
| 2.1 PC12~(α-synA53T)条件过表达细胞复苏、传代及冻存 | 第33-34页 |
| 2.2 细胞给药方式 | 第34-35页 |
| 2.3 Westernblot筛选GM1在PC12~(α-synA53T)条件过表达细胞的作用浓度与时间 | 第35-36页 |
| 2.4 Westernblot测定溶酶体在GM1促进α-syn降解中的作用 | 第36-37页 |
| 2.5 Westernblot测定GM1对α-syn蛋白表达水平的影响 | 第37页 |
| 2.6 westernblot测定GM1对自噬信号通路相关蛋白表达水平的影响 | 第37-39页 |
| 2.7 激光共聚焦成像检测GM1对PC12~(α-synA53T)条件过表达细胞内α-syn与LC3共定位的影响 | 第39-40页 |
| 2.8 GM1-FITC的合成步骤 | 第40页 |
| 2.9 激光共聚焦3D成像观察GM1-FITC在PC12~(α-synA53T)条件过表达细胞内的分布情况 | 第40页 |
| 2.10 激光共聚焦成像检测PC12~(α-synA53T)条件过表达细胞GM1-FITC与α-syn共定位情况 | 第40-41页 |
| 2.11 激光共聚焦成像检测PC12~(α-synA53T)条件过表达细胞GM1-FITC与LC3共定位情况 | 第41-42页 |
| 2.12 统计学处理 | 第42页 |
| 第三节 实验结果 | 第42-50页 |
| 3.1 GM1作用浓度筛选 | 第42-43页 |
| 3.2 GM1作用时间筛选 | 第43页 |
| 3.3 溶酶体功能在GM1促进α-syn降解中影响 | 第43-44页 |
| 3.4 GM1对PC12~(α-synA53T)条件过表达细胞中α-syn和TH表达的影响 | 第44-45页 |
| 3.5 GM1对PC12~(α-synA53T)条件过表达细胞中自噬相关蛋白表达的影响 | 第45-46页 |
| 3.6 GM1对PC12~(α-synA53T)条件过表达细胞内α-syn与LC3共定位的影响 | 第46-47页 |
| 3.7 GM1-FITC在PC12~(α-synA53T)条件过表达细胞内的三维分布 | 第47-48页 |
| 3.8 PC12~(α-synA53T)条件过表达细胞内GM1-FITC与α-syn的共定位 | 第48-49页 |
| 3.9 PC12~(α-synA53T)条件过表达细胞内GM1-FITC与LC3的共定位 | 第49-50页 |
| 第四节 小结与讨论 | 第50-52页 |
| 第三章 GM1在自噬信号通路中靶标蛋白的研究 | 第52-66页 |
| 第一节 实验材料 | 第52-54页 |
| 1.1 细胞株 | 第52页 |
| 1.2 主要药品与试剂配置 | 第52-54页 |
| 1.3 主要仪器 | 第54页 |
| 第二节 实验方法 | 第54-60页 |
| 2.1 SH-SY5Y细胞复苏、传代及冻存 | 第54-55页 |
| 2.2 GM1靶标蛋白的预测及分子对接 | 第55-56页 |
| 2.3 Q-PCR测定GM1对ATG13mRNA表达水平的影响 | 第56-57页 |
| 2.4 激光共聚焦成像检测GM1对SH-SY5Y细胞内ATG13的影响 | 第57页 |
| 2.5 免疫共沉淀测定GM1对SH-SY5Y细胞内ATG13与ULK1相互作用的影响 | 第57-59页 |
| 2.6 激光共聚焦成像检测SH-SY5Y细胞内GM1-FITC与ATG13共定位情况 | 第59页 |
| 2.7 统计学处理 | 第59-60页 |
| 第三节 实验结果 | 第60-65页 |
| 3.1 GM1作用自噬信号通路的靶标蛋白预测 | 第60-61页 |
| 3.2 GM1对SH-SY5Y细胞中ATG13mRNA表达的影响 | 第61页 |
| 3.3 GM1对SH-SY5Y细胞内ATG13的影响 | 第61-62页 |
| 3.4 GM1增加SH-SY5Y细胞内ATG13与ULK1相互作用 | 第62-63页 |
| 3.5 MPP~+诱导的PD细胞模型中GM1-FITC与ATG13的共定位 | 第63-65页 |
| 第四节 小结与讨论 | 第65-66页 |
| 第四章 总结与展望 | 第66-67页 |
| 参考文献 | 第67-85页 |
| 硕士期间论文成果 | 第85-86页 |
| 致谢 | 第86-87页 |
