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MPP~+诱导SH-SY5Y细胞慢性损伤帕金森病模型的建立及鹿茸多肽的保护作用

中文摘要第4-8页
Abstract第8-11页
目录第12-19页
引言第19-21页
第1章 绪论第21-45页
    1.1 帕金森病的研究进展第21-30页
        1.1.1 帕金森病的发病机制第21-26页
        1.1.2 帕金森病的动物模型和细胞模型第26-28页
        1.1.3 帕金森病的临床治疗第28-30页
    1.2 多肽治疗帕金森病的研究现状第30-45页
        1.2.1 动物和植物来源多肽第30-33页
        1.2.2 生物内源性多肽第33-43页
        1.2.3 人工合成多肽第43-45页
第2章 VAPs 的提取、分离和纯化第45-57页
    2.1 材料与方法第45-46页
        2.1.1 试剂第45页
        2.1.2 仪器第45-46页
        2.1.3 鹿茸第46页
    2.2 试剂配制第46-48页
        2.2.1 SDS-PAGE 相关试剂配制第46-48页
        2.2.2 考马斯亮蓝蛋白含量测定相关试剂配制第48页
    2.3 实验方法第48-49页
        2.3.1 鹿茸总多肽(VAPs)的提取第48-49页
        2.3.2 SDS-PAGE第49页
        2.3.3 VAPs 氨基酸组成分析第49页
        2.3.4 VAPs 激光解吸电离飞行时间质谱分析第49页
    2.4 实验结果第49-54页
    2.5 讨论第54-57页
第3章 VAPs 对 MPP~+急性损伤 SH-SY5Y 细胞的保护作用第57-81页
    3.1 材料与方法第57-58页
        3.1.1 试剂第57-58页
        3.1.2 仪器第58页
        3.1.3 细胞第58页
    3.2 试剂配制第58-63页
        3.2.1 药物配制第58-59页
        3.2.2 细胞培养相关试剂配制第59页
        3.2.3 Western blot 试验相关试剂的配制第59-61页
        3.2.4 免疫细胞化学相关溶液的配制第61-63页
    3.3 实验方法第63-65页
        3.3.1 细胞培养第63页
        3.3.2 MTT 法检测 MPP~+对 SH-SY5Y 细胞的损伤作用第63-64页
        3.3.3 MTT 法检测 VAPs 对 MPP~+急性损伤 SH-SY5Y 细胞的保护作用第64页
        3.3.4 Hoechst 33342 染色检测细胞凋亡第64页
        3.3.5 罗丹明 123 染色检测△Ψm 改变第64页
        3.3.6 细胞内 ROS 水平的检测第64-65页
        3.3.7 Western blot 检测内质网应激相关蛋白第65页
        3.3.8 免疫细胞化学检测内质网应激相关蛋白第65页
    3.4 实验结果第65-78页
        3.4.1 VAPs 对 MPP~+急性损伤 SH-SY5Y 细胞的保护作用第65-67页
        3.4.2 VAPs 对 MPP~+急性损伤 SH-SY5Y 细胞凋亡的抑制作用第67-69页
        3.4.3 VAPs 可部分恢复 MPP~+急性损伤SH-SY5Y 细胞的△Ψm第69-70页
        3.4.4 VAPs 可降低 MPP~+急性损伤SH-SY5Y细胞内活性氧簇含量第70-71页
        3.4.5 VAPs 对 MPP~+急性损伤 SH-SY5Y 细胞内质网应激相关蛋白表达的影响第71-78页
    3.5 讨论第78-81页
第4章 VAPs 对 MPP~+慢性损伤 SH-SY5Y 细胞的保护作用第81-103页
    4.1 材料与方法第81页
        4.1.1 试剂第81页
        4.1.2 仪器第81页
        4.1.3 细胞第81页
    4.2 试剂配制第81-82页
        4.2.1 药物配制第81页
        4.2.2 细胞培养相关试剂配制第81页
        4.2.3 荧光染色相关试剂的配制第81页
        4.2.4 Western blot 试验相关试剂的配制第81-82页
        4.2.5 免疫细胞化学相关试剂的配制第82页
    4.3 实验方法第82-83页
        4.3.1 细胞培养第82页
        4.3.2 MTT 法检测 MPP~+对 SH-SY5Y 细胞的损伤作用第82页
        4.3.3 MTT 法检测 VAPs 对 MPP~+慢性损伤 SH-SY5Y 细胞的保护作用第82-83页
        4.3.4 Hoechst 33342 染色检测细胞凋亡第83页
        4.3.5 罗丹明 123 染色检测线粒体膜电位改变第83页
        4.3.6 H2DCFDA 染色检测细胞内活性氧簇第83页
        4.3.7 Western blot 检测内质网应激相关蛋白第83页
        4.3.8 免疫细胞化学检测内质网应激相关蛋白第83页
    4.4 实验结果第83-100页
        4.4.1 VAPs 对 MPP~+慢性损伤 SH-SY5Y 细胞的保护作用第83-85页
        4.4.2 VAPs 对 MPP~+慢性损伤 SH-SY5Y 细胞凋亡的影响第85-87页
        4.4.3 VAPs 对 MPP~+慢性损伤 SH-SY5Y 细胞的线粒体膜电位的影响第87-89页
        4.4.4 VAPs 对 MPP~+慢性损伤SH-SY5Y细胞内ROS含量的影响第89-91页
        4.4.5 VAPs 下调 MPP~+慢性损伤 SH-SY5Y 细胞内质网应激相关蛋白的表达第91-100页
    4.5 讨论第100-103页
结论第103-105页
参考文献第105-123页
攻读学位期间所得的科研成果第123-125页
致谢第125页

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