摘要 | 第5-8页 |
ABSTRACT | 第8-11页 |
第一章 绪论 | 第16-20页 |
第二章 实验材料 | 第20-24页 |
2.1 材料与试剂 | 第20-23页 |
2.1.1 细胞株 | 第20页 |
2.1.2 试剂与耗材 | 第20-22页 |
2.1.3 主要试剂配制 | 第22-23页 |
2.2 主要仪器 | 第23-24页 |
第三章 实验方法 | 第24-40页 |
3.1 细胞培养 | 第24页 |
3.2 瞬时转染 | 第24-26页 |
3.3 荧光实时定量PCR(real-timeqPCR) | 第26-30页 |
3.3.1 样品的RNA抽提 | 第26-27页 |
3.3.2 cDNA合成 | 第27-28页 |
3.3.3 定量PCR | 第28-30页 |
3.3.4 结果计算 | 第30页 |
3.4 EdU检测细胞增殖 | 第30-32页 |
3.4.1 EdU标记 | 第30-31页 |
3.4.2 细胞固定及透膜处理 | 第31页 |
3.4.3 EdU检测 | 第31-32页 |
3.5 细胞凋亡 | 第32页 |
3.6 平板克隆形成实验 | 第32-33页 |
3.7 Transwell | 第33-34页 |
3.8 细胞周期 | 第34页 |
3.9 WesternBloting | 第34-37页 |
3.9.1 提蛋白 | 第34页 |
3.9.2 BCA法测定蛋白浓度 | 第34-35页 |
3.9.3 Westernblot | 第35-37页 |
3.10 荧光素酶报告分析 | 第37页 |
3.12 环状RNA微阵列分析 | 第37-38页 |
3.13 统计分析 | 第38-40页 |
第四章 实验结果 | 第40-50页 |
4.1 circRNAs在三阴乳腺癌组织和细胞中的表达谱 | 第40-41页 |
4.2 circRAD18在三阴乳腺癌细胞中高表达 | 第41-42页 |
4.3 circRNA-RAD18参与三阴乳腺癌细胞的病理进程 | 第42-45页 |
4.3.1 沉默circRAD18的表达能抑制三阴乳腺癌细胞系的增殖 | 第43页 |
4.3.2 沉默circRAD18的表达能促进三阴乳腺癌细胞系的凋亡 | 第43页 |
4.3.3 沉默circRAD18的表达能够抑制三阴乳腺癌细胞的的侵袭能力 | 第43-45页 |
4.4 沉默circRAD18的表达能够促进miR-1299和miR-498的表达 | 第45页 |
4.5 miR-1299/miR-498通过靶向CDK6抑制 TNBC 细胞的增殖 | 第45-48页 |
4.5.1 miR-1299/miR-498能够靶向CDK6并影响CDK6的表达 | 第45-46页 |
4.5.2 miR-1299/miR-498通过靶向CDK6来抑制TNBC细胞的增殖能力 | 第46-48页 |
4.6 circRAD18通过下调miRNAs的表达来调节CDK6的表达从而影响TNBC细胞的增殖 | 第48-50页 |
第五章 讨论 | 第50-54页 |
第六章 结论 | 第54-56页 |
参考文献 | 第56-62页 |
综述 | 第62-72页 |
参考文献 | 第68-72页 |
硕士期间发表的论文 | 第72-74页 |
致谢 | 第74-75页 |