| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 主要符号对照表 | 第11-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-26页 |
| 1.1 马铃薯DM和RH的基因组研究概述 | 第14-15页 |
| 1.2 马铃薯转基因研究概述 | 第15-16页 |
| 1.3 T-DNA插入突变技术在植物功能基因组研究中的应用 | 第16-21页 |
| 1.3.1 T-DNA转入植株细胞的分子机理 | 第17-19页 |
| 1.3.2 T-DNA插入技术的载体 | 第19-21页 |
| 1.4 马铃薯农杆菌转化法的优势 | 第21-22页 |
| 1.5 增强子捕获元件插入片段侧翼序列分析 | 第22-23页 |
| 1.5.1 质粒挽救(plasmid rescue)法 | 第22页 |
| 1.5.2 反向PCR(inversed PCR, IPCR) | 第22-23页 |
| 1.5.3 热不对称交错PCR TALK-PCR) | 第23页 |
| 1.5.4 PCR-walking | 第23页 |
| 1.5.5 T-linker PCR | 第23页 |
| 1.6 研究目的和技术路线 | 第23-26页 |
| 1.6.1 研究目的 | 第23-24页 |
| 1.6.2 技术路线 | 第24-26页 |
| 第二章 马铃薯再生体系的创建 | 第26-42页 |
| 2.1 实验材料 | 第26-27页 |
| 2.1.1 马铃薯 | 第26页 |
| 2.1.2 试剂 | 第26页 |
| 2.1.3 MS 基础培养基的配制 | 第26-27页 |
| 2.2 实验方法 | 第27-29页 |
| 2.2.1 马铃薯 DM 和 RH 材料的鉴定 | 第27页 |
| 2.2.2 马铃薯 DM 再生体系的创建 | 第27-28页 |
| 2.2.3 马铃薯 RH 再生体系的创建 | 第28-29页 |
| 2.3 实验结果 | 第29-42页 |
| 2.3.1 马铃薯 DM 和 RH 材料的鉴定 | 第29-30页 |
| 2.3.2 马铃薯 DM 再生体系的创建 | 第30-36页 |
| 2.3.3 马铃薯 RH 再生体系的创建 | 第36-42页 |
| 第三章 农杆菌转化体系的优化 | 第42-50页 |
| 3.1 转化农杆菌的制备和鉴定 | 第42-46页 |
| 3.1.1 实验材料 | 第42-43页 |
| 3.1.2 实验方法 | 第43-45页 |
| 3.1.3 实验结果 | 第45-46页 |
| 3.2 农杆菌转化体系的优化 | 第46-50页 |
| 3.2.1 实验材料 | 第46页 |
| 3.2.2 实验方法 | 第46-48页 |
| 3.2.3 实验结果 | 第48-50页 |
| 第四章 转化株系的鉴定 | 第50-54页 |
| 4.1 实验材料 | 第50页 |
| 4.2 实验方法 | 第50-51页 |
| 4.2.1 含抗生素基础培养的制备和不定芽的生根培养 | 第50-51页 |
| 4.2.2 转化株系 DNA 的特异性扩增 | 第51页 |
| 4.3 实验结果 | 第51-54页 |
| 4.3.1 抗生素下转化株系继代情况 | 第51-52页 |
| 4.3.2 转化植株 DNA 的特异性扩增 | 第52-54页 |
| 第五章 转化株系外源基因拷贝数分析 | 第54-62页 |
| 5.1 实验材料 | 第54页 |
| 5.2 实验方法 | 第54-56页 |
| 5.2.1 马铃薯材料 c DNA 的获得和质粒 DNA 的提取 | 第54页 |
| 5.2.2 引物的合成 | 第54-55页 |
| 5.2.3 标准品的稀释 | 第55页 |
| 5.2.4 标准曲线的建立 | 第55-56页 |
| 5.2.5 样品拷贝数分析 | 第56页 |
| 5.3 实验结果 | 第56-62页 |
| 5.3.1 内参基因 PCR 扩增琼脂糖电泳 | 第56-57页 |
| 5.3.2 外源基因 PCR 扩增琼脂糖电泳 | 第57-58页 |
| 5.3.3 内参基因标准曲线和溶解曲线 | 第58-59页 |
| 5.3.4 外源基因标准曲线和溶解曲线 | 第59-60页 |
| 5.3.5 样品拷贝数和溶解曲线 | 第60-62页 |
| 第六章 实验结果讨论 | 第62-70页 |
| 6.1 马铃薯再生体系的创建 | 第62-66页 |
| 6.1.1 马铃薯 DM 再生体系的创建 | 第62-64页 |
| 6.1.2 马铃薯 RH 再生体系的创建 | 第64-66页 |
| 6.2 农杆菌转化体系的优化 | 第66-68页 |
| 6.2.1 农杆菌浓度和共培养时间的筛选 | 第67页 |
| 6.2.2 潮霉素浓度对外植体生活力的影响 | 第67-68页 |
| 6.3 转化株系的鉴定 | 第68页 |
| 6.4 转化株系的拷贝数分析 | 第68-70页 |
| 第七章 实验结论 | 第70-71页 |
| 参考文献 | 第71-78页 |
| 致谢 | 第78-79页 |
| 作者简历 | 第79页 |
