| 前言 | 第4-5页 |
| 摘要 | 第5-8页 |
| Abstract | 第8-11页 |
| 英文缩略词表 | 第12-17页 |
| 第1章 文献综述 | 第17-24页 |
| 1.1 肾间质纤维化的概述 | 第17-18页 |
| 1.2 肾间质纤维化的发生机制 | 第18-20页 |
| 1.2.1 免疫抑制剂药物毒性 | 第18页 |
| 1.2.2 抗体介导的排斥反应(AMR) | 第18-19页 |
| 1.2.3 巨噬细胞对移植肾损伤的影响 | 第19页 |
| 1.2.4 上皮间充质转化(EMT) | 第19-20页 |
| 1.2.5 其他 | 第20页 |
| 1.3 循环成纤维细胞与肾间质纤维化 | 第20-24页 |
| 1.3.1 循环纤维细胞的命名及来源 | 第20-21页 |
| 1.3.2 循环成纤维细胞的表面蛋白 | 第21页 |
| 1.3.3 循环成纤维细胞的迁移和分化 | 第21-22页 |
| 1.3.4 循环成纤维细胞的获取及培养 | 第22页 |
| 1.3.5 循环成纤维细胞与肾间质纤维化 | 第22-24页 |
| 第2章 实验材料与方法 | 第24-37页 |
| 2.1 实验材料 | 第24-28页 |
| 2.1.1 标本来源 | 第24页 |
| 2.1.2 细胞来源 | 第24页 |
| 2.1.3 动物来源 | 第24页 |
| 2.1.4 主要试剂 | 第24-25页 |
| 2.1.5 主要仪器和设备 | 第25-26页 |
| 2.1.6 主要试剂的配制 | 第26-28页 |
| 2.2 实验方法 | 第28-37页 |
| 2.2.1 免疫组织化学染色法 | 第28页 |
| 2.2.2 组织切片的免疫荧光染色 | 第28-29页 |
| 2.2.3 组织切片的免疫荧光双重化学染色 | 第29页 |
| 2.2.4 肾组织切片的原位杂交 | 第29-30页 |
| 2.2.5 雄性大鼠外周血循环成纤维细胞的分离和培养 | 第30-31页 |
| 2.2.6 细胞的免疫荧光双重化学染色 | 第31-32页 |
| 2.2.7 sh CCR7 慢病毒载体的构建 | 第32页 |
| 2.2.8 sh CCR7 慢病毒转染循环成纤维细胞 | 第32页 |
| 2.2.9 Western Blot检测沉默效率 | 第32-33页 |
| 2.2.10 Transwell检测循环成纤维细胞的迁移能力 | 第33-34页 |
| 2.2.11 肾移植动物模型的构建 | 第34-35页 |
| 2.2.11.1 术前准备 | 第34页 |
| 2.2.11.2 摘取供肾 | 第34页 |
| 2.2.11.3 受体移植 | 第34页 |
| 2.2.11.4 术后处理 | 第34-35页 |
| 2.2.12 尿蛋白和尿肌酐测定 | 第35页 |
| 2.2.13 血尿素氮和血肌酐测定 | 第35页 |
| 2.2.14 大鼠尾静脉输注循环成纤维细胞 | 第35页 |
| 2.2.15 苏木精-伊红(HE)染色 | 第35页 |
| 2.2.16 MASSON染色 | 第35-36页 |
| 2.2.17 PAS染色 | 第36页 |
| 2.2.18 PASM染色 | 第36页 |
| 2.2.19 统计学分析 | 第36-37页 |
| 第3章 实验结果 | 第37-61页 |
| 3.1 人体移植肾中成纤维细胞的分布、来源和肾功的关系及CCL21 和CCR7的蛋白表达 | 第37-44页 |
| 3.1.1 FSP-1 在肾穿刺组织切片中的表达 | 第37-38页 |
| 3.1.1.1 免疫组织化学染色法 | 第37页 |
| 3.1.1.2 免疫荧光化学染色法 | 第37-38页 |
| 3.1.2 CCR7 在肾穿刺组织切片中的表达 | 第38-39页 |
| 3.1.2.1 免疫组织化学染色法 | 第38-39页 |
| 3.1.2.2 免疫荧光化学染色法 | 第39页 |
| 3.1.3 CCL21在肾穿刺组织切片中的表达 | 第39-41页 |
| 3.1.3.1 免疫组织化学染色法 | 第39-40页 |
| 3.1.3.2 免疫荧光化学染色法 | 第40-41页 |
| 3.1.4 FSP-1、CCR7 和CCL21 在移植肾穿切片中共表达情况 | 第41-42页 |
| 3.1.4.1 肾穿组织切片中FSP-1 和CCR7 的免疫荧光双重染色 | 第41页 |
| 3.1.4.2 肾穿组织切片中CCR7 和CCL21 的免疫荧光双重染色 | 第41-42页 |
| 3.1.5 肾脏移植患者肌酐、尿素氮与FSP-1 阳性成纤维细胞数之间关系 | 第42-43页 |
| 3.1.5.1 肾脏移植患者血肌酐和FSP-1 阳性成纤维细胞数的关系 | 第42-43页 |
| 3.1.5.2 肾脏移植患者尿素氮水平和FSP-1 阳性成纤维细胞数的关系 | 第43页 |
| 3.1.6 人体移植肾穿刺组织切片中Y染色体的表达情况 | 第43-44页 |
| 3.2 循环成纤维细胞的分离培养及迁移作用 | 第44-48页 |
| 3.2.1 雄性大鼠外周血成纤维细胞的获取 | 第44页 |
| 3.2.2 雄性大鼠外周血成纤维细胞的培养 | 第44-45页 |
| 3.2.3 免疫荧光染色检测雄性大鼠外周血成纤维细胞的表面标记 | 第45-47页 |
| 3.2.4 慢病毒转染沉默循环成纤维细胞的CCR7 | 第47页 |
| 3.2.5 Western Blot检测沉默效率 | 第47-48页 |
| 3.2.6 Transwell检测迁移能力 | 第48页 |
| 3.3 循环成纤维细胞对肾移植大鼠的影响 | 第48-61页 |
| 3.3.1 构建大鼠肾移植模型 | 第48-49页 |
| 3.3.2 肾脏功能的评价 | 第49-50页 |
| 3.3.2.1 血肌酐检测 | 第49页 |
| 3.3.2.2 尿肌酐检测 | 第49页 |
| 3.3.2.3 尿素氮检测 | 第49-50页 |
| 3.3.2.4 24h尿蛋白检测 | 第50页 |
| 3.3.3 移植肾脏的病理学观察 | 第50-52页 |
| 3.3.3.1 大体观察 | 第50-51页 |
| 3.3.3.2 镜下观察 | 第51-52页 |
| 3.3.4 心、肝、脾和肺的HE染色 | 第52-54页 |
| 3.3.5 FSP-1、CCR7 和CCL21 在模型大鼠移植肾脏中的表达 | 第54-56页 |
| 3.3.5.1 FSP-1 在模型大鼠移植肾脏中的表达 | 第54页 |
| 3.3.5.2 CCR7 在模型大鼠移植肾脏中的表达 | 第54-55页 |
| 3.3.5.3 CCL21 在模型大鼠移植肾脏中的表达 | 第55-56页 |
| 3.3.6 FSP-1、CCR7 和CCL21 在模型大鼠心、肝、脾和肺中的表达 | 第56-61页 |
| 3.3.6.1 FSP-1 在模型大鼠心、肝、脾和肺中的表达 | 第56-57页 |
| 3.3.6.2 CCR7 在模型大鼠心、肝、脾和肺中的表达 | 第57-59页 |
| 3.3.6.3 CCL21 在模型大鼠心、肝、脾和肺中的表达 | 第59-61页 |
| 第4章 讨论 | 第61-67页 |
| 4.1 移植肾成纤维细胞的来源 | 第61-63页 |
| 4.2 循环成纤维细胞在移植肾纤维化中作用的机制探讨 | 第63-67页 |
| 第5章 结论 | 第67-68页 |
| 参考文献 | 第68-76页 |
| 作者简介及在学期间获得的科研成果 | 第76-77页 |
| 致谢 | 第77页 |
