| 摘要 | 第2-4页 |
| abstract | 第4页 |
| 引言 | 第8-10页 |
| 材料与方法 | 第10-24页 |
| 1 实验材料 | 第10-15页 |
| 1.1 细胞株与实验动物 | 第10页 |
| 1.2 主要实验试剂与耗材 | 第10-12页 |
| 1.3 主要实验仪器 | 第12页 |
| 1.4 用于转染的小分子RNA | 第12-13页 |
| 1.5 主要实验试剂的配制仪器 | 第13-14页 |
| 1.6 实验分组 | 第14页 |
| 1.7 常用软件及数据库 | 第14-15页 |
| 2 实验方法 | 第15-24页 |
| 2.1 细胞培养 | 第15-16页 |
| 2.1.1 细胞复苏 | 第15页 |
| 2.1.2 细胞传代 | 第15页 |
| 2.1.3 细胞计数 | 第15页 |
| 2.1.4 细胞冻存 | 第15-16页 |
| 2.2 荷瘤小鼠模型的建立 | 第16页 |
| 2.3 荷瘤小鼠分组及siRNA注射 | 第16页 |
| 2.4 荷H22小鼠生活状况的观察 | 第16-17页 |
| 2.5 酶联免疫吸附实验检测血清中IFN-γ,IL-10和组织中PD-L1蛋白的含量 | 第17-18页 |
| 2.5.1 检测样本的制备 | 第17页 |
| 2.5.2 样本检测步骤 | 第17-18页 |
| 2.6 qPCR实验技术对mRNA相对表达含量的检测 | 第18-20页 |
| 2.6.1 小鼠组织中总RNA的提取 | 第18-19页 |
| 2.6.2 RNA反转录成cDNA | 第19页 |
| 2.6.3 qPCR检测RNA的相对表达量 | 第19-20页 |
| 2.7 WesternBlotting检测Bax和Bcl-2蛋白的相对表达量 | 第20-23页 |
| 2.7.1 总蛋白的提取 | 第20页 |
| 2.7.2 BCA蛋白浓度的测定 | 第20-21页 |
| 2.7.3 WesternBlot检测步骤 | 第21-23页 |
| 2.8 统计分析 | 第23-24页 |
| 结果 | 第24-29页 |
| 1 荷瘤小鼠一般生理情况观察 | 第24页 |
| 2 siRNA给药对小鼠肿瘤体积、质量和生存率的影响 | 第24-25页 |
| 3 ELISA对小鼠血清中IFN-γ,IL-10和组织中PD-L1蛋白检测结果 | 第25-26页 |
| 4 组织中相关基因mRNA表达的测定 | 第26-27页 |
| 5 WesternBlotting检测Bax和Bcl-2结果分析 | 第27-29页 |
| 讨论 | 第29-32页 |
| 结论 | 第32-33页 |
| 参考文献 | 第33-35页 |
| 综述 | 第35-47页 |
| 综述参考文献 | 第42-47页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第47-48页 |
| 缩略词表 | 第48-49页 |
| 致谢 | 第49-50页 |
