| 摘要 | 第2-4页 |
| Abstract | 第4-5页 |
| 引言 | 第8-10页 |
| 第一章 实验材料 | 第10-12页 |
| 1.1 主要材料 | 第10-12页 |
| 1.1.1 主要实验仪器 | 第10-11页 |
| 1.1.2 菌株与细胞株 | 第11页 |
| 1.1.3 主要实验试剂 | 第11-12页 |
| 第二章 主要实验方法 | 第12-26页 |
| 2.1 重组质粒的扩增、提取及鉴定 | 第12-14页 |
| 2.1.1 重组质粒的扩增 | 第12页 |
| 2.1.2 重组质粒的提取 | 第12-13页 |
| 2.1.3 重组质粒的鉴定 | 第13-14页 |
| 2.2 U118细胞的培养 | 第14-17页 |
| 2.2.1 U118细胞的复苏 | 第15页 |
| 2.2.2 U118细胞的培养与传代 | 第15页 |
| 2.2.3 U118细胞的冻存 | 第15页 |
| 2.2.4 U118细胞脂质体转染及转染效率的测定 | 第15-16页 |
| 2.2.4.1 脂质体转染流程 | 第15-16页 |
| 2.2.4.2 转染效率的测定 | 第16页 |
| 2.2.5 G418筛选稳定转染细胞系 | 第16-17页 |
| 2.2.5.1 确定G418最佳筛选浓度 | 第16页 |
| 2.2.5.2 筛选稳定转染细胞系 | 第16-17页 |
| 2.3 免疫组织化学 | 第17-18页 |
| 2.4 RT-PCR反应 | 第18-20页 |
| 2.4.1 总RNA提取 | 第19页 |
| 2.4.2 反转录反应 | 第19-20页 |
| 2.4.3 PCR反应 | 第20页 |
| 2.5 MTT检测细胞增殖 | 第20-21页 |
| 2.6 Western Blot | 第21-24页 |
| 2.6.1 提取细胞总蛋白 | 第21页 |
| 2.6.2 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第21-22页 |
| 2.6.3 电转印 | 第22-23页 |
| 2.6.4 封闭 | 第23页 |
| 2.6.5 孵育抗体 | 第23-24页 |
| 2.6.6ECL化学发光 | 第24页 |
| 2.7 功能检测 | 第24-25页 |
| 2.7.1 U118细胞脂质体转染及稳定转染细胞系的建立 | 第24页 |
| 2.7.2 采用RT-PCR和Western-Biot方法检各组细胞U118的表达 | 第24页 |
| 2.7.3 MTT检测细胞增殖 | 第24页 |
| 2.7.4 流式细胞术检测细胞凋亡 | 第24-25页 |
| 2.8 统计学方法 | 第25-26页 |
| 第三章 实验结果 | 第26-34页 |
| 3.1 重组质粒的鉴定 | 第26页 |
| 3.2 U118细胞的培养 | 第26页 |
| 3.3 U118脂质体转染 | 第26-27页 |
| 3.3.1 FOXG1干扰质粒U118细胞 | 第26-27页 |
| 3.4 稳定转染U118细胞系的筛选 | 第27页 |
| 3.5 MTT检测U118细胞增殖 | 第27-28页 |
| 3.6 Western-Blot检测FOXG1的表达 | 第28-29页 |
| 3.7 流式细胞术检测U118细胞凋亡 | 第29-30页 |
| 3.8 RT-PCR检测FOXG1基因的表达 | 第30-31页 |
| 3.9 免疫组化对FOXG1基因的检测表达 | 第31-34页 |
| 讨论 | 第34-35页 |
| 结论 | 第35-36页 |
| 附录 | 第36-39页 |
| 参考文献 | 第39-41页 |
| 综述 | 第41-48页 |
| 综述参考文献 | 第45-48页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第48-49页 |
| 缩略语表 | 第49-50页 |
| 致谢 | 第50-51页 |
