摘要 | 第4-7页 |
ABSTRACT | 第7-10页 |
缩略词表 | 第13-14页 |
第一章 文献综述 | 第14-31页 |
1 胎儿成纤维细胞与成体干细胞 | 第14-17页 |
2 多能性、增殖、凋亡相关基因在胎儿成纤维细胞和成体干细胞中的研究 | 第17-22页 |
2.1 多能性相关基因在胎儿成纤维细胞和成体干细胞中的研究 | 第17-19页 |
2.2 增殖相关基因在胎儿成纤维细胞和成体干细胞中的研究 | 第19-20页 |
2.3 凋亡相关基因在胎儿成纤维细胞和成体干细胞中的研究 | 第20-22页 |
3 表观遗传修饰在胎儿成纤维细胞和成体干细胞中的研究 | 第22-31页 |
3.1 DNA甲基化修饰在胎儿成纤维细胞和成体干细胞中的研究 | 第22-25页 |
3.2 组蛋白修饰在胎儿成纤维细胞和成体干细胞中的研究 | 第25-31页 |
第二章 阿尔巴斯绒山羊胎儿成纤维细胞和成体干细胞的体外生长特性及表观遗传修饰模式的比较 | 第31-69页 |
引言 | 第31-33页 |
1 实验材料 | 第33-34页 |
1.1 主要仪器设备 | 第33页 |
1.2 实验试剂及耗材 | 第33-34页 |
1.3 实验细胞 | 第34页 |
2 实验方法 | 第34-46页 |
2.1 主要试剂及配制方法 | 第34-35页 |
2.2 细胞解冻与培养 | 第35页 |
2.3 细胞计数 | 第35页 |
2.4 提取基因组 | 第35-36页 |
2.5 全基因组甲基化水平定量检测 | 第36-38页 |
2.6 免疫细胞荧光检测 | 第38页 |
2.7 实时定量PCR检测 | 第38-43页 |
2.7.1 总RNA的提取 | 第39页 |
2.7.2 RNA完整性检测 | 第39-40页 |
2.7.3 RNA反转录 | 第40-41页 |
2.7.4 实时定量PCR | 第41-43页 |
2.8 蛋白质免疫印迹检测 | 第43-46页 |
2.8.1 质蛋白的提取 | 第44页 |
2.8.2 核蛋白的提取 | 第44页 |
2.8.3 BCA法测定蛋白浓度 | 第44-45页 |
2.8.4 Westernblot分析 | 第45-46页 |
2.9 数据分析 | 第46页 |
3 实验结果 | 第46-64页 |
3.1 gFFCs、gADSCs、gBMSCs和gMDSCs四种细胞的形态学观察 | 第46-48页 |
3.2 多能性、增殖和凋亡相关基因的免疫细胞荧光检测 | 第48-50页 |
3.3 多能性、增殖和凋亡相关基因的实时定量PCR检测 | 第50-53页 |
3.4 多能性、增殖和凋亡相关基因的Westernblot检测 | 第53页 |
3.5 全基因组甲基化定量、H3K9乙酰化水平以及其它乙酰化位点的检测 | 第53-58页 |
3.6 DNA甲基化酶和羟甲基化酶转录和表达差异的检测 | 第58-60页 |
3.7 组蛋白去乙酰化酶和乙酰化酶转录和表达差异的检测 | 第60-64页 |
4 讨论 | 第64-69页 |
结论 | 第69-70页 |
参考文献 | 第70-84页 |
致谢 | 第84-85页 |
攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第85页 |