摘要 | 第5-7页 |
ABSTRACT | 第7-9页 |
第一章 文献综述 | 第13-26页 |
1.1 昆虫几丁质研究进展 | 第13-14页 |
1.1.1 几丁质及其作用 | 第13-14页 |
1.1.2 几丁质生物合成与降解 | 第14页 |
1.2 昆虫海藻糖酶研究概况 | 第14-18页 |
1.2.1 昆虫海藻糖及其功能 | 第14-16页 |
1.2.2 昆虫海藻糖生物代谢途径 | 第16页 |
1.2.3 昆虫海藻糖酶研究概况 | 第16-18页 |
1.2.4 海藻糖酶抑制剂 | 第18页 |
1.3 昆虫几丁质合成酶研究 | 第18-20页 |
1.4 昆虫几丁酶研究 | 第20-22页 |
1.5 苯甲酰基脲类昆虫生长调节剂 | 第22-24页 |
1.5.1 苯甲酰基脲类昆虫生长调节剂的特点 | 第22-23页 |
1.5.2 苯甲酰基脲类昆虫生长调节剂的作用机理研究 | 第23-24页 |
1.6 本研究的目的意义和技术路线 | 第24-26页 |
第二章 棉铃虫海藻糖酶基因克隆与表达分析 | 第26-51页 |
2.1 实验材料和仪器 | 第26-27页 |
2.1.1 供试昆虫 | 第26页 |
2.1.2 试剂 | 第26页 |
2.1.3 仪器设备 | 第26-27页 |
2.1.4 一些试剂的配制 | 第27页 |
2.2 实验方法与步骤 | 第27-38页 |
2.2.1 总 RNA 的提取 | 第27-28页 |
2.2.2 cDNA 第一链的合成 | 第28-29页 |
(1)总 RNA 中基因组 DNA 的去除 | 第28页 |
(2)cDNA 第一链的合成 | 第28-29页 |
2.2.3 5' RACE 和 3' RACE cDNA 模板的制备 | 第29-30页 |
2.2.4 实时定量 PCR cDNA 模板的制备 | 第30-31页 |
2.2.5 棉铃虫海藻糖酶基因的克隆 | 第31-35页 |
2.2.5.1 海藻糖酶基因保守区 cDNA 片段的克隆 | 第31-33页 |
2.2.5.2 海藻糖酶基因的 3' RACE 和 5' RACE | 第33-35页 |
2.2.6 生物信息学分析 | 第35页 |
2.2.7 棉铃虫两种海藻糖酶基因在不同发育时期和不同组织下 mRNA 表达量的测定 | 第35-38页 |
2.3 实验结果与分析 | 第38-49页 |
2.3.1 棉铃虫海藻糖酶基因 cDNA 的克隆 | 第38-39页 |
2.3.2 棉铃虫海藻糖酶基因的序列分析 | 第39-42页 |
2.3.3 棉铃虫海藻糖酶基因的生物信息学分析 | 第42-44页 |
2.3.4 棉铃虫海藻糖酶基因的分子系统发育分析 | 第44-46页 |
2.3.5 棉铃虫海藻糖酶基因表达分析 | 第46-49页 |
2.4 结论与讨论 | 第49-51页 |
第三章 棉铃虫几丁质合成酶 1 基因克隆与表达分析 | 第51-64页 |
3.1 实验材料与仪器 | 第51页 |
3.1.1 供试昆虫 | 第51页 |
3.1.2 实验试剂和仪器 | 第51页 |
3.2 实验方法与步骤 | 第51-52页 |
3.2.1 cDNA 第一链的合成及实时定量 PCR cDNA 模板的制备 | 第51页 |
3.2.2 棉铃虫海几丁质合成酶 1 基因的克隆 | 第51-52页 |
3.2.3 棉铃虫几丁质合成酶 1 基因不同发育龄期和不同组织 mRNA 表达量的测定 | 第52页 |
3.3 实验结果与分析 | 第52-62页 |
3.3.1 棉铃虫几丁质合成酶 1 基因 cDNA 的克隆与序列分析 | 第52-53页 |
3.3.2 棉铃虫几丁质合成酶 1 基因的生物信息学分析 | 第53-58页 |
3.3.3 棉铃虫几丁质合成酶基因的分子系统发育分析 | 第58-60页 |
3.3.4 几丁质合成酶 1 基因在棉铃虫不同发育时期和不同组织的表达 | 第60-62页 |
3.4 结论与讨论 | 第62-64页 |
第四章 昆虫生长调节剂对棉铃虫生物活性测定及对几丁质和丁质酶的影响 | 第64-82页 |
4.1 实验材料与仪器 | 第64页 |
4.1.1 供试昆虫 | 第64页 |
4.1.2 实验试剂和仪器 | 第64页 |
4.2 实验方法与步骤 | 第64-69页 |
4.2.1 昆虫生长调节剂对棉铃虫生物活性测定 | 第64-65页 |
4.2.2 可溶性蛋白含量的测定 | 第65页 |
4.2.3 几丁质含量的测定 | 第65-66页 |
4.2.4 几丁质酶活力的测定 | 第66-68页 |
4.2.5 昆虫生长调节剂亚致死浓度处理后棉铃虫几丁质合成酶以及几丁质酶基因 mRNA 的表达量的检测 | 第68-69页 |
4.3 结果与分析 | 第69-80页 |
4.3.1 昆虫生长调节剂对棉铃虫生物活性测定 | 第69-73页 |
4.3.2 昆虫生长调节剂对棉铃虫几丁质含量的影响 | 第73-75页 |
4.3.3 昆虫生长调节剂对棉铃虫几丁质酶活性的影响 | 第75-79页 |
4.3.4 昆虫生长调节剂对棉铃虫几丁质合成酶和几丁质酶基因表达的影响 | 第79-80页 |
4.4 结论与讨论 | 第80-82页 |
第五章 昆虫生长调节剂对棉铃虫海藻糖含量、海藻糖酶以及基因表达的影响 | 第82-94页 |
5.1 实验材料与仪器 | 第82页 |
5.1.1 供试昆虫 | 第82页 |
5.1.2 实验试剂和仪器 | 第82页 |
5.2 实验方法与步骤 | 第82-84页 |
5.2.1 海藻糖酶活力的测定 | 第82-83页 |
5.2.2 海藻糖含量的测定 | 第83页 |
5.2.3 葡萄糖含量的测定 | 第83-84页 |
5.2.4 昆虫生长调节剂亚致死浓度处理后棉铃虫海藻糖酶基因 mRNA 的表达量的检测 | 第84页 |
5.3 实验结果与分析 | 第84-92页 |
5.3.1 昆虫生长调节剂对棉铃虫海藻糖含量的影响 | 第84-86页 |
5.3.2 昆虫生长调节剂对棉铃虫体内葡萄糖含量的影响 | 第86-89页 |
5.3.3 氟啶脲对棉铃虫海藻糖酶活性的影响 | 第89-90页 |
5.3.4 昆虫生长调节剂对棉铃虫海藻糖酶基因表达的影响 | 第90-92页 |
5.4 结论与讨论 | 第92-94页 |
参考文献 | 第94-106页 |
致谢 | 第106-107页 |
个人简介 | 第107页 |