摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
縮略词表及注释 | 第10-11页 |
实验技术路线 | 第11-12页 |
第一部分 miR-1246对胃癌细胞BGC823侵袭迁移的影响 | 第12-42页 |
前言 | 第12-14页 |
1 材料与方法 | 第14-30页 |
1.1 实验材料 | 第14-16页 |
1.1.1 细胞株 | 第14页 |
1.1.2 主要实验试剂 | 第14-15页 |
1.1.3 主要实验试剂盒 | 第15页 |
1.1.4 主要实验抗体 | 第15页 |
1.1.5 主要实验仪器 | 第15-16页 |
1.2 实验方法 | 第16-29页 |
1.2.1 试剂配制 | 第16-19页 |
1.2.2 细胞培养技术 | 第19-20页 |
1.2.3 细胞转染 | 第20-21页 |
1.2.4 Transwell小室迁移实验 | 第21页 |
1.2.5 Transwell小室侵袭实验 | 第21-22页 |
1.2.6 Western blotting(蛋白免疫印迹技术) | 第22-26页 |
1.2.7 Real-time PCR | 第26-29页 |
1.3 统计学处理 | 第29-30页 |
2 结果 | 第30-39页 |
2.1 RNA质控结果 | 第30页 |
2.2 BGC823细胞中EGFL7基因稳定干扰效果的检测 | 第30-31页 |
2.3 BGC823、BGC823-NC、BGC823-E三株细胞中miR-1246的差异表达 | 第31-32页 |
2.4 转染miR-1246 mimics后BGC823的侵袭迁移能力变化 | 第32-35页 |
2.5 转染miR-1246 inhibitor后BGC823-E的侵袭迁移能力变化 | 第35-39页 |
3 讨论 | 第39-41页 |
4 小结 | 第41-42页 |
第二部分 miR-1246靶基因的预测及验证 | 第42-59页 |
前言 | 第42-44页 |
1 材料与方法 | 第44-50页 |
1.1 实验材料 | 第44-46页 |
1.1.1 细胞株 | 第44页 |
1.1.2 主要实验试剂 | 第44页 |
1.1.3 主要实验试剂盒 | 第44页 |
1.1.4 质粒 | 第44-45页 |
1.1.5 主要实验仪器 | 第45页 |
1.1.6 主要实验抗体 | 第45-46页 |
1.1.7 miRNA信息查询及其靶基因预测网站 | 第46页 |
1.2 实验方法 | 第46-49页 |
1.2.1 实验试剂配制 | 第46页 |
1.2.2 细胞培养、细胞转染、Western blotting技术 | 第46-47页 |
1.2.3 Real-time PCR | 第47-48页 |
1.2.4 双荧光素酶实验 | 第48-49页 |
1.3 统计学处理 | 第49-50页 |
2 结果 | 第50-56页 |
2.1 miR-1246基本信息及靶基因预测 | 第50-51页 |
2.2 重组载体测序图谱结果 | 第51-52页 |
2.3 各转染组的荧光素酶活性检测 | 第52页 |
2.4 转染mimics后BGC823细胞中的N-cadherin蛋白及mRNA表达变化 | 第52-53页 |
2.5 转染miR-1246 inhibitor后BGC823-E细胞中的N-cadherin蛋白及mRNA表达变化 | 第53-54页 |
2.6 BGC823、BGC823-NC、BGC823-E三株细胞中N-cadherin表达情况 | 第54-56页 |
3 讨论 | 第56-58页 |
4 小结 | 第58-59页 |
结论 | 第59-60页 |
参考文献 | 第60-65页 |
综述 | 第65-76页 |
参考文献 | 第71-76页 |
致谢 | 第76页 |