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突变型FGFR2c胞外段的原核表达与体外复性工艺改进的研究

摘要第3-4页
Abstract第4-5页
第一章 前言第8-20页
    1. FGFS 及 FGFRS 的概述第8-13页
        1.1 FGF/FGFR 信号通路第9-10页
        1.2 FGFR2 的 S252W 突变第10-11页
        1.3 FGFs/FGFRs 与肿瘤的关系第11-12页
        1.4 可溶性 FGFR2 胞外段可成为治疗肿瘤的药物第12-13页
    2. 包涵体的概述第13-18页
        2.1 包涵体的性质第13-14页
        2.2 包涵体的应用第14页
        2.3 包涵体的获得第14-15页
        2.4 包涵体的复性第15-18页
    3.研究目的与主要内容第18-20页
        3.1 研究意义第18页
        3.2 研究路线与内容第18-20页
第二章 实验器材与试剂第20-31页
    1. 主要实验仪器第20-21页
    2. 材料第21-31页
        2.1 菌株第21页
        2.2 细胞株第21页
        2.3 试剂第21-23页
        2.4 试剂配方第23-31页
第三章 MSFGFR2C 在原核细胞 BL21(DE3)的表达及质粒稳定性的检测第31-38页
    1. 实验方法第31-34页
        1.1 msFGFR2c 在原核细胞 BL21(DE3)的表达第31-33页
        1.2 重组质粒不稳定性研究第33-34页
    2. 实验结果第34-37页
        2.1 msFGFR2c 在原核细胞 BL21(DE3)的表达第34-35页
        2.2 重组质粒不稳定性研究第35-37页
    3. 讨论第37-38页
第四章 BL21(DE3)-MSFGFR2C 表达条件的优化第38-42页
    1. 实验方法第38-39页
        1.1 不同 IPTG 浓度的诱导对菌株表达量的比较第38页
        1.2 不同温度下诱导不同时间对菌株表达量的比较第38-39页
    2. 实验结果第39-41页
        2.1 不同 IPTG 浓度的诱导影响菌株的表达量第39-40页
        2.2 不同温度下诱导不同时间对菌株表达量的比较第40-41页
    3. 讨论第41-42页
第五章 BL21(DE3)-MSFGFR2C 菌体发酵和菌体破碎、包涵体清洗条件的优化第42-46页
    1. 实验方法第42-43页
        1.1 BL21(DE3)-msFGFR2c 菌体发酵第42页
        1.2 菌体破碎条件的优化第42-43页
        1.3 包涵体的清洗第43页
    2. 实验结果第43-45页
        2.1 菌体破碎条件的优化第43-44页
        2.2 包涵体清洗条件第44-45页
    3. 讨论第45-46页
第六章 MSFGFR2C 凝胶柱层析复性与透析复性的比较第46-53页
    1. 实验方法第46-48页
        1.1 包涵体的变性第46页
        1.2 柱上复性与透析复性第46页
        1.3 复性后蛋白的肝素凝胶亲和纯化第46-47页
        1.4 cck-8 法检测层析柱复性蛋白与透析复性蛋白对肺癌细胞 H1648 的增殖影响第47-48页
        1.5 使用软件和统计学分析方法第48页
    2. 实验结果第48-52页
        2.1 层析柱复性与透析复性的比较第48-50页
        2.2 层析柱复性蛋白与透析复性蛋白对肺癌细胞 H1648 的增殖抑制作用的比较第50-52页
    3. 讨论第52-53页
第七章 纯化后 MSFGFR2C 胞外段的鉴定及对非小细胞肺癌细胞的活性检测第53-57页
    1. 实验方法第53-54页
        1.1 western blotting 鉴定纯化后蛋白是 FGFR2c 胞外段第53-54页
        1.2 串联飞行时间质谱(MALDI TOF/TOF)鉴定复性后蛋白分子量第54页
        1.3 cck-8 法检测纯化后 msFGFR2c 胞外段对非小细胞肺癌细胞 PC-9 及其耐药株 PC-9(G2)、PC-9(G10)的增殖影响第54页
    2. 实验结果第54-56页
        2.1 western blotting 鉴定纯化后的蛋白第54页
        2.2 串联飞行时间质谱测定纯化后蛋白的分子量第54-55页
        2.3 cck-8 法检测胞外段对非小细胞肺癌细胞 PC-9 及其耐药株 PC-9(G2)、PC-9(G10)增殖的抑制作用第55-56页
    3. 讨论第56-57页
第八章 结论与展望第57-59页
    1. 结论第57页
    2. 展望第57-59页
参考文献第59-63页
附录第63-68页
致谢第68页

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