摘要 | 第3-4页 |
Abstract | 第4-5页 |
第一章 前言 | 第8-20页 |
1. FGFS 及 FGFRS 的概述 | 第8-13页 |
1.1 FGF/FGFR 信号通路 | 第9-10页 |
1.2 FGFR2 的 S252W 突变 | 第10-11页 |
1.3 FGFs/FGFRs 与肿瘤的关系 | 第11-12页 |
1.4 可溶性 FGFR2 胞外段可成为治疗肿瘤的药物 | 第12-13页 |
2. 包涵体的概述 | 第13-18页 |
2.1 包涵体的性质 | 第13-14页 |
2.2 包涵体的应用 | 第14页 |
2.3 包涵体的获得 | 第14-15页 |
2.4 包涵体的复性 | 第15-18页 |
3.研究目的与主要内容 | 第18-20页 |
3.1 研究意义 | 第18页 |
3.2 研究路线与内容 | 第18-20页 |
第二章 实验器材与试剂 | 第20-31页 |
1. 主要实验仪器 | 第20-21页 |
2. 材料 | 第21-31页 |
2.1 菌株 | 第21页 |
2.2 细胞株 | 第21页 |
2.3 试剂 | 第21-23页 |
2.4 试剂配方 | 第23-31页 |
第三章 MSFGFR2C 在原核细胞 BL21(DE3)的表达及质粒稳定性的检测 | 第31-38页 |
1. 实验方法 | 第31-34页 |
1.1 msFGFR2c 在原核细胞 BL21(DE3)的表达 | 第31-33页 |
1.2 重组质粒不稳定性研究 | 第33-34页 |
2. 实验结果 | 第34-37页 |
2.1 msFGFR2c 在原核细胞 BL21(DE3)的表达 | 第34-35页 |
2.2 重组质粒不稳定性研究 | 第35-37页 |
3. 讨论 | 第37-38页 |
第四章 BL21(DE3)-MSFGFR2C 表达条件的优化 | 第38-42页 |
1. 实验方法 | 第38-39页 |
1.1 不同 IPTG 浓度的诱导对菌株表达量的比较 | 第38页 |
1.2 不同温度下诱导不同时间对菌株表达量的比较 | 第38-39页 |
2. 实验结果 | 第39-41页 |
2.1 不同 IPTG 浓度的诱导影响菌株的表达量 | 第39-40页 |
2.2 不同温度下诱导不同时间对菌株表达量的比较 | 第40-41页 |
3. 讨论 | 第41-42页 |
第五章 BL21(DE3)-MSFGFR2C 菌体发酵和菌体破碎、包涵体清洗条件的优化 | 第42-46页 |
1. 实验方法 | 第42-43页 |
1.1 BL21(DE3)-msFGFR2c 菌体发酵 | 第42页 |
1.2 菌体破碎条件的优化 | 第42-43页 |
1.3 包涵体的清洗 | 第43页 |
2. 实验结果 | 第43-45页 |
2.1 菌体破碎条件的优化 | 第43-44页 |
2.2 包涵体清洗条件 | 第44-45页 |
3. 讨论 | 第45-46页 |
第六章 MSFGFR2C 凝胶柱层析复性与透析复性的比较 | 第46-53页 |
1. 实验方法 | 第46-48页 |
1.1 包涵体的变性 | 第46页 |
1.2 柱上复性与透析复性 | 第46页 |
1.3 复性后蛋白的肝素凝胶亲和纯化 | 第46-47页 |
1.4 cck-8 法检测层析柱复性蛋白与透析复性蛋白对肺癌细胞 H1648 的增殖影响 | 第47-48页 |
1.5 使用软件和统计学分析方法 | 第48页 |
2. 实验结果 | 第48-52页 |
2.1 层析柱复性与透析复性的比较 | 第48-50页 |
2.2 层析柱复性蛋白与透析复性蛋白对肺癌细胞 H1648 的增殖抑制作用的比较 | 第50-52页 |
3. 讨论 | 第52-53页 |
第七章 纯化后 MSFGFR2C 胞外段的鉴定及对非小细胞肺癌细胞的活性检测 | 第53-57页 |
1. 实验方法 | 第53-54页 |
1.1 western blotting 鉴定纯化后蛋白是 FGFR2c 胞外段 | 第53-54页 |
1.2 串联飞行时间质谱(MALDI TOF/TOF)鉴定复性后蛋白分子量 | 第54页 |
1.3 cck-8 法检测纯化后 msFGFR2c 胞外段对非小细胞肺癌细胞 PC-9 及其耐药株 PC-9(G2)、PC-9(G10)的增殖影响 | 第54页 |
2. 实验结果 | 第54-56页 |
2.1 western blotting 鉴定纯化后的蛋白 | 第54页 |
2.2 串联飞行时间质谱测定纯化后蛋白的分子量 | 第54-55页 |
2.3 cck-8 法检测胞外段对非小细胞肺癌细胞 PC-9 及其耐药株 PC-9(G2)、PC-9(G10)增殖的抑制作用 | 第55-56页 |
3. 讨论 | 第56-57页 |
第八章 结论与展望 | 第57-59页 |
1. 结论 | 第57页 |
2. 展望 | 第57-59页 |
参考文献 | 第59-63页 |
附录 | 第63-68页 |
致谢 | 第68页 |