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RNA结合蛋白HuR对乳腺癌细胞中PDGFC的转录后调控机制研究

缩略语表第6-8页
中文摘要第8-11页
英文摘要第11-13页
前言第14-16页
文献回顾第16-24页
    乳腺癌概况第16-17页
        一、乳腺癌的发病特点第16页
        二、乳腺癌的诊断和治疗第16-17页
    PDGF 相关研究第17-19页
        一、PDGF 及其受体第17-18页
        二、PDGF 基本结构第18-19页
        三、PDGF 生物学作用第19页
    PDGFC 相关研究第19-21页
        一、PDGFC 及其受体第19-20页
        二、PDGFC 变体第20页
        三、PDGFC 生物学作用第20-21页
    HuR 相关研究第21-23页
        一、Hu R 基本情况第21-22页
        二、Hu R 作用机制第22页
        三、Hu R 与肿瘤关系第22-23页
    小结第23-24页
实验一 PDGFC在乳腺癌组织和细胞系中的表达第24-37页
    1 材料、试剂和仪器第24-26页
        1.1 实验材料第24-25页
        1.2 主要试剂和仪器第25-26页
    2 方法第26-31页
        2.1 PDGFC免疫组织化学检测第26-27页
        2.2 乳腺癌细胞培养第27页
        2.3 蛋白印迹法(Western blot)第27-29页
        2.4 si RNA(PDGFC)转染第29页
        2.5 MTT实验第29-30页
        2.6 侵袭实验第30页
        2.7 统计学方法第30-31页
    3 结果第31-35页
        3.1 PDGFC在乳腺癌组织中的表达第31-34页
        3.2 PDGFC在乳腺癌细胞系中的表达第34-35页
        3.3 PDGFC表达下调对乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖和侵袭的影响第35页
    4 讨论第35-37页
实验二 乳腺癌细胞中PDGFC和Hu R表达的相关性第37-43页
    1 材料、试剂和仪器第37-38页
        1.1 实验材料第37页
        1.2 主要试剂和仪器第37-38页
    2 方法第38-40页
        2.1 PDGFC启动子活性分析第38-39页
        2.2 PDGFC 3’UTR活性分析第39页
        2.3 预测PDGFC 3’UTR的Hu R结合位点第39页
        2.4 Hu R免疫组织化学检测第39-40页
        2.5 统计学方法第40页
    3 结果第40-42页
        3.1 不同乳腺癌细胞系PDGFC启动子和PDGFC 3’UTR报告基因活性检测第40-41页
        3.2 预测PDGFC 3’UTR的Hu R结合位点第41页
        3.3 Hu R在乳腺癌组织中的表达第41-42页
    4 讨论第42-43页
实验三 乳腺癌细胞中Hu R调控PDGFC的分子机制第43-51页
    1 材料、试剂和仪器第43-44页
        1.1 实验材料第43页
        1.2 主要试剂和仪器第43-44页
    2 方法第44-47页
        2.1 Western blot检测不同乳腺癌细胞系中Hu R和PDGFC的表达第44页
        2.2 si RNA(Hu R)转染第44-45页
        2.3 RNA提取及定量第45页
        2.4 反转录第45页
        2.5 实时定量PCR第45-46页
        2.6 RNA免疫共沉淀(RNA-IP)第46页
        2.7 截短PDGFC 3’UTR和si-Hu R2干预后,报告基因活性检测第46-47页
    3 结果第47-49页
        3.1 PDGFC和Hu R在不同乳腺癌细胞系中的表达第47页
        3.2 si RNA对乳腺癌细胞Hu R表达的影响第47-48页
        3.3 实时定量PCR分析si-Hu R2干扰PDGFC的表达第48页
        3.4 RNA-IP证实Hu R与PDGFC m RNA的直接相互作用第48-49页
        3.5 PDGFC m RNA 3’UTR报告基因系统检测第49页
    4 讨论第49-51页
实验四 乳腺癌中应激诱导Hu R调控PDGFC第51-56页
    1 材料、试剂和仪器第51-52页
        1.1 实验材料第51页
        1.2 主要试剂和仪器第51-52页
    2 方法第52-53页
        2.1 Western blot检测经H2O2活化后MCF-7 细胞中Hu R和PDGFC的表达第52页
        2.2 Western blot检测经紫外线照射后MCF-7 细胞中Hu R的表达第52页
        2.3 ELISA检测经紫外线照射后MCF-7 细胞中PDGFC的表达第52页
        2.4 MCF-7 细胞活性检测(MTT实验)第52-53页
    3 结果第53-54页
        3.1 H2O2诱导Hu R上调PDGFC第53页
        3.2 紫外线诱导Hu R上调PDGFC第53-54页
        3.3 不同处理条件对MCF-7 细胞活性的影响第54页
    4 讨论第54-56页
小结第56-57页
参考文献第57-74页
个人简历和研究成果第74-75页
致谢第75页

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