缩略语表 | 第6-8页 |
中文摘要 | 第8-11页 |
英文摘要 | 第11-13页 |
前言 | 第14-16页 |
文献回顾 | 第16-24页 |
乳腺癌概况 | 第16-17页 |
一、乳腺癌的发病特点 | 第16页 |
二、乳腺癌的诊断和治疗 | 第16-17页 |
PDGF 相关研究 | 第17-19页 |
一、PDGF 及其受体 | 第17-18页 |
二、PDGF 基本结构 | 第18-19页 |
三、PDGF 生物学作用 | 第19页 |
PDGFC 相关研究 | 第19-21页 |
一、PDGFC 及其受体 | 第19-20页 |
二、PDGFC 变体 | 第20页 |
三、PDGFC 生物学作用 | 第20-21页 |
HuR 相关研究 | 第21-23页 |
一、Hu R 基本情况 | 第21-22页 |
二、Hu R 作用机制 | 第22页 |
三、Hu R 与肿瘤关系 | 第22-23页 |
小结 | 第23-24页 |
实验一 PDGFC在乳腺癌组织和细胞系中的表达 | 第24-37页 |
1 材料、试剂和仪器 | 第24-26页 |
1.1 实验材料 | 第24-25页 |
1.2 主要试剂和仪器 | 第25-26页 |
2 方法 | 第26-31页 |
2.1 PDGFC免疫组织化学检测 | 第26-27页 |
2.2 乳腺癌细胞培养 | 第27页 |
2.3 蛋白印迹法(Western blot) | 第27-29页 |
2.4 si RNA(PDGFC)转染 | 第29页 |
2.5 MTT实验 | 第29-30页 |
2.6 侵袭实验 | 第30页 |
2.7 统计学方法 | 第30-31页 |
3 结果 | 第31-35页 |
3.1 PDGFC在乳腺癌组织中的表达 | 第31-34页 |
3.2 PDGFC在乳腺癌细胞系中的表达 | 第34-35页 |
3.3 PDGFC表达下调对乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖和侵袭的影响 | 第35页 |
4 讨论 | 第35-37页 |
实验二 乳腺癌细胞中PDGFC和Hu R表达的相关性 | 第37-43页 |
1 材料、试剂和仪器 | 第37-38页 |
1.1 实验材料 | 第37页 |
1.2 主要试剂和仪器 | 第37-38页 |
2 方法 | 第38-40页 |
2.1 PDGFC启动子活性分析 | 第38-39页 |
2.2 PDGFC 3’UTR活性分析 | 第39页 |
2.3 预测PDGFC 3’UTR的Hu R结合位点 | 第39页 |
2.4 Hu R免疫组织化学检测 | 第39-40页 |
2.5 统计学方法 | 第40页 |
3 结果 | 第40-42页 |
3.1 不同乳腺癌细胞系PDGFC启动子和PDGFC 3’UTR报告基因活性检测 | 第40-41页 |
3.2 预测PDGFC 3’UTR的Hu R结合位点 | 第41页 |
3.3 Hu R在乳腺癌组织中的表达 | 第41-42页 |
4 讨论 | 第42-43页 |
实验三 乳腺癌细胞中Hu R调控PDGFC的分子机制 | 第43-51页 |
1 材料、试剂和仪器 | 第43-44页 |
1.1 实验材料 | 第43页 |
1.2 主要试剂和仪器 | 第43-44页 |
2 方法 | 第44-47页 |
2.1 Western blot检测不同乳腺癌细胞系中Hu R和PDGFC的表达 | 第44页 |
2.2 si RNA(Hu R)转染 | 第44-45页 |
2.3 RNA提取及定量 | 第45页 |
2.4 反转录 | 第45页 |
2.5 实时定量PCR | 第45-46页 |
2.6 RNA免疫共沉淀(RNA-IP) | 第46页 |
2.7 截短PDGFC 3’UTR和si-Hu R2干预后,报告基因活性检测 | 第46-47页 |
3 结果 | 第47-49页 |
3.1 PDGFC和Hu R在不同乳腺癌细胞系中的表达 | 第47页 |
3.2 si RNA对乳腺癌细胞Hu R表达的影响 | 第47-48页 |
3.3 实时定量PCR分析si-Hu R2干扰PDGFC的表达 | 第48页 |
3.4 RNA-IP证实Hu R与PDGFC m RNA的直接相互作用 | 第48-49页 |
3.5 PDGFC m RNA 3’UTR报告基因系统检测 | 第49页 |
4 讨论 | 第49-51页 |
实验四 乳腺癌中应激诱导Hu R调控PDGFC | 第51-56页 |
1 材料、试剂和仪器 | 第51-52页 |
1.1 实验材料 | 第51页 |
1.2 主要试剂和仪器 | 第51-52页 |
2 方法 | 第52-53页 |
2.1 Western blot检测经H2O2活化后MCF-7 细胞中Hu R和PDGFC的表达 | 第52页 |
2.2 Western blot检测经紫外线照射后MCF-7 细胞中Hu R的表达 | 第52页 |
2.3 ELISA检测经紫外线照射后MCF-7 细胞中PDGFC的表达 | 第52页 |
2.4 MCF-7 细胞活性检测(MTT实验) | 第52-53页 |
3 结果 | 第53-54页 |
3.1 H2O2诱导Hu R上调PDGFC | 第53页 |
3.2 紫外线诱导Hu R上调PDGFC | 第53-54页 |
3.3 不同处理条件对MCF-7 细胞活性的影响 | 第54页 |
4 讨论 | 第54-56页 |
小结 | 第56-57页 |
参考文献 | 第57-74页 |
个人简历和研究成果 | 第74-75页 |
致谢 | 第75页 |