摘要 | 第5-6页 |
Abstract | 第6页 |
英文縮略表 | 第9-10页 |
第一章 文献综述 | 第10-16页 |
1.1 猪带绦虫/囊尾蚴概述 | 第10-11页 |
1.2 蛋白酶抑制剂 | 第11-12页 |
1.3 半胱氨酸蛋白酶抑制剂 | 第12-14页 |
1.3.1 Stefin | 第13页 |
1.3.2 Cystatin | 第13-14页 |
1.3.3 Kininogen | 第14页 |
1.4 展望 | 第14-16页 |
第二章 猪带绦虫半胱氨酸蛋白酶抑制剂基因家族的克隆与序列分析 | 第16-24页 |
2.1 材料与方法 | 第16-17页 |
2.1.1 猪囊尾蚴、菌株及试剂 | 第16页 |
2.1.2 引物设计与合成 | 第16页 |
2.1.3 猪囊尾蚴总RNA提取与反转录 | 第16-17页 |
2.1.4 PCR扩增猪带绦虫半胱氨酸蛋白酶抑制剂基因家族 | 第17页 |
2.1.5 序列分析和二级结构预测 | 第17页 |
2.1.6 同源性比较分析 | 第17页 |
2.1.7 三级结构预测 | 第17页 |
2.2 结果 | 第17-22页 |
2.2.1 猪囊尾蚴半胱氨酸蛋白酶抑制剂家族基因的克隆 | 第17-18页 |
2.2.2 猪带绦虫半胱氨酸蛋白酶抑制剂家族的序列分析及二级结构预测 | 第18-20页 |
2.2.3 系统进化分析 | 第20-21页 |
2.2.4 3D结构的预测 | 第21-22页 |
2.3 讨论 | 第22-24页 |
第三章 猪带绦虫半胱氨酸蛋白酶抑制剂基因家族的表达及鉴定 | 第24-40页 |
3.1 材料与方法 | 第24-28页 |
3.1.1 实验动物、载体与菌株 | 第24页 |
3.1.2 主要试剂 | 第24页 |
3.1.3 主要仪器 | 第24页 |
3.1.4 猪带绦虫半胱氨酸蛋白酶抑制剂基因家族在不同时期的表达水平 | 第24-25页 |
3.1.5 重组质粒的构建 | 第25页 |
3.1.6 重组蛋白的表达及条件优化 | 第25-26页 |
3.1.7 重组蛋白的纯化 | 第26页 |
3.1.8 重组蛋白的Western-blotting分析 | 第26页 |
3.1.9 免疫组化 | 第26-27页 |
3.1.10 活性测定 | 第27-28页 |
3.2 结果 | 第28-38页 |
3.2.1 实时荧光定量PCR | 第28-30页 |
3.2.2 重组表达质粒的鉴定 | 第30-32页 |
3.2.3 重组蛋白的表达 | 第32-34页 |
3.2.4 重组蛋白的纯化 | 第34-35页 |
3.2.5 重组蛋白反应原性鉴定 | 第35-36页 |
3.2.6 组织定位 | 第36-37页 |
3.2.7 重组蛋白抑制活性的分析 | 第37-38页 |
3.3 讨论 | 第38-40页 |
第四章 全文结论 | 第40-41页 |
参考文献 | 第41-46页 |
致谢 | 第46-47页 |
作者简历 | 第47页 |