摘要 | 第5-6页 |
Abstract | 第6页 |
第一章 绪论 | 第9-19页 |
1.1 研究背景 | 第9-10页 |
1.2 选题思想 | 第10-11页 |
1.3 包涵体蛋白及复性技术 | 第11-14页 |
1.3.1 包涵体的形成及溶解 | 第11-12页 |
1.3.2 包涵体的复性 | 第12-14页 |
1.4 核磁共振技术 | 第14-16页 |
1.4.1 核磁共振在蛋白质溶液结构中的应用 | 第14页 |
1.4.2 同位素标记的三共振实验概述 | 第14-16页 |
1.5 蛋白质分子动力学的NMR研究 | 第16-19页 |
1.5.1 蛋白质动力学概述 | 第16-17页 |
1.5.2 R_2弛豫分散实验 | 第17-19页 |
第二章 蛋白复性条件的优化 | 第19-37页 |
2.1 引言 | 第19页 |
2.2 实验材料 | 第19-26页 |
2.2.1 质粒和菌株 | 第19页 |
2.2.2 试剂和仪器 | 第19-21页 |
2.2.3 实验流程图 | 第21页 |
2.2.4 溶液的配制 | 第21-26页 |
2.3 实验部分 | 第26-30页 |
2.3.1 mIL-21重组蛋白的表达和包涵体的溶解 | 第26-27页 |
2.3.2 蛋白纯化和复性条件的优化 | 第27-30页 |
2.4 结果与讨论 | 第30-36页 |
2.4.1 mIL-21重组蛋白的表达及SDS-PAGE胶的分析 | 第30-32页 |
2.4.2 纯化及复性结果分析 | 第32-35页 |
2.4.3 一维氢谱分析 | 第35-36页 |
2.5 本章小结 | 第36-37页 |
第三章 hIL-21/hIL-4嵌合蛋白蛋白质主链信号的归属 | 第37-49页 |
3.1 引言 | 第37页 |
3.2 实验材料 | 第37-40页 |
3.2.1 质粒和菌株 | 第37-38页 |
3.2.2 试剂和仪器 | 第38页 |
3.2.3 溶液的配制 | 第38-40页 |
3.3 实验部分 | 第40-42页 |
3.3.1 hIL-21/hIL-4重组蛋白的表达 | 第40-41页 |
3.3.2 hIL-21/hIL-4嵌合蛋白的纯化及透析复性 | 第41-42页 |
3.3.3 核磁共振所用标记蛋白的表达和纯化复性 | 第42页 |
3.4 结果与讨论 | 第42-48页 |
3.4.1 hIL-21/hIL-4嵌合蛋白的表达及SDS-PAGE胶的分析 | 第42-44页 |
3.4.2 纯化及复性结果分析 | 第44-45页 |
3.4.3 核磁信号归属 | 第45-48页 |
3.5 本章小节 | 第48-49页 |
第四章 hIL-21/hIL-4嵌合蛋白分子动力学研究 | 第49-55页 |
4.1 引言 | 第49页 |
4.2 实验部分 | 第49-50页 |
4.2.1 NMR实验样品制备 | 第49-50页 |
4.2.2 NMR实验 | 第50页 |
4.3 结果与讨论 | 第50-54页 |
4.3.1 构象化学交换快慢的分析 | 第50-51页 |
4.3.2 R_2弛豫分散实验结果分析 | 第51-54页 |
4.4 小结与展望 | 第54-55页 |
参考文献 | 第55-61页 |
致谢 | 第61页 |