| 摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4-5页 |
| 第一章 绪论 | 第8-18页 |
| 1.1 红曲霉简介 | 第8-13页 |
| 1.1.1 红曲霉的分类 | 第8-9页 |
| 1.1.2 红曲霉的生物学特性 | 第9页 |
| 1.1.3 红曲霉的代谢产物 | 第9-13页 |
| 1.2 丝状真菌遗传转化方法 | 第13-16页 |
| 1.2.1 原生质体转化法 | 第14页 |
| 1.2.2 基因枪转化法 | 第14-15页 |
| 1.2.3 根癌农杆菌介导转化法 | 第15-16页 |
| 1.3 研究目的意义和内容 | 第16-18页 |
| 1.3.1 研究意义 | 第16-17页 |
| 1.3.2 研究目的 | 第17页 |
| 1.3.3 研究内容 | 第17-18页 |
| 第二章 材料与方法 | 第18-26页 |
| 2.1 材料 | 第18-19页 |
| 2.1.1 菌种 | 第18页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第18页 |
| 2.1.3 主要仪器 | 第18-19页 |
| 2.1.4 培养基 | 第19页 |
| 2.2 方法 | 第19-26页 |
| 2.2.1 LovD基因克隆 | 第19-22页 |
| 2.2.2 载体的制备 | 第22-23页 |
| 2.2.3 质粒提取 | 第23页 |
| 2.2.4 红曲霉原生质体制备 | 第23页 |
| 2.2.5 影响转化效率的因素研究 | 第23-24页 |
| 2.2.6 洛伐他汀测定方法 | 第24-25页 |
| 2.2.7 数据处理 | 第25-26页 |
| 第三章 结果与分析 | 第26-37页 |
| 3.1 LovD基因的克隆 | 第26-31页 |
| 3.1.1 红曲霉总RNA的提取 | 第26页 |
| 3.1.2 PCR反应条件优化 | 第26-28页 |
| 3.1.3 PCR产物回收 | 第28-29页 |
| 3.1.4 蓝白斑筛选 | 第29-30页 |
| 3.1.5 质粒提取 | 第30-31页 |
| 3.1.6 测序 | 第31页 |
| 3.2 红曲霉原生质体形态观察 | 第31-32页 |
| 3.3 红曲霉遗传转化体系的优化 | 第32-34页 |
| 3.3.1 原生质体浓度对红曲霉转化体系的影响 | 第32页 |
| 3.3.2 红曲霉菌株培养时间对红曲霉转化体系的影响 | 第32-33页 |
| 3.3.3 菌液浓度对红曲霉遗传转化体系的影响 | 第33页 |
| 3.3.4 乙酰丁香酮浓度对红曲霉遗传转化体系的影响 | 第33-34页 |
| 3.3.5 最佳的遗传转化体系 | 第34页 |
| 3.4 转化子的PCR鉴定 | 第34-35页 |
| 3.5 高产洛伐他汀菌株的筛选及稳定性分析 | 第35-37页 |
| 第四章 讨论与结论 | 第37-41页 |
| 4.1 讨论 | 第37-40页 |
| 4.1.1 红曲霉功能基因克隆 | 第37页 |
| 4.1.2 红曲霉遗传转化体系 | 第37-38页 |
| 4.1.3 红曲霉遗传转化效率因素 | 第38-39页 |
| 4.1.4 提高洛伐他汀产量的方法 | 第39-40页 |
| 4.2 结论 | 第40页 |
| 4.3 展望 | 第40-41页 |
| 参考文献 | 第41-47页 |
| 致谢 | 第47-48页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第48页 |