中文摘要 | 第1-13页 |
英文摘要 | 第13-17页 |
缩略词表 | 第17-18页 |
前言 | 第18-20页 |
实验一 SHR-SP 与SHR 脑组织差异表达基因筛选 | 第20-42页 |
一、实验材料 | 第22-23页 |
(一) 实验动物 | 第22页 |
(二) 试剂 | 第22-23页 |
(三) 器材 | 第23页 |
二、实验方法 | 第23-33页 |
(一) 组织取材 | 第23页 |
(二) 总RNA 提取 | 第23-24页 |
(三) 总RNA 纯化 | 第24页 |
(四) 总RNA 浓度测定 | 第24-25页 |
(五) 由RNA 合成双链DNA | 第25-28页 |
1、准备Poly-A RNA Control | 第25-26页 |
2、第一链cDNA 合成 | 第26-27页 |
3、第二链DNA 合成 | 第27页 |
4、纯化双链DNA | 第27-28页 |
(六) 生物素标记cDNA 合成 | 第28-29页 |
(七) 杂交 | 第29-31页 |
1、片断化cDNA | 第29-30页 |
2、杂交 | 第30-31页 |
(八) 洗脱、染色、扫描芯片 | 第31-33页 |
1、实验和洗涤工作站设置 | 第31页 |
2、洗脱和染色 | 第31-32页 |
3、扫描和数据处理 | 第32-33页 |
三、结果 | 第33-41页 |
(一) RNA 样本基本信息 | 第33-34页 |
(二) 芯片灰度扫描图 | 第34页 |
(三) GCOS 绘制散点图 | 第34-37页 |
(四) 差异基因 | 第37-41页 |
四、小结 | 第41-42页 |
实验二 SHR-SP 与SHR 脑组织差异基因生物信息学分析 | 第42-51页 |
一、实验材料 | 第42-43页 |
(一) 软件 | 第42-43页 |
(二) 分析项目 | 第43页 |
二、实验方法 | 第43-44页 |
(一) 差异基因筛选 | 第43页 |
(二) Pathway 分析 | 第43页 |
(三) GO 分析 | 第43-44页 |
(四) 聚类分析 | 第44页 |
三、结果 | 第44-50页 |
(一) 差异基因筛选 | 第44-48页 |
(二) Pathway 分析 | 第48-49页 |
(三) GO 分析 | 第49-50页 |
(四) 聚类分析 | 第50页 |
四、小结 | 第50-51页 |
实验三 SHR-SP 与SHR 脑内rfk 差别 | 第51-65页 |
一、实验材料 | 第51-58页 |
(一) 实验动物 | 第51-52页 |
(二) 试剂 | 第52-57页 |
(三) 仪器 | 第57-58页 |
二、实验方法 | 第58-63页 |
(一) Real-time PCR检测SHR-SP 和SHR 脑内rfk mRNA 水平差别 | 第58-61页 |
1、脑组织总RNA 提取 | 第58页 |
2、测RNA 浓度 | 第58-59页 |
3、逆转录 | 第59-60页 |
4、Real-time PCR 反应 | 第60页 |
5、统计方法 | 第60-61页 |
(二) WB检测SHR-SP 和SHR 脑内rfk 蛋白表达水平差别 | 第61-63页 |
1、配胶 | 第61页 |
2、组织样品处理 | 第61页 |
3、电泳 | 第61-62页 |
4、转膜 | 第62页 |
5、封闭 | 第62页 |
6、杂交 | 第62页 |
7、扫描成像 | 第62-63页 |
三、结果 | 第63-64页 |
(一) Real-time PCR检测SHR-SP 和SHR 脑内rfk mRNA 水平差别 | 第63-64页 |
(二) WB检测SHR-SP 和SHR 脑内rfk 蛋白表达水平差别 | 第64页 |
四、小结 | 第64-65页 |
实验四 核黄素相关物质对脑卒中发病的影响 | 第65-85页 |
一、实验材料 | 第67-73页 |
(一) 实验动物 | 第67-68页 |
(二) 试剂 | 第68-71页 |
(三) 器材 | 第71-73页 |
1、器械 | 第71-72页 |
2、仪器 | 第72-73页 |
二、实验方法 | 第73-77页 |
(一) 黄素类对MCAO 脑梗死面积的影响 | 第73-74页 |
1、动物分组 | 第73页 |
2、给药周期 | 第73页 |
3.M CAO 手术 | 第73页 |
4、脑组织染色 | 第73-74页 |
5、梗死面积的测定 | 第74页 |
6、统计方法 | 第74页 |
(二) 黄素类对OGD 条件下SHR-SP大脑皮层神经元凋亡和增值的影响 | 第74-77页 |
1、神经元原代培养 | 第74-75页 |
2、缺糖缺氧模型建立 | 第75页 |
3、黄素类物质剂量设计 | 第75-76页 |
4、贴壁细胞总蛋白提取 | 第76页 |
5、流式细胞术 | 第76-77页 |
6、WB 测 bcl-2 和 bax | 第77页 |
三、结果 | 第77-85页 |
(一) 黄素类对MCAO 脑梗死面积的影响 | 第77-79页 |
(二) 黄素类对OGD 条件下SHR-SP大脑皮层神经元凋亡和增值的影响 | 第79-85页 |
1、流式细胞术检测凋亡死亡状况 | 第79-83页 |
2、W B 检测凋亡相关蛋白 | 第83-85页 |
四、小结 | 第85页 |
讨论 | 第85-89页 |
结论 | 第89页 |
创新点 | 第89-90页 |
参考文献 | 第90-95页 |
综述 | 第95-109页 |
参考文献 | 第102-109页 |
附录 | 第109-116页 |
发表论文和参加科研工作情况 | 第116-118页 |
致谢 | 第118页 |