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基于高速离心和去污剂抽提的膜蛋白样品制备方法的建立与优化

摘要第5-6页
ABSTRACT第6页
缩略词索引第9-12页
第1章 引言第12-33页
    1.1 膜蛋白的定义与分类第12-14页
        1.1.1 膜蛋白按分布的分类第12-13页
        1.1.2 膜蛋白按功能的分类第13-14页
    1.2 膜蛋白作为药物靶点的研究意义第14-15页
    1.3 基于质谱的膜蛋白研究现状第15-21页
        1.3.1 质谱技术可用于膜蛋白的定量蛋白质组学研究第16-17页
        1.3.2 质谱技术可用以揭示膜蛋白-蛋白质的相互作用第17-18页
        1.3.3 质谱技术可用于膜蛋白信号转导通路的研究第18-19页
        1.3.4 质谱技术可鉴定膜蛋白的翻译后修饰第19-20页
        1.3.5 质谱技术可用于分析膜蛋白的动态结构变化第20-21页
        1.3.6 质谱技术可用于膜蛋白的组织成像第21页
    1.4 膜蛋白提取方法的研究进展与研究难点第21-29页
        1.4.1 基于离心的膜蛋白提取方法第21-23页
        1.4.2 有机溶剂辅助的膜蛋白提取方法第23-24页
        1.4.3 基于去污剂抽提的膜蛋白提取方法第24-26页
        1.4.4 基于亲和力选择的膜蛋白纯化方法第26-28页
        1.4.5 聚合物水溶液两相富集系统提取膜蛋白第28-29页
        1.4.6 用于提高膜蛋白鉴定的其他条件优化第29页
    1.5 实验室前期膜蛋白研究基础第29-33页
第2章 用于提高膜蛋白检出率的膜蛋白提取方法的建立第33-53页
    2.1 实验材料第33-34页
        2.1.1 实验试剂第33-34页
        2.1.2 实验仪器第34页
        2.1.3 溶液配制方法第34页
    2.2 实验方法第34-38页
        2.2.1 蛋白质样本制备第34-35页
        2.2.2 色氨酸荧光法蛋白质定量第35-36页
        2.2.3 SDS-PAGE电泳和考马斯亮蓝染色第36页
        2.2.4 Western Blot第36页
        2.2.5 滤器辅助的样品制备(FASP)酶解第36-37页
        2.2.6 LC-MS/MS液质联用方法第37页
        2.2.7 数据库搜索第37-38页
        2.2.8 生物信息学分析第38页
    2.3 实验结果第38-53页
        2.3.1 实验构想与设计第38-39页
        2.3.2 膜蛋白提取方法的建立第39-40页
        2.3.3 液质联用方法鉴定到的肽段与蛋白质第40-41页
        2.3.4 鉴定蛋白质的细胞组分分类及理化性质分析第41-42页
        2.3.5 蛋白质组学的GO富集分析第42-45页
        2.3.6 膜蛋白样品制备方法的平行性评价与膜蛋白鉴定率评估第45-47页
        2.3.7 用大鼠大脑皮层组织评估两种膜蛋白提取方法的效果第47-53页
第3章 结论与讨论第53-55页
参考文献第55-68页
致谢第68-69页
附录Ⅰ 在校期间发表的文章第69页

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