| 中文摘要 | 第3-4页 |
| ABSTRACT | 第4页 |
| 第一章 文献综述 | 第7-16页 |
| 1.1 干扰素的研究背景 | 第7-12页 |
| 1.1.1 干扰素的定义 | 第7-8页 |
| 1.1.2 干扰素的产生以及结构特征 | 第8-10页 |
| 1.1.3 干扰素的治病机理 | 第10-12页 |
| 1.2 干扰素类上市产品介绍 | 第12-13页 |
| 1.3 聚乙二醇修饰蛋白质 | 第13页 |
| 1.3.1 聚乙二醇的特性 | 第13页 |
| 1.3.2 PEG化修饰蛋白的原理 | 第13页 |
| 1.4 干扰素-αPEG修饰的研究进展 | 第13-16页 |
| 1.4.1 干扰素-α2 的位点特异性PEG化 | 第14-16页 |
| 第二章 重组人干扰素-α2b在大肠杆菌中的表达 | 第16-26页 |
| 2.1 干扰素-α2b在大肠杆菌中的表达 | 第17-19页 |
| 2.1.1 实验试剂 | 第17-18页 |
| 2.1.2 实验仪器 | 第18页 |
| 2.1.3 实验步骤 | 第18-19页 |
| 2.2 包涵体的收集 | 第19-20页 |
| 2.2.1 试剂 | 第19页 |
| 2.2.2 仪器 | 第19-20页 |
| 2.2.3 操作步骤 | 第20页 |
| 2.3 SDS-PAGE检测目的蛋白表达 | 第20-26页 |
| 2.3.1 SDS-PAGE | 第20-21页 |
| 2.3.2 电泳试剂 | 第21-22页 |
| 2.3.3 仪器 | 第22页 |
| 2.3.4 制胶和灌胶 | 第22-23页 |
| 2.3.5 电泳实验步骤 | 第23-24页 |
| 2.3.6 电泳分析结果 | 第24-26页 |
| 第三章 重组人干扰素-α2b的提取与纯化 | 第26-50页 |
| 3.1 包涵体 | 第26-28页 |
| 3.1.1 材料试剂 | 第27页 |
| 3.1.2 实验步骤 | 第27-28页 |
| 3.2 阳离子交换层析简介 | 第28-31页 |
| 3.2.1 试剂 | 第28-29页 |
| 3.2.2 仪器 | 第29页 |
| 3.2.3 实验步骤 | 第29页 |
| 3.2.4 实验结果与讨论 | 第29-31页 |
| 3.3 疏水层析 | 第31-38页 |
| 3.3.1 材料试剂及仪器 | 第32-33页 |
| 3.3.2 实验步骤 | 第33-34页 |
| 3.3.3 结果及分析 | 第34-35页 |
| 3.3.4 梯度洗脱时间的缩短 | 第35-36页 |
| 3.3.5 分离度的优化 | 第36-38页 |
| 3.4 疏水层析柱对已复性的重组人干扰素-α结构的影响 | 第38-42页 |
| 3.4.1 材料试剂 | 第39页 |
| 3.4.2 主要仪器 | 第39页 |
| 3.4.3 验证实验1 操作步骤 | 第39-40页 |
| 3.4.4 验证试验1 结果讨论 | 第40页 |
| 3.4.5 验证实验2 操作步骤 | 第40-41页 |
| 3.4.6 验证试验2 结果讨论 | 第41-42页 |
| 3.5 羟基磷灰石层析 | 第42-46页 |
| 3.5.1 材料试剂 | 第43页 |
| 3.5.2 主要仪器 | 第43页 |
| 3.5.3 操作步骤 | 第43页 |
| 3.5.4 结果及分析 | 第43-46页 |
| 3.6 分离提纯的重组人干扰素-α2b的生物活性测试 | 第46-50页 |
| 3.6.1 材料与试剂 | 第46-47页 |
| 3.6.2 主要仪器 | 第47页 |
| 3.6.3 操做步骤 | 第47-50页 |
| 3.6.3.1 Daudi细胞传代 | 第47页 |
| 3.6.3.2 Daudi细胞冻存 | 第47页 |
| 3.6.3.3 Daudi细胞的解冻与复苏 | 第47-48页 |
| 3.6.3.4 细胞活性实验操作步骤 | 第48-49页 |
| 3.6.3.5 实验结果及讨论 | 第49-50页 |
| 第四章 重组人干扰素-α2b的位点特异性PEG化 | 第50-54页 |
| 4.1 位点特异性PEG化 | 第50页 |
| 4.2 蛋白浓度的测定 | 第50-51页 |
| 4.2.1 蛋白质浓度测定操作步骤 | 第51页 |
| 4.3 PEG化反应 | 第51-54页 |
| 4.3.1 材料试剂 | 第51页 |
| 4.3.2 操作步骤 | 第51-52页 |
| 4.3.3 结果分析 | 第52-54页 |
| 第五章 实验结论及其意义 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-57页 |
| 发表论文和科研情况说明 | 第57-58页 |
| 致谢 | 第58页 |