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干扰CXCR4表达对SHI-1细胞株生物学功能的研究

摘要第3-6页
ABSTRACT第6-8页
符号说明第11-12页
第1章 引言第12-14页
第2章 CXCR4慢病毒载体构建第14-23页
    2.1 材料第14-15页
        2.1.1 主要试剂第14页
        2.1.2 主要仪器第14-15页
    2.2 方法第15-19页
        2.2.1 双链DNA Oligo制备第15-16页
        2.2.2 构建表达shRNA慢病毒载体第16-17页
        2.2.3 阳性克隆PCR及测序鉴定第17页
        2.2.4 慢病毒包装第17-18页
        2.2.5 慢病毒滴度测定第18-19页
    2.3 结果第19-22页
        2.3.1 RNA干扰慢病毒质粒载体的构建和鉴定结果第19-20页
        2.3.2 阳性克隆的PCR鉴定第20-21页
        2.3.3 DNA测序鉴定第21页
        2.3.4 慢病毒载体的包装及滴度测定第21-22页
    2.4 讨论第22-23页
第3章 干扰CXCR4表达对白血病SHI-1细胞生物学功能的研究第23-45页
    3.1 材料第23-24页
        3.1.1 主要试剂第23-24页
        3.1.2 主要仪器第24页
    3.2 方法第24-29页
        3.2.1 细胞培养及病毒转染第24-25页
        3.2.2 流式细胞仪检测SHI-1细胞GFP荧光表达率第25页
        3.2.3 MTT检测细胞增殖能力第25页
        3.2.4 半定量RT-PCR第25-27页
        3.2.5 q-PCR第27页
        3.2.6 流式细胞仪检测CXCR4表达第27页
        3.2.7 体外共培养黏附实验及体外跨Matrigel侵袭试验第27-28页
        3.2.8 裸鼠皮下成瘤试验第28-29页
        3.2.9 统计学处理第29页
    3.3 结果第29-38页
        3.3.1 SHI-1细胞GFP荧光表达率第29-30页
        3.3.2 细胞增殖能力的测定第30页
        3.3.3 CXCR4 在各组SHI-1细胞中的mRNA表达水平第30-31页
        3.3.4 qPCR检测CXCR4 、MMP-2、MMP-9在各组SHI-1细胞中的表达水平第31-33页
        3.3.5 流式细胞仪检测CXCR4表达第33-34页
        3.3.6 体外黏附试验第34-36页
        3.3.7 体外跨Matrigel侵袭试验第36页
        3.3.8 裸鼠皮下成瘤实验第36-38页
    3.4 讨论第38-45页
第4章 结论与展望第45-46页
    4.1 结论第45页
    4.2 实验存在的不足与展望第45-46页
致谢第46-47页
参考文献第47-51页
攻读学位期间的研究成果第51-52页
综述第52-61页
    参考文献第59-61页

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