| 摘要 | 第3-6页 |
| ABSTRACT | 第6-8页 |
| 符号说明 | 第11-12页 |
| 第1章 引言 | 第12-14页 |
| 第2章 CXCR4慢病毒载体构建 | 第14-23页 |
| 2.1 材料 | 第14-15页 |
| 2.1.1 主要试剂 | 第14页 |
| 2.1.2 主要仪器 | 第14-15页 |
| 2.2 方法 | 第15-19页 |
| 2.2.1 双链DNA Oligo制备 | 第15-16页 |
| 2.2.2 构建表达shRNA慢病毒载体 | 第16-17页 |
| 2.2.3 阳性克隆PCR及测序鉴定 | 第17页 |
| 2.2.4 慢病毒包装 | 第17-18页 |
| 2.2.5 慢病毒滴度测定 | 第18-19页 |
| 2.3 结果 | 第19-22页 |
| 2.3.1 RNA干扰慢病毒质粒载体的构建和鉴定结果 | 第19-20页 |
| 2.3.2 阳性克隆的PCR鉴定 | 第20-21页 |
| 2.3.3 DNA测序鉴定 | 第21页 |
| 2.3.4 慢病毒载体的包装及滴度测定 | 第21-22页 |
| 2.4 讨论 | 第22-23页 |
| 第3章 干扰CXCR4表达对白血病SHI-1细胞生物学功能的研究 | 第23-45页 |
| 3.1 材料 | 第23-24页 |
| 3.1.1 主要试剂 | 第23-24页 |
| 3.1.2 主要仪器 | 第24页 |
| 3.2 方法 | 第24-29页 |
| 3.2.1 细胞培养及病毒转染 | 第24-25页 |
| 3.2.2 流式细胞仪检测SHI-1细胞GFP荧光表达率 | 第25页 |
| 3.2.3 MTT检测细胞增殖能力 | 第25页 |
| 3.2.4 半定量RT-PCR | 第25-27页 |
| 3.2.5 q-PCR | 第27页 |
| 3.2.6 流式细胞仪检测CXCR4表达 | 第27页 |
| 3.2.7 体外共培养黏附实验及体外跨Matrigel侵袭试验 | 第27-28页 |
| 3.2.8 裸鼠皮下成瘤试验 | 第28-29页 |
| 3.2.9 统计学处理 | 第29页 |
| 3.3 结果 | 第29-38页 |
| 3.3.1 SHI-1细胞GFP荧光表达率 | 第29-30页 |
| 3.3.2 细胞增殖能力的测定 | 第30页 |
| 3.3.3 CXCR4 在各组SHI-1细胞中的mRNA表达水平 | 第30-31页 |
| 3.3.4 qPCR检测CXCR4 、MMP-2、MMP-9在各组SHI-1细胞中的表达水平 | 第31-33页 |
| 3.3.5 流式细胞仪检测CXCR4表达 | 第33-34页 |
| 3.3.6 体外黏附试验 | 第34-36页 |
| 3.3.7 体外跨Matrigel侵袭试验 | 第36页 |
| 3.3.8 裸鼠皮下成瘤实验 | 第36-38页 |
| 3.4 讨论 | 第38-45页 |
| 第4章 结论与展望 | 第45-46页 |
| 4.1 结论 | 第45页 |
| 4.2 实验存在的不足与展望 | 第45-46页 |
| 致谢 | 第46-47页 |
| 参考文献 | 第47-51页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第51-52页 |
| 综述 | 第52-61页 |
| 参考文献 | 第59-61页 |
