| 摘要 | 第8-11页 |
| Abstract | 第11-14页 |
| 缩略语表 | 第15-16页 |
| 1 文献综述 | 第16-33页 |
| 1.1 植物角质层蜡质的研究进展 | 第16-23页 |
| 1.1.1 植物表皮蜡质的组成及结构 | 第16页 |
| 1.1.2 表皮蜡质合成 | 第16-20页 |
| 1.1.3 蜡质的转运 | 第20-22页 |
| 1.1.4 植物蜡质合成调控基因 | 第22-23页 |
| 1.2 蜡质的作用与抗逆研究 | 第23-26页 |
| 1.2.1 蜡质与抗温度胁迫 | 第23页 |
| 1.2.2 蜡质与抗UV胁迫 | 第23页 |
| 1.2.3 蜡质与抗空气湿度胁迫 | 第23-24页 |
| 1.2.4 蜡质与抗干旱胁迫 | 第24-25页 |
| 1.2.5 蜡质与抗病虫害胁迫 | 第25-26页 |
| 1.2.6 蜡质突变体作为形态标记应用于杂交制种 | 第26页 |
| 1.3 芸薹属光叶性状的研究进展 | 第26-28页 |
| 1.3.1 芸薹属作物光叶遗传规律 | 第26-27页 |
| 1.3.2 芸薹属光叶性状定位研究 | 第27-28页 |
| 1.4 油菜基因图位克隆研究进展 | 第28-32页 |
| 1.4.1 图位克隆的基因 | 第28页 |
| 1.4.2 图位克隆在甘蓝型油菜中应用局限性 | 第28-30页 |
| 1.4.3 图位克隆在甘蓝型油菜中策略 | 第30-32页 |
| 1.5 本研究的目的和意义 | 第32-33页 |
| 2 材料与方法 | 第33-51页 |
| 2.1 实验材料 | 第33页 |
| 2.2 表皮结构观察 | 第33-35页 |
| 2.2.1 半薄切片制备 | 第33-34页 |
| 2.2.2 扫描电镜 | 第34页 |
| 2.2.3 透射电镜 | 第34-35页 |
| 2.3 分子标记分析 | 第35-39页 |
| 2.3.1 DNA提取 | 第35页 |
| 2.3.2 AFLP分析 | 第35-38页 |
| 2.3.3 AFLP标记的克隆与SCAR标记的转化 | 第38页 |
| 2.3.4 分子标记的开发 | 第38-39页 |
| 2.3.5 SNP芯片结合BSA法 | 第39页 |
| 2.3.6 连锁图的构建 | 第39页 |
| 2.4 叶片脂质分析 | 第39-40页 |
| 2.5 蜡质分析 | 第40-41页 |
| 2.5.1 TLC分析 | 第40页 |
| 2.5.2 蜡质含量分析 | 第40-41页 |
| 2.6 取样及叶片总RNA的提取 | 第41页 |
| 2.7 芯片杂交 | 第41-45页 |
| 2.7.1 制备aRNA | 第42页 |
| 2.7.2 探针制备 | 第42-43页 |
| 2.7.3 芯片杂交和洗涤 | 第43页 |
| 2.7.4 芯片扫描和数据分析 | 第43-44页 |
| 2.7.5 蜡质合成代谢相关基因分析 | 第44-45页 |
| 2.8 BnCER1基因序列分析和转基因 | 第45-49页 |
| 2.8.1 序列分析 | 第45-46页 |
| 2.8.2 遗传转化实验 | 第46-49页 |
| 2.9 表皮蜡质与抗逆分析 | 第49-51页 |
| 2.9.1 处理方法 | 第49页 |
| 2.9.2 叶片表皮蜡质含量分析 | 第49页 |
| 2.9.3 叶绿素浸提率测定 | 第49页 |
| 2.9.4 失水率测定 | 第49页 |
| 2.9.5 相对含水率测定 | 第49-50页 |
| 2.9.6 与蜡质合成相关基因BnCER1基因表达 | 第50-51页 |
| 3 实验结果 | 第51-84页 |
| 3.1 光叶突变体的形态学特征 | 第51页 |
| 3.2 表皮结构观察 | 第51-55页 |
| 3.2.1 叶片半薄切片 | 第51-52页 |
| 3.2.2 表皮蜡质的扫描电镜分析 | 第52页 |
| 3.2.3 表皮透射电镜分析 | 第52-53页 |
| 3.2.4 表皮透性检测 | 第53-55页 |
| 3.3 光叶遗传分析 | 第55-56页 |
| 3.4 光叶基因BnaA.GL定位 | 第56-61页 |
| 3.4.1 光叶基因的初步定位 | 第56页 |
| 3.4.2 已发表遗传连锁图谱标记的筛选 | 第56页 |
| 3.4.3 AFLP标记筛选 | 第56-57页 |
| 3.4.4 差异片段的回收克隆与测序 | 第57页 |
| 3.4.5 SCAR标记设计与检测 | 第57-58页 |
| 3.4.7 SNP芯片分析结合BSA法 | 第58页 |
| 3.4.8 BnaA.GL基因的遗传定位 | 第58-60页 |
| 3.4.9 与白菜和拟南芥同源位点的共线性分析 | 第60-61页 |
| 3.5 叶片脂质分析 | 第61-62页 |
| 3.6 叶片蜡质的组成和含量分析 | 第62-64页 |
| 3.6.1 蜡质的薄层层析色谱(TLC)分析和含量测定 | 第62页 |
| 3.6.2 叶表皮蜡质含量分析 | 第62-64页 |
| 3.7 cDNA芯片分析 | 第64-73页 |
| 3.7.1 RNA提取及aRNA制备 | 第64页 |
| 3.7.2 差异表达基因维恩图 | 第64-65页 |
| 3.7.3 差异表达基因的功能分类 | 第65页 |
| 3.7.4 代谢途径分析和蜡质合成代谢途径分析及验证 | 第65-73页 |
| 3.8 候选基因分析 | 第73-80页 |
| 3.8.1 BnCER1分析 | 第73-74页 |
| 3.8.2 表达分析 | 第74-78页 |
| 3.8.3 载体构建 | 第78页 |
| 3.8.4 甘蓝型油菜遗传转化 | 第78页 |
| 3.8.5 拟南芥遗传转化 | 第78-80页 |
| 3.9 表皮蜡质与植物抗逆性 | 第80-84页 |
| 3.9.1 不同处理表皮蜡质增加 | 第80-81页 |
| 3.9.2 不同处理下叶绿素浸提率 | 第81页 |
| 3.9.3 不同处理下离体叶片失水率 | 第81页 |
| 3.9.4 不同处理下叶片相对含水率 | 第81-83页 |
| 3.9.5 不同处理下BnCER1基因表达 | 第83-84页 |
| 4 讨论 | 第84-93页 |
| 4.1 光叶突变体的研究 | 第84-85页 |
| 4.1.1 显性光叶突变体的研究 | 第84-85页 |
| 4.1.2 芸薹属光叶突变体研究 | 第85页 |
| 4.2 蜡质研究在育种上的作用 | 第85-87页 |
| 4.2.1 蜡质与抗逆性 | 第85-86页 |
| 4.2.2 蜡质在育种的应用 | 第86-87页 |
| 4.3 光叶突变体GL脱羰基途径受到抑制 | 第87页 |
| 4.4 脂肪酸合成和蜡质合成相关基因受到抑制 | 第87-89页 |
| 4.5 甘蓝型油菜图位克隆的复杂性 | 第89-91页 |
| 4.5.1 甘蓝型油菜基因组复杂性 | 第89-90页 |
| 4.5.2 SNP结合BSA法在定位中的可行性 | 第90-91页 |
| 4.5.3 候选基因及遗传转化 | 第91页 |
| 4.6 下一步计划 | 第91-93页 |
| 参考文献 | 第93-110页 |
| 附录1 本研究中所用引物 | 第110-112页 |
| 附录2 芯片杂交试剂 | 第112-113页 |
| 附录3 甘蓝型油菜转化培养基配方 | 第113页 |
| 附录4 候选区段白菜注释基因 | 第113-116页 |
| 附录5 芸薹属克隆的CER1基因序列 | 第116-125页 |
| 个人简介及在读期间发表的论文 | 第125-126页 |
| 致谢 | 第126页 |
