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水稻矮缩病毒和水稻黑条矮缩病毒单克隆抗体的制备及其应用

致谢第6-7页
摘要第7-9页
Abstract第9-10页
第一章 文献综述第15-35页
    前言第15页
    1 水稻矮缩病毒的研究进展第15-22页
        1.1 发生分布及危害第15-16页
        1.2 寄主范围和危害症状第16-17页
        1.3 发病规律第17-19页
            1.3.1 侵染循环及其传播介体第17-18页
            1.3.2 发病影响因素第18-19页
        1.4 水稻矮缩病毒的分子生物学特征第19-20页
            1.4.1 病毒的基因组结构第19页
            1.4.2 病毒基因组编码的蛋白功能第19-20页
        1.5 水稻矮缩病毒的检测技术第20-21页
            1.5.1 根据症状诊断第20-21页
            1.5.2 电镜观察第21页
            1.5.3 分子生物学方法第21页
            1.5.4 血清学方法第21页
        1.6 防治策略第21-22页
            1.6.1 农业防治第22页
            1.6.2 化学防治第22页
    2 水稻黑条矮缩病毒的研究进展第22-29页
        2.1 发生分布和危害第23页
        2.2 寄主范围和发病症状第23-25页
        2.3 发病规律第25-26页
            2.3.1 病毒的传播介体和流行规律第25页
            2.3.2 影响病害流行的因素第25-26页
        2.4 水稻黑条矮缩病毒的分子生物学特征第26-28页
            2.4.1 病毒粒子及其基因组结构第26-27页
            2.4.2 病毒基因组编码的蛋白及其生物学功能第27-28页
        2.5 水稻黑条矮缩病毒的检测技术第28页
        2.6 防治策略第28-29页
            2.6.1 农业防治第28-29页
            2.6.2 化学防治第29页
    3 单克隆抗体技术及其在植物病毒学中的应用第29-35页
        3.1 抗体的结构及其特性第30-31页
            3.1.1 抗体的基本结构第30页
            3.1.2 抗体的精细结构第30-31页
        3.2 单克隆抗体技术第31-34页
            3.2.1 杂交瘤技术基本原理第31-33页
            3.2.2 杂交瘤技术基本流程第33-34页
        3.3 单克隆抗体在植物病毒学中的应用第34-35页
第二章 水稻矮缩病毒单克隆抗体的制备及应用第35-62页
    1 材料与方法第35-50页
        1.1 病毒材料第35-36页
        1.2 菌株、质粒、试剂第36页
        1.3 水稻样品中水稻矮缩病毒的鉴定第36-40页
        1.4 水稻矮缩病毒的提纯第40-41页
        1.5 单克隆抗体的制备第41-43页
            1.5.1 抗原免疫小鼠第41页
            1.5.2 细胞融合及培养第41-42页
            1.5.3 杂交瘤细胞的单克隆化及扩增第42页
            1.5.4 杂交瘤细胞株的冻存和复苏第42页
            1.5.5 腹水抗体制备及纯化第42-43页
            1.5.6 腹水抗体效价的测定第43页
            1.5.7 单克隆抗体类型及亚类鉴定第43页
        1.6 Western blot分析单抗的特性第43-46页
        1.7 血清学方法的建立及单抗的特性分析第46-50页
            1.7.1 ACP-ELISA方法的建立及单抗的特性分析第46-48页
            1.7.2 dot-ELISA方法的建立及单抗的特性分析第48-49页
            1.7.3 IC-RT-PCR的建立第49-50页
            1.7.4 ACP-ELISA、dot-ELISA 及 1C-RT-PCR 方法的田间应用第50页
    2 实验结果及分析第50-61页
        2.1 水稻样品中水稻矮缩病毒的鉴定第50-51页
        2.2 杂交瘤细胞的融合、筛选和克隆第51页
        2.3 腹水抗体制备、效价测定及抗体亚类鉴定第51页
        2.4 ACP-ELISA方法的建立及抗RDV单抗的特性分析第51-54页
            2.4.1 检测水稻和叶蝉中RDV的ACP-ELISA方法的建立第51-52页
            2.4.2 ACP-ELISA方法分析抗RDV单抗的特异性第52-53页
            2.4.3 ACP-ELISA方法分析抗RDV单抗的灵敏度第53-54页
        2.5 dot-ELISA方法的建立及抗RDV单抗的特性分析第54-57页
            2.5.1 检测水稻和叶蝉中RDV的dot-ELISA方法的建立第54页
            2.5.2 dot-ELISA方法分析抗RDV单抗的特异性第54-56页
            2.5.3 dot-ELISA方法分析抗RDV单抗的灵敏度第56-57页
        2.6 Western blot分析抗RDV单抗的特异性第57-58页
        2.7 IC-RT-PCR的建立第58-60页
        2.8 血清学方法的田间应用第60-61页
    3 讨论第61-62页
第三章 水稻黑条矮缩病毒单克隆抗体的制备及其应用第62-78页
    1 材料与方法第62-65页
        1.1 病毒第62-63页
        1.2 菌株、质粒、试剂第63页
        1.3 植物样品中水稻黑条矮缩病毒的鉴定第63页
        1.4 水稻黑条矮缩病毒的粗提取及小鼠免疫第63页
        1.5 单克隆抗体制备、腹水效价测定及抗体类型及亚类鉴定第63页
        1.6 Western blot方法分析单抗的特性第63-64页
        1.7 检测RBSDV血清学方法的建立及单抗特性的分析第64-65页
            1.7.1 检测植物病叶和灰飞虱中RBSDV的血清学方法的建立第64页
            1.7.2 ACP-ELISA和dot-ELISA方法分析抗RBSDV单抗的特异性第64页
            1.7.3 ACP-ELISA方法分析抗RBSDV单抗的灵敏度第64页
            1.7.4 dot-ELISA方法分析抗RBSDV单抗的灵敏度第64-65页
        1.8 建立的血清学方法的田间应用第65页
    2 实验结果及分析第65-76页
        2.1 植物样品中水稻黑条矮缩病毒的鉴定第65-66页
        2.2 杂交瘤细胞的融合、筛选和克隆第66页
        2.3 腹水抗体制备、效价测定及抗体亚类鉴定第66页
        2.4 ACP-ELISA方法的建立及抗RBSDV单抗的特性分析第66-70页
            2.4.1 检测水稻和灰飞虱中RBSDV的ACP-ELISA方法的建立第66-67页
            2.4.2 ACP-ELISA方法分析抗RBSDV单抗的特异性第67-68页
            2.4.3 ACP-ELISA方法分析抗RBSDV单抗的灵敏度第68-70页
        2.5 dot-ELISA方法的建立及抗RBSDV单抗的特性分析第70-74页
            2.5.1 检测水稻和灰飞虱中RBSDV的dot-ELISA方法的建立第70页
            2.5.2 dot-ELISA方法分析抗RBSDV单抗的特异性第70-72页
            2.5.3 dot-ELISA分析抗RBSDV单抗的灵敏度第72-74页
        2.6 Western blot分析单抗的特异性第74-75页
        2.7 ACP-ELISA和dot-ELISA方法的田间应用第75-76页
    3 讨论第76-78页
参考文献第78-87页
附录A 常用生化及分子生物学试剂与仪器第87-88页
附录B 常用缓冲液及培养基配方第88-92页
在学期间所取得的科研成果第92页

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