致谢 | 第6-7页 |
摘要 | 第7-9页 |
Abstract | 第9-10页 |
第一章 文献综述 | 第15-35页 |
前言 | 第15页 |
1 水稻矮缩病毒的研究进展 | 第15-22页 |
1.1 发生分布及危害 | 第15-16页 |
1.2 寄主范围和危害症状 | 第16-17页 |
1.3 发病规律 | 第17-19页 |
1.3.1 侵染循环及其传播介体 | 第17-18页 |
1.3.2 发病影响因素 | 第18-19页 |
1.4 水稻矮缩病毒的分子生物学特征 | 第19-20页 |
1.4.1 病毒的基因组结构 | 第19页 |
1.4.2 病毒基因组编码的蛋白功能 | 第19-20页 |
1.5 水稻矮缩病毒的检测技术 | 第20-21页 |
1.5.1 根据症状诊断 | 第20-21页 |
1.5.2 电镜观察 | 第21页 |
1.5.3 分子生物学方法 | 第21页 |
1.5.4 血清学方法 | 第21页 |
1.6 防治策略 | 第21-22页 |
1.6.1 农业防治 | 第22页 |
1.6.2 化学防治 | 第22页 |
2 水稻黑条矮缩病毒的研究进展 | 第22-29页 |
2.1 发生分布和危害 | 第23页 |
2.2 寄主范围和发病症状 | 第23-25页 |
2.3 发病规律 | 第25-26页 |
2.3.1 病毒的传播介体和流行规律 | 第25页 |
2.3.2 影响病害流行的因素 | 第25-26页 |
2.4 水稻黑条矮缩病毒的分子生物学特征 | 第26-28页 |
2.4.1 病毒粒子及其基因组结构 | 第26-27页 |
2.4.2 病毒基因组编码的蛋白及其生物学功能 | 第27-28页 |
2.5 水稻黑条矮缩病毒的检测技术 | 第28页 |
2.6 防治策略 | 第28-29页 |
2.6.1 农业防治 | 第28-29页 |
2.6.2 化学防治 | 第29页 |
3 单克隆抗体技术及其在植物病毒学中的应用 | 第29-35页 |
3.1 抗体的结构及其特性 | 第30-31页 |
3.1.1 抗体的基本结构 | 第30页 |
3.1.2 抗体的精细结构 | 第30-31页 |
3.2 单克隆抗体技术 | 第31-34页 |
3.2.1 杂交瘤技术基本原理 | 第31-33页 |
3.2.2 杂交瘤技术基本流程 | 第33-34页 |
3.3 单克隆抗体在植物病毒学中的应用 | 第34-35页 |
第二章 水稻矮缩病毒单克隆抗体的制备及应用 | 第35-62页 |
1 材料与方法 | 第35-50页 |
1.1 病毒材料 | 第35-36页 |
1.2 菌株、质粒、试剂 | 第36页 |
1.3 水稻样品中水稻矮缩病毒的鉴定 | 第36-40页 |
1.4 水稻矮缩病毒的提纯 | 第40-41页 |
1.5 单克隆抗体的制备 | 第41-43页 |
1.5.1 抗原免疫小鼠 | 第41页 |
1.5.2 细胞融合及培养 | 第41-42页 |
1.5.3 杂交瘤细胞的单克隆化及扩增 | 第42页 |
1.5.4 杂交瘤细胞株的冻存和复苏 | 第42页 |
1.5.5 腹水抗体制备及纯化 | 第42-43页 |
1.5.6 腹水抗体效价的测定 | 第43页 |
1.5.7 单克隆抗体类型及亚类鉴定 | 第43页 |
1.6 Western blot分析单抗的特性 | 第43-46页 |
1.7 血清学方法的建立及单抗的特性分析 | 第46-50页 |
1.7.1 ACP-ELISA方法的建立及单抗的特性分析 | 第46-48页 |
1.7.2 dot-ELISA方法的建立及单抗的特性分析 | 第48-49页 |
1.7.3 IC-RT-PCR的建立 | 第49-50页 |
1.7.4 ACP-ELISA、dot-ELISA 及 1C-RT-PCR 方法的田间应用 | 第50页 |
2 实验结果及分析 | 第50-61页 |
2.1 水稻样品中水稻矮缩病毒的鉴定 | 第50-51页 |
2.2 杂交瘤细胞的融合、筛选和克隆 | 第51页 |
2.3 腹水抗体制备、效价测定及抗体亚类鉴定 | 第51页 |
2.4 ACP-ELISA方法的建立及抗RDV单抗的特性分析 | 第51-54页 |
2.4.1 检测水稻和叶蝉中RDV的ACP-ELISA方法的建立 | 第51-52页 |
2.4.2 ACP-ELISA方法分析抗RDV单抗的特异性 | 第52-53页 |
2.4.3 ACP-ELISA方法分析抗RDV单抗的灵敏度 | 第53-54页 |
2.5 dot-ELISA方法的建立及抗RDV单抗的特性分析 | 第54-57页 |
2.5.1 检测水稻和叶蝉中RDV的dot-ELISA方法的建立 | 第54页 |
2.5.2 dot-ELISA方法分析抗RDV单抗的特异性 | 第54-56页 |
2.5.3 dot-ELISA方法分析抗RDV单抗的灵敏度 | 第56-57页 |
2.6 Western blot分析抗RDV单抗的特异性 | 第57-58页 |
2.7 IC-RT-PCR的建立 | 第58-60页 |
2.8 血清学方法的田间应用 | 第60-61页 |
3 讨论 | 第61-62页 |
第三章 水稻黑条矮缩病毒单克隆抗体的制备及其应用 | 第62-78页 |
1 材料与方法 | 第62-65页 |
1.1 病毒 | 第62-63页 |
1.2 菌株、质粒、试剂 | 第63页 |
1.3 植物样品中水稻黑条矮缩病毒的鉴定 | 第63页 |
1.4 水稻黑条矮缩病毒的粗提取及小鼠免疫 | 第63页 |
1.5 单克隆抗体制备、腹水效价测定及抗体类型及亚类鉴定 | 第63页 |
1.6 Western blot方法分析单抗的特性 | 第63-64页 |
1.7 检测RBSDV血清学方法的建立及单抗特性的分析 | 第64-65页 |
1.7.1 检测植物病叶和灰飞虱中RBSDV的血清学方法的建立 | 第64页 |
1.7.2 ACP-ELISA和dot-ELISA方法分析抗RBSDV单抗的特异性 | 第64页 |
1.7.3 ACP-ELISA方法分析抗RBSDV单抗的灵敏度 | 第64页 |
1.7.4 dot-ELISA方法分析抗RBSDV单抗的灵敏度 | 第64-65页 |
1.8 建立的血清学方法的田间应用 | 第65页 |
2 实验结果及分析 | 第65-76页 |
2.1 植物样品中水稻黑条矮缩病毒的鉴定 | 第65-66页 |
2.2 杂交瘤细胞的融合、筛选和克隆 | 第66页 |
2.3 腹水抗体制备、效价测定及抗体亚类鉴定 | 第66页 |
2.4 ACP-ELISA方法的建立及抗RBSDV单抗的特性分析 | 第66-70页 |
2.4.1 检测水稻和灰飞虱中RBSDV的ACP-ELISA方法的建立 | 第66-67页 |
2.4.2 ACP-ELISA方法分析抗RBSDV单抗的特异性 | 第67-68页 |
2.4.3 ACP-ELISA方法分析抗RBSDV单抗的灵敏度 | 第68-70页 |
2.5 dot-ELISA方法的建立及抗RBSDV单抗的特性分析 | 第70-74页 |
2.5.1 检测水稻和灰飞虱中RBSDV的dot-ELISA方法的建立 | 第70页 |
2.5.2 dot-ELISA方法分析抗RBSDV单抗的特异性 | 第70-72页 |
2.5.3 dot-ELISA分析抗RBSDV单抗的灵敏度 | 第72-74页 |
2.6 Western blot分析单抗的特异性 | 第74-75页 |
2.7 ACP-ELISA和dot-ELISA方法的田间应用 | 第75-76页 |
3 讨论 | 第76-78页 |
参考文献 | 第78-87页 |
附录A 常用生化及分子生物学试剂与仪器 | 第87-88页 |
附录B 常用缓冲液及培养基配方 | 第88-92页 |
在学期间所取得的科研成果 | 第92页 |