摘要 | 第3-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
第一章 绪论 | 第9-15页 |
1.1 研究背景 | 第9-13页 |
1.1.1 肝癌发生和肝癌治疗进展 | 第9-10页 |
1.1.2 甘油三酯脂肪酶ATGL | 第10-12页 |
1.1.3 真核质粒构建 | 第12-13页 |
1.2 研究目的和意义 | 第13页 |
1.3 研究内容与方法 | 第13-15页 |
1.3.1 ATGL真核质粒构建和表达 | 第14页 |
1.3.2 ATGL对肝癌细胞增殖作用影响 | 第14页 |
1.3.3 ATGL对肝癌细胞转移影响 | 第14页 |
1.3.4 ATGL促进肝癌细胞增殖的分子机制研究 | 第14-15页 |
第二章 ATGL构建与表达鉴定 | 第15-35页 |
2.1 引言 | 第15-16页 |
2.2 材料与方法 | 第16-29页 |
2.2.1 细胞株和细菌 | 第16页 |
2.2.2 试剂和耗材 | 第16-17页 |
2.2.3 仪器 | 第17页 |
2.2.4 相关试剂配制 | 第17-18页 |
2.2.5 ATGL-pcDNA3.1(+)过表达质粒的构建 | 第18-24页 |
2.2.6 ATGL过表达质粒转染肝癌细胞 | 第24-25页 |
2.2.7 蛋白免疫印迹(Weste rn blot) | 第25-26页 |
2.2.8 实时荧光定量PCR(qRT-PCR) | 第26-29页 |
2.2.9 统计分析 | 第29页 |
2.3 实验内容和实验结果 | 第29-33页 |
2.3.1 ATGL真核质粒构建 | 第29-32页 |
2.3.2 ATGL真核质粒在肝癌细胞中表达 | 第32-33页 |
2.4 讨论 | 第33-35页 |
第三章 ATGL在肝癌细胞中功能研究 | 第35-43页 |
3.1 引言 | 第35-36页 |
3.2 材料与方法 | 第36-38页 |
3.2.1 实验仪器和试剂耗材 | 第36页 |
3.2.2 试剂配置 | 第36页 |
3.2.3 MTT实验 | 第36-37页 |
3.2.4 平板克隆形成实验 | 第37页 |
3.2.5 划痕实验 | 第37页 |
3.2.6 迁移实验(Migration assay) | 第37-38页 |
3.3 实验内容和实验结果 | 第38-41页 |
3.3.1 MTT法检测ATGL对肝癌细胞增殖能力 | 第38-39页 |
3.3.2 平板克隆形成实验检测ATGL对肝癌细胞克隆形成能力 | 第39页 |
3.3.3 划痕实验检测ATGL对肝癌细胞迁移能力影响 | 第39-40页 |
3.3.4 迁移实验(Migration assay)检测ATGL对肝癌细胞的迁移能力影响 | 第40-41页 |
3.4 讨论 | 第41-43页 |
第四章 ATGL促进肝癌细胞增殖机制研究 | 第43-51页 |
4.1 引言 | 第43-44页 |
4.2 材料与方法 | 第44-49页 |
4.2.1 实验仪器和试剂耗材 | 第44页 |
4.2.2 试剂配置 | 第44页 |
4.2.3 蛋白免疫印迹分析 | 第44-49页 |
4.3 实验内容和实验结果 | 第49-50页 |
4.3.1 p-AKT信号通路在ATGL促进肝癌细胞增殖中作用 | 第49页 |
4.3.2 p-ERK信号通路在ATGL促进肝癌细胞增殖中作用 | 第49-50页 |
4.4 讨论 | 第50-51页 |
第五章 总结与展望 | 第51-52页 |
5.1 总结 | 第51页 |
5.2 特色与创新 | 第51页 |
5.3 展望 | 第51-52页 |
参考文献 | 第52-57页 |
附录 | 第57-58页 |
在学期间发表论文 | 第58-59页 |
致谢 | 第59页 |