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ATGL真核质粒构建和在肝癌细胞中作用研究

摘要第3-5页
Abstract第5-6页
第一章 绪论第9-15页
    1.1 研究背景第9-13页
        1.1.1 肝癌发生和肝癌治疗进展第9-10页
        1.1.2 甘油三酯脂肪酶ATGL第10-12页
        1.1.3 真核质粒构建第12-13页
    1.2 研究目的和意义第13页
    1.3 研究内容与方法第13-15页
        1.3.1 ATGL真核质粒构建和表达第14页
        1.3.2 ATGL对肝癌细胞增殖作用影响第14页
        1.3.3 ATGL对肝癌细胞转移影响第14页
        1.3.4 ATGL促进肝癌细胞增殖的分子机制研究第14-15页
第二章 ATGL构建与表达鉴定第15-35页
    2.1 引言第15-16页
    2.2 材料与方法第16-29页
        2.2.1 细胞株和细菌第16页
        2.2.2 试剂和耗材第16-17页
        2.2.3 仪器第17页
        2.2.4 相关试剂配制第17-18页
        2.2.5 ATGL-pcDNA3.1(+)过表达质粒的构建第18-24页
        2.2.6 ATGL过表达质粒转染肝癌细胞第24-25页
        2.2.7 蛋白免疫印迹(Weste rn blot)第25-26页
        2.2.8 实时荧光定量PCR(qRT-PCR)第26-29页
        2.2.9 统计分析第29页
    2.3 实验内容和实验结果第29-33页
        2.3.1 ATGL真核质粒构建第29-32页
        2.3.2 ATGL真核质粒在肝癌细胞中表达第32-33页
    2.4 讨论第33-35页
第三章 ATGL在肝癌细胞中功能研究第35-43页
    3.1 引言第35-36页
    3.2 材料与方法第36-38页
        3.2.1 实验仪器和试剂耗材第36页
        3.2.2 试剂配置第36页
        3.2.3 MTT实验第36-37页
        3.2.4 平板克隆形成实验第37页
        3.2.5 划痕实验第37页
        3.2.6 迁移实验(Migration assay)第37-38页
    3.3 实验内容和实验结果第38-41页
        3.3.1 MTT法检测ATGL对肝癌细胞增殖能力第38-39页
        3.3.2 平板克隆形成实验检测ATGL对肝癌细胞克隆形成能力第39页
        3.3.3 划痕实验检测ATGL对肝癌细胞迁移能力影响第39-40页
        3.3.4 迁移实验(Migration assay)检测ATGL对肝癌细胞的迁移能力影响第40-41页
    3.4 讨论第41-43页
第四章 ATGL促进肝癌细胞增殖机制研究第43-51页
    4.1 引言第43-44页
    4.2 材料与方法第44-49页
        4.2.1 实验仪器和试剂耗材第44页
        4.2.2 试剂配置第44页
        4.2.3 蛋白免疫印迹分析第44-49页
    4.3 实验内容和实验结果第49-50页
        4.3.1 p-AKT信号通路在ATGL促进肝癌细胞增殖中作用第49页
        4.3.2 p-ERK信号通路在ATGL促进肝癌细胞增殖中作用第49-50页
    4.4 讨论第50-51页
第五章 总结与展望第51-52页
    5.1 总结第51页
    5.2 特色与创新第51页
    5.3 展望第51-52页
参考文献第52-57页
附录第57-58页
在学期间发表论文第58-59页
致谢第59页

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