个人简历 | 第3-7页 |
中文摘要 | 第7-9页 |
英文摘要 | 第9-10页 |
前言 | 第11-13页 |
材料与方法 | 第13-28页 |
1. 材料 | 第13-15页 |
1.1 主要设备 | 第13页 |
1.2 主要试剂 | 第13-14页 |
1.3 主要试剂的配置 | 第14-15页 |
2. 实验方法 | 第15-28页 |
2.1 细胞培养 | 第15-17页 |
2.1.1 细胞复苏 | 第15-16页 |
2.1.2 细胞传代 | 第16页 |
2.1.3 细胞冻存 | 第16-17页 |
2.2 慢病毒转染 | 第17页 |
2.2.1 细胞转染 | 第17页 |
2.2.2 稳定株筛选 | 第17页 |
2.3 RT-PCR验证TCF21在A549中成功高表达 | 第17-21页 |
2.3.1 细胞总RNA提取 | 第17-19页 |
2.3.2 逆转录 | 第19-20页 |
2.3.3 荧光定量PCR | 第20-21页 |
2.4 WB验证TCF21在A549中成功高表达 | 第21-24页 |
2.4.1 细胞总蛋白提取 | 第21页 |
2.4.2 SDS-PAGE电泳 | 第21-22页 |
2.4.3 转膜 | 第22-23页 |
2.4.4 封闭及抗体孵育 | 第23页 |
2.4.5 发光检测 | 第23-24页 |
2.4.7 结果分析 | 第24页 |
2.5 MTT法检测TCF21对肺腺癌A549细胞DDP化疗敏感性的影响 | 第24-25页 |
2.6 平板克隆实验检测TCF21对肺腺癌A549细胞放疗敏感性的影响 | 第25页 |
2.7 裸鼠成瘤实验 | 第25-27页 |
2.8 统计学处理 | 第27-28页 |
结果 | 第28-37页 |
3.1 成功获得TCF21高表达A549稳定转染细胞 | 第28页 |
3.2 荧光定量PCR检测A549稳定转染细胞中TCF21基因的表达 | 第28-29页 |
3.3 Western Blot检测A549稳定转染细胞中TCF21蛋白的表达 | 第29-30页 |
3.4 MTT法检测高表达TCF21对肺腺癌A549细胞DDP化疗敏感性的影响 | 第30-32页 |
3.5 平板克隆形成实验检测高表达TCF21对A549细胞放疗敏感性的影响 | 第32-33页 |
3.6 过表达TCF21对A549裸鼠成瘤的影响 | 第33-37页 |
3.6.1 移植瘤的生长生长曲线 | 第33-35页 |
3.6.3 PCR检测瘤体中TCF21的表达 | 第35页 |
3.6.4 免疫组化检测肿瘤组织中的TCF21、Bax、Bcl-2及Casepase-3的表达 | 第35-37页 |
讨论 | 第37-42页 |
参考文献 | 第42-46页 |
综述 | 第46-59页 |
参考文献 | 第55-59页 |
致谢 | 第59-61页 |
攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第61页 |