| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 缩略词表 | 第10-12页 |
| 1 引言 | 第12-14页 |
| 2 试剂与设备 | 第14-22页 |
| 2.1 主要试剂 | 第14-15页 |
| 2.2 仪器与设备 | 第15-17页 |
| 2.3 主要溶剂的配制 | 第17-22页 |
| 3 方法 | 第22-34页 |
| 3.1 细胞培养和转染 | 第22-24页 |
| 3.1.1 细胞培养 | 第22页 |
| 3.1.2 细胞复苏 | 第22页 |
| 3.1.3 细胞冻存 | 第22页 |
| 3.1.4 细胞消化 | 第22-23页 |
| 3.1.5 细胞计数 | 第23页 |
| 3.1.6 细胞转染 | 第23-24页 |
| 3.2 敲低TIPE稳定株的筛选 | 第24-25页 |
| 3.2.1 制作慢病毒颗粒 | 第24页 |
| 3.2.2 收集慢病毒颗粒 | 第24-25页 |
| 3.2.3 决定最优嘌呤霉素的浓度 | 第25页 |
| 3.2.4 慢病毒的感染与筛选 | 第25页 |
| 3.3 敲低TIPE水平的验证 | 第25-29页 |
| 3.3.1 Western blot检测细胞中TIPE的蛋白表达 | 第25-27页 |
| 3.3.2 RT-PCR检测细胞中TIPE基因的表达 | 第27-29页 |
| 3.4 细胞功能方面检测 | 第29-32页 |
| 3.4.1 细胞黏附能力的检测 | 第29页 |
| 3.4.2 细胞增殖能力的检测 | 第29-30页 |
| 3.4.3 细胞抗原吞噬能力的检测 | 第30页 |
| 3.4.4 细胞迁移能力的检测 | 第30-31页 |
| 3.4.5 细胞分泌炎症性因子的检测 | 第31-32页 |
| 3.5 统计学分析 | 第32-34页 |
| 4 结果 | 第34-44页 |
| 4.1 TIPE基因沉默水平的验证 | 第34页 |
| 4.2 沉默TIPE的表达抑制RAW264.7 细胞的增殖能力 | 第34-36页 |
| 4.2.1 平板克隆实验检测RAW264.7 细胞的增殖能力 | 第34-35页 |
| 4.2.2 MTT实验检测RAW264.7 细胞的增殖能力 | 第35-36页 |
| 4.3 沉默TIPE的表达抑制RAW264.7 细胞的黏附和迁移能力 | 第36-39页 |
| 4.3.1 沉默TIPE的表达抑制RAW264.7 细胞的黏附能力 | 第36-37页 |
| 4.3.2 划痕实验检测RAW264.7 细胞的迁移能力 | 第37-38页 |
| 4.3.3 Transwell实验检测RAW264.7细胞的迁移能力 | 第38-39页 |
| 4.4 沉默TIPE的表达抑制RAW264.7 细胞的抗原吞噬能力 | 第39-40页 |
| 4.5 沉默TIPE的表达抑制RAW264.7 细胞分泌炎症性细胞因子 | 第40-41页 |
| 4.6 沉默TIPE下调C-RAF、ERK1/2 和P38的磷酸化水平 | 第41-44页 |
| 5 讨论 | 第44-48页 |
| 6 结论 | 第48-50页 |
| 参考文献 | 第50-53页 |
| 综述 TNFAIP8家族蛋白研究进展 | 第53-63页 |
| 参考文献 | 第60-63页 |
| 致谢 | 第63-64页 |
| 攻读学位期间参加的学术会议及研究成果 | 第64-65页 |
