摘要 | 第4-7页 |
Abstract | 第7-10页 |
第1章 绪论 | 第14-20页 |
1.1 研究的背景 | 第14-18页 |
1.1.1 癌干细胞的来源 | 第14-15页 |
1.1.2 癌干细胞表面标志物 | 第15-16页 |
1.1.3 癌干细胞的鉴定和筛选 | 第16页 |
1.1.4 CD133~+/CD44~+ 结肠癌干细胞对治疗的耐受性 | 第16-17页 |
1.1.5 癌干细胞耐辐射和耐药性机制 | 第17页 |
1.1.6 P53基因 | 第17-18页 |
1.1.7 DNA-PKcs | 第18页 |
1.2 预实验探索性研究提示 | 第18-20页 |
第2章 材料与方法 | 第20-38页 |
2.1 材料 | 第20-24页 |
2.1.1 实验室常用药品试剂及配方 | 第20-21页 |
2.1.2 抗体 | 第21-22页 |
2.1.3 仪器及耗材 | 第22-23页 |
2.1.4 其他 | 第23-24页 |
2.2 方法 | 第24-34页 |
2.2.1 细胞培养及传代处理 | 第24页 |
2.2.2 蛋白样品的制备 | 第24-25页 |
2.2.3 蛋白质聚丙烯酰胺凝胶电泳免疫印迹杂交法 | 第25-27页 |
2.2.4 QT-PCR实验 | 第27-28页 |
2.2.5 流式细胞术分析 | 第28-29页 |
2.2.6 转染实验 | 第29-31页 |
2.2.7 双荧光素酶-报告基因实验 | 第31-34页 |
2.3 细胞克隆形成实验 | 第34-35页 |
2.4 MTT实验 | 第35页 |
2.5 流式细胞术实验 | 第35-37页 |
2.5.1 流式细胞仪检测癌干细胞亚群比例 | 第35-36页 |
2.5.2 细胞周期检测 | 第36页 |
2.5.3 细胞凋亡检测 | 第36-37页 |
2.6 免疫荧光激光共聚焦检测γH2AX foci | 第37页 |
2.6.1 样品收集及保存 | 第37页 |
2.6.2 样品处理 | 第37页 |
2.7 统计学方法 | 第37-38页 |
第3章 结果 | 第38-62页 |
3.1 癌干细胞表面标志物CD133蛋白在两细胞系间的差异性 | 第38-39页 |
3.1.1 两细胞系中 CD133/CD44 癌干细胞亚群比例分析 | 第38-39页 |
3.1.2 两细胞系中CD133蛋白和mRNA水平表达差异性分析 | 第39页 |
3.2 p53对癌干细胞表面标志物CD133的调控 | 第39-43页 |
3.3 CD133启动子生物信息分析及报告基因重组载体 | 第43-45页 |
3.4 p53基因对CD133启动子转录活性的调节 | 第45-48页 |
3.5 HCT116细胞系癌干细胞特性 | 第48-51页 |
3.6 NU7026对HCT116细胞增殖的影响 | 第51-53页 |
3.7 流式细胞术分析 | 第53-58页 |
3.7.1 NU7026对CD133阳性亚群比例的影响 | 第53-54页 |
3.7.2 NU7026对放射诱发HCT116细胞G2/M期阻滞的影响 | 第54-56页 |
3.7.3 NU7026对放射诱发HCT116细胞凋亡的影响 | 第56-58页 |
3.8 NU7026对放射诱发HCT116细胞DNA损伤修复的影响 | 第58-62页 |
3.8.1 NU7026对放射诱发HCT116p53~(+/+)细胞DNA损伤修复的影响 | 第58-59页 |
3.8.2 NU7026对放射诱发HCT116p53~(-/-)细胞DNA双链断裂损伤修复的影响 | 第59-62页 |
第4章 讨论 | 第62-68页 |
4.1 p53基因正向调控CD133启动子活性 | 第62-63页 |
4.2 DNA-PKcs抑制剂NU7026对结肠癌细胞系γ射线的增敏作用 | 第63-68页 |
第5章 结论 | 第68-70页 |
参考文献 | 第70-77页 |
综述 | 第77-88页 |
参考文献 | 第83-88页 |
附录 | 第88-92页 |
作者攻读学位期间的科研成果 | 第92-94页 |
致谢 | 第94页 |