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结肠癌细胞系中p53调控癌干细胞表面标志物CD133表达及NU7026的辐射增敏作用研究

摘要第4-7页
Abstract第7-10页
第1章 绪论第14-20页
    1.1 研究的背景第14-18页
        1.1.1 癌干细胞的来源第14-15页
        1.1.2 癌干细胞表面标志物第15-16页
        1.1.3 癌干细胞的鉴定和筛选第16页
        1.1.4 CD133~+/CD44~+ 结肠癌干细胞对治疗的耐受性第16-17页
        1.1.5 癌干细胞耐辐射和耐药性机制第17页
        1.1.6 P53基因第17-18页
        1.1.7 DNA-PKcs第18页
    1.2 预实验探索性研究提示第18-20页
第2章 材料与方法第20-38页
    2.1 材料第20-24页
        2.1.1 实验室常用药品试剂及配方第20-21页
        2.1.2 抗体第21-22页
        2.1.3 仪器及耗材第22-23页
        2.1.4 其他第23-24页
    2.2 方法第24-34页
        2.2.1 细胞培养及传代处理第24页
        2.2.2 蛋白样品的制备第24-25页
        2.2.3 蛋白质聚丙烯酰胺凝胶电泳免疫印迹杂交法第25-27页
        2.2.4 QT-PCR实验第27-28页
        2.2.5 流式细胞术分析第28-29页
        2.2.6 转染实验第29-31页
        2.2.7 双荧光素酶-报告基因实验第31-34页
    2.3 细胞克隆形成实验第34-35页
    2.4 MTT实验第35页
    2.5 流式细胞术实验第35-37页
        2.5.1 流式细胞仪检测癌干细胞亚群比例第35-36页
        2.5.2 细胞周期检测第36页
        2.5.3 细胞凋亡检测第36-37页
    2.6 免疫荧光激光共聚焦检测γH2AX foci第37页
        2.6.1 样品收集及保存第37页
        2.6.2 样品处理第37页
    2.7 统计学方法第37-38页
第3章 结果第38-62页
    3.1 癌干细胞表面标志物CD133蛋白在两细胞系间的差异性第38-39页
        3.1.1 两细胞系中 CD133/CD44 癌干细胞亚群比例分析第38-39页
        3.1.2 两细胞系中CD133蛋白和mRNA水平表达差异性分析第39页
    3.2 p53对癌干细胞表面标志物CD133的调控第39-43页
    3.3 CD133启动子生物信息分析及报告基因重组载体第43-45页
    3.4 p53基因对CD133启动子转录活性的调节第45-48页
    3.5 HCT116细胞系癌干细胞特性第48-51页
    3.6 NU7026对HCT116细胞增殖的影响第51-53页
    3.7 流式细胞术分析第53-58页
        3.7.1 NU7026对CD133阳性亚群比例的影响第53-54页
        3.7.2 NU7026对放射诱发HCT116细胞G2/M期阻滞的影响第54-56页
        3.7.3 NU7026对放射诱发HCT116细胞凋亡的影响第56-58页
    3.8 NU7026对放射诱发HCT116细胞DNA损伤修复的影响第58-62页
        3.8.1 NU7026对放射诱发HCT116p53~(+/+)细胞DNA损伤修复的影响第58-59页
        3.8.2 NU7026对放射诱发HCT116p53~(-/-)细胞DNA双链断裂损伤修复的影响第59-62页
第4章 讨论第62-68页
    4.1 p53基因正向调控CD133启动子活性第62-63页
    4.2 DNA-PKcs抑制剂NU7026对结肠癌细胞系γ射线的增敏作用第63-68页
第5章 结论第68-70页
参考文献第70-77页
综述第77-88页
    参考文献第83-88页
附录第88-92页
作者攻读学位期间的科研成果第92-94页
致谢第94页

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