| 摘要 | 第3-7页 |
| Abstract | 第7-11页 |
| 引言 | 第15-16页 |
| 第一章 背景研究 | 第16-28页 |
| 第一节 肿瘤中医概述 | 第16-19页 |
| 一、中医学对肿瘤的认识 | 第16页 |
| 二、中医对肿瘤病因认识 | 第16-17页 |
| 三、中医对肿瘤病机认识 | 第17-18页 |
| 四、中医肿瘤治疗原则 | 第18-19页 |
| 第二节 丹参及其有效成分药理学研究 | 第19-20页 |
| 一、丹参药理学研究 | 第19页 |
| 二、丹参酮ⅡA药理学相关研究 | 第19-20页 |
| 三、丹参素药理学相关研究 | 第20页 |
| 第三节 肿瘤血管靶向药物研究进展 | 第20-23页 |
| 一、肿瘤新生血管抑制剂 | 第20-22页 |
| 二、肿瘤血管阻断剂 | 第22页 |
| 三、肿瘤新生血管和血管阻断双重抑制剂 | 第22-23页 |
| 第四节 肿瘤基因疗法概述 | 第23-25页 |
| 一、自杀基因疗法 | 第23-24页 |
| 二、中药增效自杀基因系统 | 第24-25页 |
| 三、旁杀伤效应及其机制 | 第25页 |
| 第六节 缝隙连接相关研究 | 第25-28页 |
| 一、缝隙连接蛋白与疾病发生关系 | 第26页 |
| 二、缝隙连接蛋白的调节机制 | 第26-28页 |
| 第二章 实验研究 | 第28-54页 |
| 第一节 HUVEC细胞株HSV-tkGFP/GCV自杀基因系统的建立 | 第28-34页 |
| 1 材料 | 第28页 |
| 1.1 菌种和质粒 | 第28页 |
| 1.3 仪器与设备 | 第28页 |
| 1.4 试剂配制 | 第28页 |
| 2 方法 | 第28-30页 |
| 2.1 质粒提取 | 第28页 |
| 2.2 制备病毒液 | 第28-29页 |
| 2.3 感染细胞 | 第29页 |
| 2.4 分选细胞 | 第29页 |
| 2.5 MTT法检测质粒对细胞生长曲线的影响 | 第29页 |
| 2.6 MTT法检验HUVEC-tkGFP系统对更昔洛韦(GCV)敏感性 | 第29页 |
| 2.7 MTT检测不同比例HUVEC-tkGFP与HUVEC混合细胞的GCV旁杀伤效应 | 第29-30页 |
| 2.8 统计方法 | 第30页 |
| 3 实验结果 | 第30-32页 |
| 3.1 细胞的转染和基因的表达结果 | 第30页 |
| 3.2 MTT法检测转染质粒对细胞生长曲线的影响结果 | 第30页 |
| 3.3 MTT法检测HUVEC-tkGFP细胞对GCV的敏感性(验证HUVEC-tkGFP细胞的TK活性) | 第30-31页 |
| 3.4 MTT法检验GCV对不同比例的HUVEC与HUVEC-tkGFP混合细胞的杀伤效应 | 第31-32页 |
| 4 实验讨论 | 第32-34页 |
| 4.1 建立具有荧光示踪功能的HSV-tkGFP/GCV自杀基因系统的目的和意义 | 第32-33页 |
| 4.2 建立的HSV-tkGFP/GCV荧光示踪系统功能验证 | 第33-34页 |
| 第二节 TanshinoneⅡA、SAAS对HUVEC的HSV-tkGFP/GCV自杀基因治疗系统的增效作用 | 第34-43页 |
| 1 实验材料 | 第34页 |
| 1.1 试剂与耗材 | 第34页 |
| 1.2 仪器与设备 | 第34页 |
| 1.3 药物 | 第34页 |
| 1.4 试剂配制 | 第34页 |
| 2 实验方法 | 第34-35页 |
| 2.1 MTT法检测联合杀伤效应 | 第35页 |
| 2.2 流式细胞仪检测细胞周期 | 第35页 |
| 2.3 荧光显微镜观察细胞凋亡 | 第35页 |
| 2.4 统计方法 | 第35页 |
| 3 实验结果 | 第35-42页 |
| 3.1 MTT法检测联合杀伤效应 | 第35-36页 |
| 3.2 流式细胞仪检测细胞周期 | 第36-38页 |
| 3.3 AnnexinV-FITC/PI染色荧光显微镜观察细胞凋亡 | 第38-39页 |
| 3.4 AnnexinV-FITC/PI双染检测各组死亡结果 | 第39-42页 |
| 4 讨论 | 第42-43页 |
| 第三节 TanⅡA、SAAS对人胎脐静脉上皮细胞HUVEC细胞缝隙连接通讯功能的影响 | 第43-54页 |
| 1 材料 | 第43页 |
| 1.1 试剂与耗材 | 第43页 |
| 1.2 仪器与设备 | 第43页 |
| 1.3 试剂配制 | 第43页 |
| 2 方法 | 第43-45页 |
| 2.1 MTT法检测对细胞生长影响 | 第43-44页 |
| 2.2 荧光示踪法测定缝隙连接(GJ)功能 | 第44页 |
| 2.3 流式细胞仪分析缝隙连接传输(GJ)功能 | 第44页 |
| 2.4 qRT-PCR检测Cx40和Cx37mRNA表达(SYBR Green染料法) | 第44-45页 |
| 2.5 Western Blotting检测TanⅡA、SAAS对HUVEC细胞Cx40蛋白表达的影响 | 第45页 |
| 2.6 统计方法 | 第45页 |
| 3 结果 | 第45-52页 |
| 3.1 TanⅡA、SAAS各组对HUVEC细胞生长的影响 | 第45-46页 |
| 3.2 荧光示踪法测定各组GJIC功能结果 | 第46-47页 |
| 3.3 流式细胞仪测定GJIC功能结果 | 第47-50页 |
| 3.4 各组对HUVEC细胞Cx40和Cx37基因表达的结果 | 第50-51页 |
| 3.5 Western Blotting检测TanⅡA、SAAS对HUVEC细胞Cx40蛋白表达的结果 | 第51-52页 |
| 4 实验讨论 | 第52-54页 |
| 结语 | 第54-56页 |
| 参考文献 | 第56-60页 |
| 附录 | 第60-61页 |
| 在校期间发表论文 | 第61页 |
| 参与课题及获奖情况 | 第61-62页 |
| 致谢 | 第62-63页 |
| 统计学审核证明 | 第63页 |
