| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-12页 |
| 1 引言 | 第12-19页 |
| ·植物细胞中的钙信号及其传递 | 第12-16页 |
| ·植物细胞中钙的分布及其作用 | 第12页 |
| ·植物细胞中钙信号的产生与终止 | 第12页 |
| ·钙信号的感知与传递 | 第12-13页 |
| ·CBLs 蛋白的结构特征 | 第13-14页 |
| ·CBLs 的靶蛋白 | 第14-15页 |
| ·CBLs 基因的表达及功能研究进展 | 第15-16页 |
| ·研究基因功能的策略与方法 | 第16-18页 |
| ·对基因进行功能注释 | 第17页 |
| ·基因表达谱分析 | 第17页 |
| ·基因的超表达 | 第17页 |
| ·反义RNA 和RNAi 技术 | 第17-18页 |
| ·突变体技术 | 第18页 |
| ·本研究的目的意义 | 第18-19页 |
| 2 玉米ZmCBL2-2、ZmCBL6 和ZmCBL8 基因的克隆及序列分析 | 第19-31页 |
| ·实验材料 | 第19页 |
| ·植物材料 | 第19页 |
| ·载体、酶和试剂 | 第19页 |
| ·培养基、溶液及其配制 | 第19页 |
| ·实验方法 | 第19-24页 |
| ·总RNA 的提取（热酚法） | 第19-21页 |
| ·cDNA 合成 | 第21页 |
| ·玉米ZmCBLs 基因的RT-PCR 扩增 | 第21-22页 |
| ·PCR 产物的回收纯化 | 第22页 |
| ·回收产物与载体pMD19-T 连接 | 第22-23页 |
| ·E.coli DH5α感受态细胞的制备（CaCl_2法） | 第23页 |
| ·E.coli DH5α感受态细胞的转化 | 第23-24页 |
| ·菌液PCR 鉴定及测序 | 第24页 |
| ·菌种的保存 | 第24页 |
| ·蛋白序列分析 | 第24页 |
| ·结果与分析 | 第24-31页 |
| ·玉米总RNA 的提取与检测 | 第24-25页 |
| ·玉米ZmCBLs 基因编码区cDNA 的克隆 | 第25-26页 |
| ·玉米ZmCBLs 基因编码蛋白的生物信息学分析 | 第26-31页 |
| 3 玉米ZmCBLs 基因植物表达载体构建及转化拟南芥 | 第31-41页 |
| ·材料 | 第31-32页 |
| ·植物材料 | 第31页 |
| ·质粒和菌株 | 第31-32页 |
| ·酶和试剂 | 第32页 |
| ·实验方法 | 第32-36页 |
| ·抗生素与培养基的配制 | 第32页 |
| ·菌种的激活与培养 | 第32-33页 |
| ·质粒DNA 的小量提取（碱裂解法） | 第33页 |
| ·目的片段与载体的酶切与回收 | 第33-34页 |
| ·目的片段与载体连接 | 第34页 |
| ·连接产物转化E.coli TOP10 感受态细胞 | 第34页 |
| ·菌液PCR 鉴定与质粒酶切鉴定 | 第34页 |
| ·根癌农杆菌GV3101 感受态细胞的制备 | 第34-35页 |
| ·农杆菌GV3101 感受态细胞的转化（冻融法）及鉴定 | 第35页 |
| ·菌种的保存 | 第35页 |
| ·拟南芥的培养 | 第35页 |
| ·菌液的制备及转化拟南芥（沾花法） | 第35-36页 |
| ·阳性植株的筛选 | 第36页 |
| ·基因组DNA 的小量提取（CTAB 法） | 第36页 |
| ·结果与分析 | 第36-41页 |
| ·植物表达载体的构建 | 第36-39页 |
| ·根癌农杆菌GV3101 的转化 | 第39-40页 |
| ·拟南芥的转化及转基因植株的筛选和鉴定 | 第40-41页 |
| 4 讨论 | 第41-43页 |
| ·CBL 家族的保守性 | 第41页 |
| ·ZmCBLs 蛋白的亚细胞定位 | 第41-42页 |
| ·关于拟南芥转化和筛选技术方面的问题 | 第42-43页 |
| 5 结论 | 第43-44页 |
| 致谢 | 第44-45页 |
| 参考文献 | 第45-49页 |
| 作者简介 | 第49页 |
