| 符号说明 | 第4-8页 |
| 中文摘要 | 第8-10页 |
| Abstract | 第10-11页 |
| 1 前言 | 第12-30页 |
| 1.1 匍柄霉属国内外研究进展 | 第13-14页 |
| 1.1.1 匍柄霉属典型种(Stemphylium eturmiunum)分类学地位 | 第13页 |
| 1.1.2 研究匍柄霉属的经济重要性 | 第13-14页 |
| 1.2 真菌生殖的研究进展 | 第14-20页 |
| 1.2.1 真菌生殖方式 | 第14-15页 |
| 1.2.2 同宗配合与异宗配合 | 第15-16页 |
| 1.2.3 无性与有性进化分析 | 第16-17页 |
| 1.2.4 真菌中与有性生殖相关的基因 | 第17-20页 |
| 1.3 G蛋白基因的研究进展 | 第20-22页 |
| 1.3.1 G蛋白基因的发现及克隆 | 第20-21页 |
| 1.3.2 G蛋白的基本结构及种类 | 第21-22页 |
| 1.4 G蛋白α亚基在真菌进化研究中的作用 | 第22-23页 |
| 1.5 根癌农杆菌介导的遗传转化研究进展 | 第23-29页 |
| 1.5.1 根癌农杆菌 | 第23-24页 |
| 1.5.2 根癌农杆菌介导的遗传转化机理 | 第24-25页 |
| 1.5.3 根癌农杆菌介导丝状真菌转化的特点 | 第25-27页 |
| 1.5.4 影响根癌农杆菌介导真菌遗传转化效率的因素 | 第27-29页 |
| 1.6 本研究的科学意义 | 第29-30页 |
| 2 材料与方法 | 第30-54页 |
| 2.1 实验材料 | 第30-35页 |
| 2.1.1 常用菌株与质粒 | 第30页 |
| 2.1.2 主要酶及试剂 | 第30页 |
| 2.1.3 主要仪器 | 第30页 |
| 2.1.4 主要培养基配方 | 第30-32页 |
| 2.1.5 主要溶液配方 | 第32-35页 |
| 2.2 实验方法 | 第35-54页 |
| 2.2.1 匍柄霉属G蛋白α亚基GPA1基因及侧翼序列的克隆 | 第35-39页 |
| 2.2.2 GPA1基因cDNA全长的获得 | 第39-41页 |
| 2.2.3 构建敲除载体pAg1-H3-GPA1 | 第41-43页 |
| 2.2.4 构建回补载体PHDT-G418-GPA1 | 第43-45页 |
| 2.2.5 根癌农杆菌介导的匍柄霉属遗传转化系统的建立 | 第45-47页 |
| 2.2.6 转化子的筛选及初步验证 | 第47-48页 |
| 2.2.7 Southern blot检测潮霉素拷贝数 | 第48-52页 |
| 2.2.8 转化子生物学性状分析 | 第52-54页 |
| 3 结果与分析 | 第54-71页 |
| 3.1 G蛋白α亚基GPA1基因的克隆 | 第54页 |
| 3.2 Tail-PCR扩增结果 | 第54-56页 |
| 3.2.1 Tail-PCR获得GPA1基因的左右侧翼序列 | 第54-56页 |
| 3.3 GPA1基因左右侧翼序列扩增 | 第56-57页 |
| 3.4 GPA1基因cDNA全长的扩增 | 第57-58页 |
| 3.5 根癌农杆菌介导的匍柄霉属遗传转化系统的建立 | 第58-61页 |
| 3.5.1 抑制匍柄霉属GPA1基因敲除转化子生长的G418抗性最佳浓度筛选 | 第58页 |
| 3.5.2 不同转化条件对匍柄霉属转化效率的影响 | 第58-61页 |
| 3.6 敲除载体构建及农杆菌转化 | 第61-63页 |
| 3.6.1 转化子的获得及验证 | 第62页 |
| 3.6.2 转化子的PCR分析 | 第62-63页 |
| 3.7 Southern blot验证潮霉素拷贝数 | 第63-64页 |
| 3.8 回补载体的构建及农杆菌转化 | 第64-65页 |
| 3.8.1 转化子的获得及验证 | 第64页 |
| 3.8.2 转化子的PCR分析 | 第64-65页 |
| 3.9 转化子生物学性状分析 | 第65-71页 |
| 3.9.1 转化子菌落形态观察及生长速率测定 | 第65-67页 |
| 3.9.2 野生型、敲除及回补转化子分生孢子及分生孢子梗形态观察 | 第67页 |
| 3.9.3 转化子分生孢子产孢量测定 | 第67-68页 |
| 3.9.4 有性态的诱导 | 第68-71页 |
| 4 总结与讨论 | 第71-75页 |
| 4.1 G蛋白GPA1基因及其侧翼序列的克隆 | 第71页 |
| 4.2 有性生殖与无性生殖 | 第71-72页 |
| 4.3 G蛋白GPA1基因对有性生殖及无性繁殖的影响 | 第72-73页 |
| 4.4 根癌农杆菌介导的Stemphylium eturmiunum遗传转化系统的建立 | 第73-75页 |
| 参考文献 | 第75-83页 |
| 致谢 | 第83-84页 |
| 硕士期间发表论文情况 | 第84页 |
