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屎肠球菌多位点序列分型及间接血凝诊断方法的建立

摘要第10-11页
Abstract第11-12页
缩略词表第13-14页
第一章 肠球菌诊断方法及耐药性研究进展第14-22页
    1.1 肠球菌分类及生物学特性第14页
    1.2 肠球菌的致病性第14-15页
        1.2.1 肠球菌对人的致病性第15页
        1.2.2 肠球菌对动物的致病性第15页
        1.2.3 引起人兽共患病第15页
    1.3 肠球菌的诊断技术第15-18页
        1.3.1 菌落及形态观察第15页
        1.3.2 糖发酵和酶活性实验第15-16页
        1.3.3 分子生物学诊断第16-18页
            1.3.3.1 核糖体分型研究第16-17页
            1.3.3.2 脉冲场凝胶电泳法第17页
            1.3.3.3 Tuf基因PCR鉴定第17页
            1.3.3.4 多位点序列分型技术第17-18页
        1.3.4 血清学鉴定第18页
    1.4 肠球菌的毒力因子第18-20页
    1.5 肠球菌的耐药机制第20-21页
    1.6 本研究的目的和意义第21-22页
第二章 肠球菌分离培养与鉴定第22-39页
    2.1 实验材料第22页
        2.1.1 实验菌种与质粒,载体第22页
        2.1.2 主要实验试剂第22页
        2.1.3 实验仪器与设备第22页
    2.2 试验方法第22-26页
        2.2.1 病料采集第22页
        2.2.2 病料的分离与培养第22-23页
        2.2.3 屎肠球菌的鉴定第23-26页
            2.2.3.1 染色镜检第23页
            2.2.3.2 PCR鉴定第23-26页
    2.3 结果第26-37页
        2.3.1 分离培养结果第26-27页
        2.3.2 分离与纯化第27页
        2.3.3 鉴定结果第27-37页
            2.3.3.1 染色镜检第27-29页
            2.3.3.2 Tuf基因PCR鉴定结果第29-30页
            2.3.3.3 Tuf基因基因序列测定及同源性比较第30-33页
            2.3.3.4 16S rDNA基因PCR鉴定结果第33-34页
            2.3.3.5 16S rDNA基因序列测定及同源性比较第34-37页
    2.4 讨论第37-39页
第三章 屎肠球菌的耐药性及致病性第39-47页
    3.1 实验材料第39-40页
        3.1.1 菌株来源第39页
        3.1.2 药物纸片第39页
        3.1.3 致病性实验动物第39-40页
    3.2 试验方法第40-41页
        3.2.1 耐药性实验方法第40-41页
        3.2.2 致病性实验第41页
    3.3 实验结果第41-45页
        3.3.1 药敏结果第41-44页
        3.3.2 毒力实验结果第44-45页
    3.4 讨论第45-47页
第四章 屎肠球菌MLST序列分型第47-56页
    4.1 实验材料第47页
        4.1.1 实验菌株,质粒及载体第47页
        4.1.2 主要试验试剂第47页
        4.1.3 主要实验仪器与设备第47页
    4.2 MLST分型实验方法第47-49页
    4.3 MLST分型鉴定结果第49-53页
        4.3.1 管家基因扩增结果第49-51页
        4.3.2 多态性位点变异分析第51-52页
        4.3.3 MLST分型结果第52-53页
    4.4 讨论第53-56页
第五章 屎肠球菌菌体抗原间接血凝诊断实验第56-65页
    5.1 材料与方法第56-59页
        5.1.1 实验材料第56页
        5.1.2 实验方法第56-59页
            5.1.2.1 IHA抗原的制备第56-57页
            5.1.2.2 兔高免血清的制备第57页
            5.1.2.3 阴性血清的制备第57页
            5.1.2.4 致敏红细胞的制备第57-58页
            5.1.2.5 IHA实验第58-59页
                5.1.2.5.1 抗原致敏第58页
                5.1.2.5.2 最适致敏抗原用量的测定第58页
                5.1.2.5.3 抗体效价的测定第58页
                5.1.2.5.4 特异性实验第58-59页
                5.1.2.5.5 敏感性试验第59页
                5.1.2.5.6 重复性试验第59页
                5.1.2.5.7 田间样品检测第59页
    5.2 实验结果第59-63页
        5.2.1 最适致敏抗原用量的测定第59-61页
        5.2.2 抗体效价的测定第61页
        5.2.3 特异性实验结果第61-62页
        5.2.4 敏感性实验结果第62页
        5.2.5 重复性实验结果第62页
        5.2.6 田间样品检测第62-63页
    5.3 讨论第63-65页
第六章 全文结论第65-66页
参考文献第66-76页
硕士期间发表论文第76-77页
致谢第77页

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