附录 | 第7-9页 |
中文摘要 | 第9-11页 |
ABSTRACT | 第11-12页 |
前言 | 第13-16页 |
第一部分 子宫内膜异位症中差异表达lncRNAs的筛选及子宫内膜异位症中EMT现象的验证 | 第16-30页 |
引言 | 第16页 |
1 材料 | 第16-19页 |
1.1 研究对象 | 第16-17页 |
1.2 主要仪器设备 | 第17-18页 |
1.3 主要试剂 | 第18-19页 |
2 实验方法 | 第19-24页 |
2.1 RT-PCR检测相关基因的差异表达 | 第19-22页 |
2.2 免疫组织化学法 | 第22-23页 |
2.3 统计学分析 | 第23-24页 |
3 实验结果 | 第24-27页 |
3.1 子宫内膜异位症中差异表达的lnc RNA | 第24-25页 |
3.2 AFAP1-AS1及其反义链AFAP1在子宫内膜异位症中的表达情况 | 第25-26页 |
3.3 子宫内膜异位症中EMT现象 | 第26-27页 |
4 讨论 | 第27-30页 |
第二部分 AFAP1-AS1下调抑制子宫内膜异位症EMT进程 | 第30-58页 |
引言 | 第30页 |
1 材料 | 第30-33页 |
1.1 研究对象 | 第30页 |
1.2 主要仪器设备 | 第30-31页 |
1.3 主要试剂 | 第31-32页 |
1.4 常用溶液配制 | 第32-33页 |
2 实验方法 | 第33-44页 |
2.1 RT-PCR检测相关基因表达 | 第33页 |
2.2 Western blot | 第33-35页 |
2.3 ZEB1启动子转染及荧光素酶报告基因活性测定 | 第35-36页 |
2.4 慢病毒转染与稳定细胞株的筛选 | 第36页 |
2.5 子宫内膜细胞的原代培养 | 第36-40页 |
2.6 酶联免疫吸附试验(ELISA) | 第40页 |
2.7 Edu实验 | 第40-41页 |
2.8 MTT实验 | 第41-42页 |
2.9 细胞迁移实验 | 第42-43页 |
2.10 电镜观察 | 第43-44页 |
2.11 统计学分析 | 第44页 |
3 实验结果 | 第44-53页 |
3.1 原代子宫内膜腺上皮细胞和间质细胞形态特征 | 第44页 |
3.2 AFAP1-AS1表达抑制模型的构建及慢病毒转染细胞的感染率 | 第44-45页 |
3.3 慢病毒转染细胞下调AFAP1-AS1的敲低效率 | 第45-46页 |
3.4 下调AFAP1-AS1后原代子宫内膜异位间质细胞形态改变 | 第46-47页 |
3.5 下调AFAP1-AS1后EMT标志基因及蛋白的改变 | 第47-48页 |
3.6 下调AFAP1-AS1后原代子宫内膜异位间质细胞增殖、侵袭、迁移能力及炎性因子的改变 | 第48-52页 |
3.7 下调AFAP1-AS1抑制E2诱导的EMT相关转录因子ZEB1启动子位点pGL3-P886活性 | 第52-53页 |
4 讨论 | 第53-58页 |
第三部分 体内实验证明下调AFAP1-AS1抑制子宫内膜异位症 | 第58-63页 |
引言 | 第58页 |
1 材料 | 第58-59页 |
1.1 研究对象 | 第58-59页 |
1.2 主要仪器设备 | 第59页 |
1.3 主要试剂 | 第59页 |
2 实验方法 | 第59-60页 |
2.1 慢病毒稳转ishikawa细胞 | 第59页 |
2.2 细胞分组和裸鼠成瘤 | 第59页 |
2.3 QRT-PCR验证两组裸鼠瘤体AFAP1-AS1表达含量 | 第59页 |
2.4 统计学分析 | 第59-60页 |
3 实验结果 | 第60-61页 |
3.1 裸鼠皮下瘤体体积、重量比较 | 第60-61页 |
4 讨论 | 第61-63页 |
全文结论 | 第63-64页 |
技术路线图 | 第64-65页 |
参考文献 | 第65-72页 |
文献综述 | 第72-82页 |
参考文献 | 第78-82页 |
在学期间发表论文及会议交流 | 第82页 |
在学期间所获校级奖项 | 第82-83页 |
致谢 | 第83-84页 |