| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 第一章 引言 | 第14-23页 |
| 1.1 水稻白叶枯病抗病基因研究进展 | 第14-15页 |
| 1.1.1 水稻白叶枯病概述 | 第14页 |
| 1.1.2 水稻白叶枯病抗病基因研究进展 | 第14-15页 |
| 1.2 水稻白叶枯病感病机理 | 第15-16页 |
| 1.2.1 水稻白叶枯病抗病资源发掘策略 | 第15页 |
| 1.2.2 水稻白叶枯病感病机理的研究 | 第15-16页 |
| 1.3 水稻白叶枯病感病基因研究进展 | 第16-17页 |
| 1.3.1 OsSWEET 11 （Os8N3/Xa13） | 第16页 |
| 1.3.2 OsSWEET 12 | 第16-17页 |
| 1.3.3 OsSWEET 13 （Os12N3/Xa25 ） | 第17页 |
| 1.3.4 OsSWEET 14 （Os11N3/Xa41（t）） | 第17页 |
| 1.3.5 OsSWEET 15 | 第17页 |
| 1.4 基因组编辑技术CRISPR/CAS系统的研究进展 | 第17-21页 |
| 1.4.1 基因组编辑技术的发展 | 第17-18页 |
| 1.4.2 CRISPR/Cas的研究进展 | 第18-19页 |
| 1.4.3 CRISPR/Cas系统的分类 | 第19-20页 |
| 1.4.4 CRISPR/Cas9系统的作用机制 | 第20页 |
| 1.4.5 CRISPR/Cas9的应用 | 第20-21页 |
| 1.5 立题意义及技术路线 | 第21-23页 |
| 1.5.1 立题意义 | 第21-22页 |
| 1.5.2 技术路线 | 第22-23页 |
| 第二章 材料与方法 | 第23-34页 |
| 2.1 实验材料 | 第23-25页 |
| 2.1.1 水稻材料 | 第23页 |
| 2.1.2 所用菌株及质粒载体 | 第23页 |
| 2.1.3 本实验用培养基 | 第23-24页 |
| 2.1.4 酶等主要试剂 | 第24-25页 |
| 2.1.5 引物信息 | 第25页 |
| 2.2 实验方法 | 第25-34页 |
| 2.2.1 接种方法 | 第25-26页 |
| 2.2.2 水稻叶片基因组DNA的提取 | 第26页 |
| 2.2.3 总RNA提取 | 第26-27页 |
| 2.2.4 RNA纯化 | 第27-28页 |
| 2.2.5 将RNA反转录成cDNA | 第28页 |
| 2.2.6 引物设计 | 第28页 |
| 2.2.7 PCR扩增体系及程序 | 第28-29页 |
| 2.2.8 PCR产物回收 | 第29页 |
| 2.2.9 连接产物转化 | 第29页 |
| 2.2.10 质粒提取 | 第29-30页 |
| 2.2.11 水稻遗传转化 | 第30页 |
| 2.2.12 qRT-PCR | 第30页 |
| 2.2.13 农杆菌感受态细胞制备 | 第30-31页 |
| 2.2.14 烟草瞬时表达 | 第31页 |
| 2.2.15 DAPI染色 | 第31页 |
| 2.2.16 CRISPR表达载体的构建 | 第31-34页 |
| 第三章 结果与分析 | 第34-46页 |
| 3.1 QRT-PCR验证转录组测序结果 | 第34页 |
| 3.2 HW3基因全长的获得 | 第34-35页 |
| 3.3 HW3基因的亚细胞定位 | 第35-36页 |
| 3.3.1 亚细胞定位表达载体的构建 | 第35-36页 |
| 3.3.2 HW3亚细胞定位 | 第36页 |
| 3.4 CRISPR表达载体构建及遗传转化 | 第36-39页 |
| 3.4.1 CRISPR表达载体的构建 | 第36-38页 |
| 3.4.2 水稻遗传转化 | 第38-39页 |
| 3.5 转基因植株田间接种鉴定以及靶位点突变分析 | 第39-44页 |
| 3.5.1 T_0代转基因植株的PCR鉴定 | 第39页 |
| 3.5.2 T_0代转基因植株田间接种鉴定 | 第39-40页 |
| 3.5.3 T_0代转基因植株靶位点突变分析 | 第40-41页 |
| 3.5.4 T_1代转基因植株接种结果及靶位点突变分析 | 第41-43页 |
| 3.5.5 T_2代转基因植株接种结果 | 第43-44页 |
| 3.6 DTALE植物表达载体的构建 | 第44-46页 |
| 第四章 讨论 | 第46-48页 |
| 4.1 应用感病基因创制抗白叶枯病的水稻新材料 | 第46页 |
| 4.2 CRISPR/CAS9系统的应用 | 第46页 |
| 4.3 水稻白叶枯病感病新基因HW3 | 第46-47页 |
| 4.4 转基因植株的抗病表型 | 第47-48页 |
| 第五章 全文结论 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-56页 |
| 致谢 | 第56-57页 |
| 作者简历 | 第57页 |
