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鼠伤寒沙门氏菌spv基因回补株的构建及其对肠粘膜上皮细胞凋亡的影响

摘要第3-5页
ABSTRACT第5-7页
第1章 前言第11-14页
第2章 鼠伤寒沙门菌spv基因荧光回补株的构建及其稳定性研究第14-40页
    2.1 材料第14-17页
        2.1.1 菌株、质粒第14-15页
        2.1.2 主要试剂及仪器第15-16页
        2.1.3 主要培养基及试剂配制第16-17页
    2.2 方法第17-33页
        2.2.1 技术路线第17-22页
        2.2.2 eGFP基因(含启动子终止子)的合成及克隆第22-26页
        2.2.3 HOK基因的调取及克隆第26-28页
        2.2.4 spvB及spvC基因的调取及克隆第28-32页
        2.2.5 电感受态细胞的制备及电转化入沙门氏菌第32-33页
        2.2.6 质粒稳定性评价第33页
    2.3 结果第33-38页
        2.3.1 PCR合成eGFP基因(含启动子终止子)第33-34页
        2.3.2 eGFP基因(含启动子终止子)的克隆及鉴定第34-35页
        2.3.3 hok/sok-par ED(简称HOK)基因的调取第35页
        2.3.4 hok/sok-par ED(简称HOK)基因的克隆第35-36页
        2.3.5 spvB及spvC基因的调取第36页
        2.3.6 spvB及spvC基因的克隆第36-37页
        2.3.7 平板计数法测量质粒稳定性结果第37-38页
    2.4 讨论第38-40页
第3章 沙门氏菌质粒毒力基因spvC对肠粘膜上皮细胞凋亡的影响及其分子机制的研究第40-53页
    3.1 材料第40-42页
        3.1.1 菌株第40页
        3.1.2 细胞株第40页
        3.1.3 主要试剂及仪器第40-41页
        3.1.4 主要培养基及试剂配制第41-42页
    3.2 方法第42-46页
        3.2.1 细菌培养及定量第42-43页
        3.2.2 细胞的分组及培养第43页
        3.2.3 细胞感染模型的建立第43-44页
        3.2.4 细胞爬片制备及DAPI染色第44页
        3.2.5 Caspase-3/7 活性的检测第44页
        3.2.6 Western blot法检测MAPK通路蛋白分子表达水平第44-45页
        3.2.7 胞内菌计数第45页
        3.2.8 统计学分析第45-46页
    3.3 结果第46-50页
        3.3.1 DAPI荧光染色观察凋亡过程中细胞核形态学改变第46-47页
        3.3.2 Promega荧光素酶发光法检测Caspase3/7 活性第47-48页
        3.3.3 Western blot法检测MAPK通路蛋白分子表达水平第48-49页
        3.3.4 胞内菌计数结果第49-50页
    3.4 讨论第50-53页
第4章 结论和展望第53-54页
    4.1 结论第53页
    4.2 展望第53-54页
致谢第54-55页
参考文献第55-57页
攻读学位期间的研究成果第57-58页
综述第58-66页
    参考文献第63-66页

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