摘要 | 第1-4页 |
Abstract | 第4-8页 |
第一章 文献综述 | 第8-23页 |
1 趋磁细菌的发现及一般特性 | 第8-9页 |
·趋磁细菌的发现 | 第8页 |
·趋磁细菌的一般特性 | 第8-9页 |
2 趋磁细菌的生态分布及其分离与培养 | 第9-12页 |
·趋磁细菌的生态分布 | 第9页 |
·趋磁细菌的分离与培养 | 第9-11页 |
·几株典型菌株 | 第11-12页 |
·一株特殊的趋磁细菌 | 第12页 |
3 趋磁细菌的分类及系统进化 | 第12-13页 |
4 趋磁细菌磁小体形成的分子机理 | 第13-20页 |
·磁小体的主要特征 | 第13-15页 |
·与磁小体合成有关的基因和蛋白 | 第15-19页 |
·磁小体形成的分子机理 | 第19-20页 |
5 趋磁细菌的研究意义和作用 | 第20页 |
·趋磁细菌的理论研究意义 | 第20页 |
·趋磁细菌的应用价值 | 第20页 |
6 绿色荧光蛋白在微生物学研究中的应用 | 第20-22页 |
本课题研究的目标和主要内容 | 第22-23页 |
第二章 趋磁细菌 MSR-1 ORF1 编码蛋白序列分析 | 第23-31页 |
1 方法 | 第23-24页 |
·MSR-1 ORF1 序列 | 第23页 |
·软件及分析方法 | 第23-24页 |
2 结果与分析 | 第24-31页 |
·氨基酸序列特征分析 | 第24页 |
·蛋白质疏水性分析 | 第24页 |
·信号肽分析 | 第24-26页 |
·跨膜结构分析 | 第26页 |
·磷酸化位点分析 | 第26-28页 |
·亚细胞定位 | 第28页 |
·蛋白质基序分析 | 第28页 |
·蛋白质二级结构预测 | 第28-30页 |
·小结 | 第30-31页 |
第三章 MSR-1 磁小体合成密切相关基因编码蛋白的定位 | 第31-56页 |
1 实验仪器与材料 | 第31-34页 |
·主要仪器 | 第31-32页 |
·实验材料 | 第32-34页 |
2 实验方法 | 第34-46页 |
·MSR-1 基因组DNA 的提取 | 第34页 |
·MSR-1 基因组DNA 的检测 | 第34-35页 |
·引物的设计 | 第35-36页 |
·目的基因的扩增 | 第36-37页 |
·凝胶产物回收 | 第37页 |
·外源基因与pSURE-T 载体的连接 | 第37-38页 |
·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第38页 |
·重组质粒转化大肠杆菌 | 第38-39页 |
·细菌质粒快速检测 | 第39页 |
·质粒DNA 的提取 | 第39-40页 |
·重组质粒的酶切鉴定 | 第40页 |
·DNA 测序 | 第40页 |
·重组表达载体的构建 | 第40-43页 |
·质粒的纯化 | 第43页 |
·含重组载体的E.coli S17-1 与磁螺菌MSR-1 的接合 | 第43页 |
·诱导表达 | 第43-44页 |
·聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第44-45页 |
·荧光显微镜检测 | 第45-46页 |
3 结果和分析 | 第46-56页 |
·MSR-1 基因组提取结果 | 第46页 |
·PCR 扩增ORF1 和ORF1' | 第46-47页 |
·PCR 扩增EGFP 和EGFP' | 第47页 |
·PCR 产物与T 载体的连接与电泳鉴定 | 第47-48页 |
·基因的序列测定 | 第48-50页 |
·重组表达载体的构建结果 | 第50-51页 |
·重组质粒导入MSR-1 | 第51-52页 |
·SDS-PAGE 鉴定蛋白表达结果 | 第52-53页 |
·讨论与总结 | 第53-56页 |
第四章 小结 | 第56-57页 |
参考文献 | 第57-63页 |
附录 | 第63-67页 |
攻读硕士学位期间发表的论文 | 第67-68页 |
致谢 | 第68页 |