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Gadd45影响细胞迁移及侵袭能力的功能及机制研究

中文摘要第4-5页
英文摘要第5-6页
缩略词表第10-12页
第一章 前言第12-17页
    1 Gadd45a的表达调控机制第12页
    2 Gadd45a在维持基因组稳定性中的作用第12-14页
        2.1 参与DNA修复第13页
        2.2 调控细胞周期第13页
        2.3 诱导凋亡第13-14页
    3 Gadd45a与去甲基化第14页
    4 Gadd45a与肿瘤第14-16页
        4.1 Gadd45a维持基因组稳定性功能与肿瘤第15页
        4.2 Gadd45a对肿瘤发生发展的抑制第15-16页
    5 本文研究目的第16-17页
第二章 材料与方法第17-32页
    1 实验材料第17-23页
        1.1 菌种、质粒及细胞株第17页
        1.2 主要试剂第17-19页
        1.3 主要仪器设备第19-20页
        1.4 引物的合成与设计第20页
        1.5 siRNA第20-21页
        1.6 重要试剂的配制第21-23页
    2 研究方法第23-32页
        2.1 对细胞的处理第23-24页
        2.2 siRNA瞬时转染细胞第24页
        2.3 细胞基因组DNA、总蛋白和总RNA的提取第24-25页
        2.4 RNA和蛋白的浓度测定第25-26页
        2.5 RT-PCR第26-27页
        2.6 胶回收纯化第27页
        2.7 制备感受态细胞第27页
        2.8 转化第27页
        2.9 Western Blotting第27-28页
        2.10 质粒提取第28-29页
        2.11 DNA亚硫酸氢盐修饰及纯化第29-30页
        2.12 细胞粘附实验第30页
        2.13 划痕实验第30-31页
        2.14 细胞跨膜迁移实验第31页
        2.15 细胞跨膜侵袭实验第31-32页
第三章 实验结果第32-51页
    1. Gadd45a抑制MEF细胞的体外黏附能力第32-33页
    2. Gadd45a抑制MEF细胞的体外迁移和侵袭能力第33-35页
    3. Gadd45a降低体外培养HepG2细胞的迁移和侵袭能力第35-37页
    4. 表达谱芯片研究Gadd45a影响MEF细胞中大量基因的表达第37-42页
    5. Real-time PCR验证芯片中与细胞迁移及侵袭相关的基因第42-44页
    6. 比较基因组杂交对MEF细胞中染色体畸变的分析第44-46页
    7. 甲基化芯片检测MEF细胞中表观遗传学改变第46-47页
    8. 对验证基因启动子区甲基化变化的验证第47-51页
第四章 讨论第51-59页
    1. Gadd45a抑制细胞的体外迁移和侵袭能力第52页
    2. 表达谱芯片研究Gadd45a影响MEF细胞中大量基因的表达第52-53页
    3. Real-time PCR验证芯片中与细胞迁移及侵袭相关的基因第53-55页
    4. 基因组不稳定性与表达改变第55-56页
    5. 表观遗传学与表达改变第56-59页
        5.1 碱基切除修复途径(BER)第57页
        5.2 核苷酸切除修复途径(NER)第57-59页
参考文献第59-69页
综述第69-80页
    参考文献第75-80页
攻读学位期间主要的研究成果第80-81页
致谢第81页

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