| 摘要 | 第5-7页 |
| abstract | 第7-8页 |
| 主要缩略词表 | 第9-13页 |
| 第1章 绪论 | 第13-28页 |
| 1.1 有机磷农药使用现状及污染 | 第13-17页 |
| 1.1.1 有机磷农药种类及使用现状 | 第13-14页 |
| 1.1.2 有机磷农药污染及危害 | 第14-15页 |
| 1.1.3 本文所用农药简介 | 第15-17页 |
| 1.2 有机磷农药废水处理方法 | 第17-20页 |
| 1.2.1 物理方法 | 第17页 |
| 1.2.2 化学方法 | 第17-18页 |
| 1.2.3 生物方法 | 第18-20页 |
| 1.3 微生物降解有机磷农药 | 第20-25页 |
| 1.3.1 有机磷农药降解微生物 | 第20-22页 |
| 1.3.2 有机磷水解酶 | 第22-25页 |
| 1.3.3 有机磷水解酶的克隆表达现状 | 第25页 |
| 1.4 粘质沙雷氏菌降解农药研究现状 | 第25-26页 |
| 1.5 研究目的、意义和内容 | 第26-28页 |
| 1.5.1 研究目的及意义 | 第26页 |
| 1.5.2 主要研究内容 | 第26-28页 |
| 第2章 材料与方法 | 第28-44页 |
| 2.1 试剂与材料 | 第28-32页 |
| 2.1.1 样品、菌株和质粒 | 第28页 |
| 2.1.2 PCR引物 | 第28页 |
| 2.1.3 试剂 | 第28-29页 |
| 2.1.4 主要试剂的配制 | 第29-32页 |
| 2.1.5 主要仪器 | 第32页 |
| 2.2 实验方法 | 第32-44页 |
| 2.2.1 乐果标准曲线的绘制-乙酰胆碱酶抑制率法测定 | 第32-33页 |
| 2.2.2 有机磷农药降解菌的筛选 | 第33页 |
| 2.2.3 有机磷农药降解菌的生理生化及分子生物学鉴定 | 第33页 |
| 2.2.4 MEW96菌株降解有机磷农药的性能分析 | 第33-35页 |
| 2.2.5 MEW96菌株的多功能性质研究 | 第35-36页 |
| 2.2.6 MEW96有机磷水解酶基因的克隆表达 | 第36-39页 |
| 2.2.7 甲基对硫磷水解酶诱导表达及纯化 | 第39-41页 |
| 2.2.8 甲基对硫磷水解酶(MPH)的性质分析 | 第41-43页 |
| 2.2.9 重组菌MBW300降解MP的效果实验 | 第43-44页 |
| 第3章 结果与分析 | 第44-70页 |
| 3.1 乐果标准曲线的绘制-乙酰胆碱酶抑制率法测定 | 第44页 |
| 3.2 有机磷农药降解菌的筛选 | 第44-45页 |
| 3.3 有机磷农药降解菌的生理生化及分子生物学鉴定 | 第45-48页 |
| 3.3.1 菌落形态及生理生化分析 | 第45-47页 |
| 3.3.2 16S rDNA测序及分析 | 第47-48页 |
| 3.4 MEW96菌株降解有机磷农药的性能分析 | 第48-52页 |
| 3.4.1 有机磷农药标准曲线的绘制 | 第48-50页 |
| 3.4.2 不同温度和不同农药对MEW96生长曲线的影响 | 第50页 |
| 3.4.3 MEW96对OPPs的耐受性实验(平板生长法) | 第50-51页 |
| 3.4.4 MEW96降解有机磷农药 | 第51-52页 |
| 3.5 MEW96菌株的多功能性质研究 | 第52-55页 |
| 3.5.1 MEW96水解几丁质的平板实验 | 第52-53页 |
| 3.5.2 MEW96解卵磷脂的平板实验 | 第53-54页 |
| 3.5.3 MEW96抑制真菌菌丝生长的平板对峙实验 | 第54-55页 |
| 3.5.4 MEW96富集无机磷的效果实验 | 第55页 |
| 3.6 MEW96有机磷水解酶基因的克隆表达 | 第55-59页 |
| 3.6.1 MEW96有机磷水解酶基因序列分析 | 第55-56页 |
| 3.6.2 Real Time RT-PCR检测GM004539 gene表达水平 | 第56-57页 |
| 3.6.3 MEW96有机磷水解酶基因基因的克隆表达 | 第57-59页 |
| 3.7 甲基对硫磷水解酶诱导表达及纯化 | 第59-64页 |
| 3.7.1 甲基对硫磷水解酶的诱导表达 | 第59-60页 |
| 3.7.2 甲基对硫磷水解酶的诱导表达条件优化 | 第60-62页 |
| 3.7.3 甲基对硫磷水解酶分离纯化 | 第62-64页 |
| 3.8 甲基对硫磷水解酶性质分析 | 第64-68页 |
| 3.8.1 酶活的测定 | 第64-65页 |
| 3.8.2 环境因子对MPH的酶活影响 | 第65-66页 |
| 3.8.3 MPH动力学常数测定 | 第66-67页 |
| 3.8.4 MPH降解MP的机理分析 | 第67页 |
| 3.8.5 MPH降解MP的影响因子分析 | 第67-68页 |
| 3.9 重组菌MBW300降解MP的效果实验 | 第68-70页 |
| 3.9.1 重组菌MBW300对OPPs的耐受性实验(平板生长法) | 第68-69页 |
| 3.9.2 重组菌MBW300降解甲基对硫磷的效果实验 | 第69-70页 |
| 第4章 小结与讨论 | 第70-74页 |
| 4.1 小结 | 第70-71页 |
| 4.2 讨论 | 第71-74页 |
| 4.2.1 MEW96降解有机磷农药 | 第71-72页 |
| 4.2.2 MEW96 MPH基因序列分析 | 第72页 |
| 4.2.3 MEW96 MPH酶学性质分析 | 第72-73页 |
| 4.2.4 MEW96降解MP机理分析 | 第73-74页 |
| 参考文献 | 第74-81页 |
| 附录 1：16S rDNA序列 | 第81-82页 |
| 附录 2：MEW96 mpd基因序列和MPH蛋白序列 | 第82-83页 |
| 附录 3：攻读硕士期间发表的文章和专利 | 第83-84页 |
| 致谢 | 第84页 |
