| 摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4页 |
| 第一章 绪论 | 第7-16页 |
| 1.1 玉米赤霉烯酮及其衍生物 | 第7-8页 |
| 1.2 玉米赤霉烯酮的污染现状 | 第8页 |
| 1.3 玉米赤霉烯酮的毒性 | 第8-10页 |
| 1.3.1 慢性毒性和致癌性 | 第8-9页 |
| 1.3.2 基因毒性 | 第9页 |
| 1.3.3 生殖和发育毒性 | 第9页 |
| 1.3.4 对内分泌系统的影响 | 第9-10页 |
| 1.4 玉米赤霉烯酮的脱毒技术 | 第10-12页 |
| 1.4.1 物理脱毒法 | 第10页 |
| 1.4.2 化学脱毒法 | 第10页 |
| 1.4.3 生物脱毒法 | 第10-11页 |
| 1.4.4 钝化脱毒法 | 第11-12页 |
| 1.5 玉米赤霉烯酮的降解机制 | 第12-13页 |
| 1.6 玉米赤霉烯酮水解酶的研究进展 | 第13-14页 |
| 1.7 立题意义与主要研究内容 | 第14-16页 |
| 1.7.1 立题意义 | 第14-15页 |
| 1.7.2 主要研究内容 | 第15-16页 |
| 第二章 实验材料与方法 | 第16-26页 |
| 2.1 实验材料 | 第16-18页 |
| 2.1.1 菌株和载体 | 第16页 |
| 2.1.2 实验所用试剂 | 第16-17页 |
| 2.1.3 实验所用仪器和设备 | 第17页 |
| 2.1.4 实验所用培养基和溶液 | 第17-18页 |
| 2.2 实验方法 | 第18-26页 |
| 2.2.1 ZHD101-S102A蛋白的表达与纯化 | 第18-20页 |
| 2.2.2 蛋白结晶 | 第20页 |
| 2.2.3 晶体数据的收集 | 第20-21页 |
| 2.2.4 定点突变体的构建 | 第21-24页 |
| 2.2.5 HPLC测定蛋白活性 | 第24-25页 |
| 2.2.6 催化动力学实验 | 第25页 |
| 2.2.7 ZHD101耐热性的研究 | 第25-26页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第26-43页 |
| 3.1 ZHD101-S102A的表达纯化 | 第26-27页 |
| 3.1.1 Ni-NTA亲和层析 | 第26页 |
| 3.1.2 脱盐柱纯化以及蛋白浓缩 | 第26-27页 |
| 3.2 ZHD101-S102A与底物的复合体结构解析 | 第27-30页 |
| 3.2.1 ZHD101-S102A晶体 | 第27页 |
| 3.2.2 ZHD101-S102A与底物α-ZOL、β-ZOL复合体数据收集 | 第27-29页 |
| 3.2.3 ZHD101-S102A与底物ɑ-ZOL、β-ZOL复合体结构 | 第29-30页 |
| 3.3 ZHD101突变体的构建与表达纯化 | 第30-31页 |
| 3.4 ZHD101突变体酶活测定以及动力学分析 | 第31-33页 |
| 3.5 ZHD101-S102A/V153H与底物复合体结构的解析与分析 | 第33-37页 |
| 3.5.1 ZHD101-S102A/V153H与底物ɑ-ZOL、β-ZOL复合体数据收集 | 第33-34页 |
| 3.5.2 ZHD101-S102A/V153H与底物ɑ-ZOL、β-ZOL的比较 | 第34-37页 |
| 3.6 ZHD101以及突变体的耐热性研究 | 第37-43页 |
| 3.6.1 ZHD101的耐热性 | 第37页 |
| 3.6.2 突变位点选择 | 第37-38页 |
| 3.6.3 突变体的表达纯化 | 第38-40页 |
| 3.6.4 突变体的活性以及耐热性分析 | 第40-41页 |
| 3.6.5 热稳定性提高的突变体形成二硫键的潜力分析 | 第41页 |
| 3.6.6 突变体热稳定性提高的结构基础 | 第41-43页 |
| 主要结论与展望 | 第43-45页 |
| 主要结论 | 第43-44页 |
| 展望 | 第44-45页 |
| 致谢 | 第45-46页 |
| 参考文献 | 第46-52页 |
| 附录：作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第52页 |
