英文缩写 | 第3-4页 |
中文摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
第一章 引言 | 第11-14页 |
第二章 国内外研究进展 | 第14-30页 |
2.1 禾本科植物遗传转化的方法 | 第14-16页 |
2.1.1 直接转化原生质体 | 第14页 |
2.1.2 基因枪法 | 第14-15页 |
2.1.3 农杆菌介导法 | 第15页 |
2.1.4 匍匐茎直接转化法 | 第15-16页 |
2.2 农杆菌介导单子叶植物转化的影响因素 | 第16-19页 |
2.2.1 农杆菌菌株类型 | 第16页 |
2.2.2 vir诱导类化合物 | 第16-17页 |
2.2.3 外植体的生理状态 | 第17页 |
2.2.4 伤口响应 | 第17-18页 |
2.2.5 侵染和共培养条件 | 第18-19页 |
2.3 转基因技术在禾本科草类植物中的潜在应用 | 第19-23页 |
2.3.1 改善牧草营养品质 | 第19-20页 |
2.3.2 非生物胁迫 | 第20-22页 |
2.3.3 杂草和病虫害的控制 | 第22-23页 |
2.3.4 生长和养分利用特性的改善 | 第23页 |
2.4 农杆菌介导几类禾本科谷物的遗传转化进展 | 第23-27页 |
2.4.1 水稻 | 第23-24页 |
2.4.2 小麦 | 第24页 |
2.4.3 玉米 | 第24-25页 |
2.4.4 大麦 | 第25页 |
2.4.5 高粱 | 第25-26页 |
2.4.6 二穗短柄草 | 第26页 |
2.4.7 其他草类 | 第26-27页 |
2.5 KT/KUP/HAK家族 | 第27-30页 |
2.5.1 命名和结构 | 第27-28页 |
2.5.2 系统进化分析 | 第28页 |
2.5.3 表达与功能研究 | 第28-30页 |
第三章 小花碱茅遗传转化体系的建立 | 第30-49页 |
3.1 材料与方法 | 第30-37页 |
3.1.1 实验材料、试剂和器材 | 第30-31页 |
3.1.2 外植体消毒 | 第31页 |
3.1.3 愈伤组织的诱导与继代 | 第31-32页 |
3.1.4 愈伤组织的分化与植株再生 | 第32-33页 |
3.1.5 其他条件的改良 | 第33页 |
3.1.6 农杆菌菌株、载体及供试材料 | 第33页 |
3.1.7 遗传转化基本培养基及组成 | 第33-35页 |
3.1.8 预培养 | 第35页 |
3.1.9 农杆菌GV3101的活化 | 第35页 |
3.1.10 侵染 | 第35页 |
3.1.11 共培养 | 第35-36页 |
3.1.12 菌液洗脱与抗性筛选 | 第36页 |
3.1.13 分化与生根 | 第36页 |
3.1.14 转化条件设计方案 | 第36-37页 |
3.2 结果与分析 | 第37-44页 |
3.2.1 小花碱茅再生体系的优化 | 第37-39页 |
3.2.2 小花碱茅遗传转化体系的建立 | 第39-44页 |
3.3 讨论 | 第44-48页 |
3.3.1 小花碱茅组织培养体系的优化 | 第44-45页 |
3.3.2 农杆菌介导小花碱茅遗传转化的影响因素 | 第45-48页 |
3.4 小结 | 第48-49页 |
第四章 PtHAK5编码基因的克隆及功能验证 | 第49-66页 |
4.1 材料与方法 | 第49-56页 |
4.1.1 材料 | 第49-50页 |
4.1.2 主要试剂与实验仪器 | 第50页 |
4.1.3 材料培养 | 第50页 |
4.1.4 总RNA的提取 | 第50-51页 |
4.1.5 PtHAK5基因 5’和 3’端片段克隆 | 第51-52页 |
4.1.6 蓝白斑筛选与阳性克隆鉴定 | 第52页 |
4.1.7 生物信息学分析 | 第52页 |
4.1.8 酵母菌株、表达载体及常用培养基 | 第52-54页 |
4.1.9 酵母表达载体的构建、转化和分析 | 第54-56页 |
4.2 结果与分析 | 第56-63页 |
4.2.1 小花碱茅幼苗总RNA质量 | 第56页 |
4.2.2 RT-PCR扩增 | 第56-57页 |
4.2.3 蓝白斑筛选与克隆 | 第57-58页 |
4.2.4 测序结果与分析 | 第58-61页 |
4.2.5 表达载体构建 | 第61-63页 |
4.3 讨论 | 第63-65页 |
4.3.1 PtHAK5编码小花碱茅高亲和性K~+转运蛋白 | 第63-64页 |
4.3.2 PtHAK5可能介导小花碱茅根系K~+吸收 | 第64-65页 |
4.4 小结 | 第65-66页 |
第五章 结论 | 第66-67页 |
参考文献 | 第67-85页 |
在学期间的研究成果 | 第85-86页 |
致谢 | 第86-87页 |
图版 | 第87-88页 |