摘要 | 第4-5页 |
Abstract | 第5页 |
1 绪论 | 第12-19页 |
1.1 植物转录因子研究进展 | 第12-14页 |
1.1.1 转录因子的分类 | 第12页 |
1.1.2 转录因子的结构特征 | 第12-14页 |
1.2 植物抗逆机理研究进展 | 第14页 |
1.3 MYB转录因子的研究进展 | 第14-17页 |
1.3.1 MYB转录因子的结构特征和分类 | 第14-15页 |
1.3.2 MYB转录因子的进化 | 第15-16页 |
1.3.3 MYB转录因子在植物胁迫应答中的作用 | 第16-17页 |
1.4 可变剪接 | 第17页 |
1.5 植物中SnRK的研究现状 | 第17-18页 |
1.6 本研究的目的和意义 | 第18-19页 |
2 碱茅PutSnRK2互作蛋白的筛选 | 第19-29页 |
2.1 材料与试剂 | 第19-20页 |
2.1.1 菌株和载体 | 第19页 |
2.1.2 培养基及试剂配方 | 第19-20页 |
2.2 “诱饵”基因的毒性和自激活检测 | 第20-22页 |
2.2.1 酵母感受态的制备及转化 | 第20页 |
2.2.2 毒性检测 | 第20页 |
2.2.3 自激活检测 | 第20页 |
2.2.4 碱茅的cDNA文库的融合和筛选 | 第20-22页 |
2.3 结果与分析 | 第22-28页 |
2.3.1 pGBKT7-PutSnRK2的鉴定 | 第22-23页 |
2.3.2 融合率 | 第23-24页 |
2.3.3 碱茅cDNA文库筛选结果 | 第24-26页 |
2.3.4 测序结果及序列分析 | 第26-27页 |
2.3.5 共转化验证 | 第27-28页 |
2.4 本章小结 | 第28-29页 |
3 PutMYBAS1-like基因克隆及表达特性分析 | 第29-38页 |
3.1 实验材料 | 第29页 |
3.1.1 植物材料 | 第29页 |
3.1.2 实验试剂 | 第29页 |
3.1.3 实验菌株和载体 | 第29页 |
3.2 试验方法 | 第29-33页 |
3.2.1 碱茅幼苗的胁迫处理 | 第29页 |
3.2.2 PutMYBAS1-like基因的克隆 | 第29-32页 |
3.2.3 生物信息学分析 | 第32-33页 |
3.2.4 PutMYBAS1-like基因表达特性分析 | 第33页 |
3.3 结果与分析 | 第33-37页 |
3.3.1 PutMYBAS1-like基因的克隆 | 第33-34页 |
3.3.2 PutMYBAS1-like基因的生物信息学分析 | 第34-36页 |
3.3.3 PutMYBAS1-like基因表达特性分析 | 第36-37页 |
3.4 本章小结 | 第37-38页 |
4 PutMYBAS1-like转录活性分析 | 第38-42页 |
4.1 材料 | 第38页 |
4.1.1 菌株和载体 | 第38页 |
4.1.2 培养基及试剂配方 | 第38页 |
4.2 方法 | 第38-39页 |
4.2.1 酵母表达载体(pGBKT7)的构建 | 第38-39页 |
4.2.2 重组质粒的酶切鉴定 | 第39页 |
4.2.3 酵母转化 | 第39页 |
4.3 结果与分析 | 第39-41页 |
4.3.1 重组质粒的酶切鉴定 | 第39-40页 |
4.3.2 转录活性及转录活性区域分析 | 第40-41页 |
4.4 本章小结 | 第41-42页 |
5 PutMYBAS1-like蛋白的亚细胞定位 | 第42-46页 |
5.1 材料 | 第42页 |
5.1.1 植物材料 | 第42页 |
5.1.2 菌株和载体 | 第42页 |
5.2 方法 | 第42-43页 |
5.2.1 pBS-PutMYBAS1-like-GFP植物表达载体的构建 | 第42页 |
5.2.2 PutMYBAS1-like蛋白的亚细胞定位 | 第42-43页 |
5.3 结果与分析 | 第43-45页 |
5.3.1 pBS-PutMYBAS1-like-GFP酶切鉴定 | 第43-44页 |
5.3.2 PutMYBAS1-like蛋白的亚细胞定位 | 第44-45页 |
5.4 本章小结 | 第45-46页 |
6 PutMYBAS1-like过表达拟南芥在非生物胁迫下的表型分析 | 第46-56页 |
6.1 材料 | 第46页 |
6.1.1 实验材料 | 第46页 |
6.1.2 培养基及试剂配方 | 第46页 |
6.2 实验方法 | 第46-49页 |
6.2.1 pBI121-PutMYBAS1-like植物表达载体的构建 | 第46-47页 |
6.2.2 农杆菌介导法转化拟南芥 | 第47-48页 |
6.2.3 PutMYBAS1-like过表达拟南芥的鉴定 | 第48-49页 |
6.2.4 PutMYBAS1-like过表达拟南芥在NaHCO_3 NaCl、及PEG胁迫下的抗性分析 | 第49页 |
6.3 结果与分析 | 第49-55页 |
6.3.1 pBI121-PutMYBAS1-like酶切鉴定 | 第49-50页 |
6.3.2 PutMYBAS1-like过表达拟南芥植株的分子检测 | 第50-51页 |
6.3.3 PutMYBAS1-like过表达拟南芥在NaHCO_3、NaCl及PEG胁迫下的抗性分析 | 第51-55页 |
6.4 本章小结 | 第55-56页 |
7 讨论 | 第56-59页 |
结论 | 第59-60页 |
参考文献 | 第60-66页 |
攻读学位期间发表的学术论文 | 第66-67页 |
致谢 | 第67-68页 |