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碱茅(Puccinellia tenuiflora)MYBAS1-like基因的克隆与功能分析

摘要第4-5页
Abstract第5页
1 绪论第12-19页
    1.1 植物转录因子研究进展第12-14页
        1.1.1 转录因子的分类第12页
        1.1.2 转录因子的结构特征第12-14页
    1.2 植物抗逆机理研究进展第14页
    1.3 MYB转录因子的研究进展第14-17页
        1.3.1 MYB转录因子的结构特征和分类第14-15页
        1.3.2 MYB转录因子的进化第15-16页
        1.3.3 MYB转录因子在植物胁迫应答中的作用第16-17页
    1.4 可变剪接第17页
    1.5 植物中SnRK的研究现状第17-18页
    1.6 本研究的目的和意义第18-19页
2 碱茅PutSnRK2互作蛋白的筛选第19-29页
    2.1 材料与试剂第19-20页
        2.1.1 菌株和载体第19页
        2.1.2 培养基及试剂配方第19-20页
    2.2 “诱饵”基因的毒性和自激活检测第20-22页
        2.2.1 酵母感受态的制备及转化第20页
        2.2.2 毒性检测第20页
        2.2.3 自激活检测第20页
        2.2.4 碱茅的cDNA文库的融合和筛选第20-22页
    2.3 结果与分析第22-28页
        2.3.1 pGBKT7-PutSnRK2的鉴定第22-23页
        2.3.2 融合率第23-24页
        2.3.3 碱茅cDNA文库筛选结果第24-26页
        2.3.4 测序结果及序列分析第26-27页
        2.3.5 共转化验证第27-28页
    2.4 本章小结第28-29页
3 PutMYBAS1-like基因克隆及表达特性分析第29-38页
    3.1 实验材料第29页
        3.1.1 植物材料第29页
        3.1.2 实验试剂第29页
        3.1.3 实验菌株和载体第29页
    3.2 试验方法第29-33页
        3.2.1 碱茅幼苗的胁迫处理第29页
        3.2.2 PutMYBAS1-like基因的克隆第29-32页
        3.2.3 生物信息学分析第32-33页
        3.2.4 PutMYBAS1-like基因表达特性分析第33页
    3.3 结果与分析第33-37页
        3.3.1 PutMYBAS1-like基因的克隆第33-34页
        3.3.2 PutMYBAS1-like基因的生物信息学分析第34-36页
        3.3.3 PutMYBAS1-like基因表达特性分析第36-37页
    3.4 本章小结第37-38页
4 PutMYBAS1-like转录活性分析第38-42页
    4.1 材料第38页
        4.1.1 菌株和载体第38页
        4.1.2 培养基及试剂配方第38页
    4.2 方法第38-39页
        4.2.1 酵母表达载体(pGBKT7)的构建第38-39页
        4.2.2 重组质粒的酶切鉴定第39页
        4.2.3 酵母转化第39页
    4.3 结果与分析第39-41页
        4.3.1 重组质粒的酶切鉴定第39-40页
        4.3.2 转录活性及转录活性区域分析第40-41页
    4.4 本章小结第41-42页
5 PutMYBAS1-like蛋白的亚细胞定位第42-46页
    5.1 材料第42页
        5.1.1 植物材料第42页
        5.1.2 菌株和载体第42页
    5.2 方法第42-43页
        5.2.1 pBS-PutMYBAS1-like-GFP植物表达载体的构建第42页
        5.2.2 PutMYBAS1-like蛋白的亚细胞定位第42-43页
    5.3 结果与分析第43-45页
        5.3.1 pBS-PutMYBAS1-like-GFP酶切鉴定第43-44页
        5.3.2 PutMYBAS1-like蛋白的亚细胞定位第44-45页
    5.4 本章小结第45-46页
6 PutMYBAS1-like过表达拟南芥在非生物胁迫下的表型分析第46-56页
    6.1 材料第46页
        6.1.1 实验材料第46页
        6.1.2 培养基及试剂配方第46页
    6.2 实验方法第46-49页
        6.2.1 pBI121-PutMYBAS1-like植物表达载体的构建第46-47页
        6.2.2 农杆菌介导法转化拟南芥第47-48页
        6.2.3 PutMYBAS1-like过表达拟南芥的鉴定第48-49页
        6.2.4 PutMYBAS1-like过表达拟南芥在NaHCO_3 NaCl、及PEG胁迫下的抗性分析第49页
    6.3 结果与分析第49-55页
        6.3.1 pBI121-PutMYBAS1-like酶切鉴定第49-50页
        6.3.2 PutMYBAS1-like过表达拟南芥植株的分子检测第50-51页
        6.3.3 PutMYBAS1-like过表达拟南芥在NaHCO_3、NaCl及PEG胁迫下的抗性分析第51-55页
    6.4 本章小结第55-56页
7 讨论第56-59页
结论第59-60页
参考文献第60-66页
攻读学位期间发表的学术论文第66-67页
致谢第67-68页

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