| 中文摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5页 |
| 目录 | 第6-8页 |
| 英文缩写词注释表 | 第8-9页 |
| 引言 | 第9-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-22页 |
| 1.1 转基因动物外源基因的检测方法 | 第10-13页 |
| 1.1.1 外源基因表达蛋白的检测 | 第10-11页 |
| 1.1.2 核酸检测方法 | 第11-13页 |
| 1.2 环介导等温扩增技术的研究进展 | 第13-22页 |
| 1.2.1 LAMP 方法的概述 | 第13-14页 |
| 1.2.2 LAMP 方法的特点 | 第14-15页 |
| 1.2.3 LAMP 引物设计原则 | 第15-16页 |
| 1.2.4 LAMP 方法扩增的原理 | 第16-19页 |
| 1.2.5 LAMP 扩增产物的检测方法 | 第19-20页 |
| 1.2.6 环介导等温扩增技术的应用 | 第20-21页 |
| 1.2.7 本课题的研究目的与意义 | 第21-22页 |
| 第二章 实验内容 | 第22-28页 |
| 2.1 实验材料与试剂 | 第22-23页 |
| 2.1.1 实验材料 | 第22页 |
| 2.1.2 仪器设备 | 第22页 |
| 2.1.3 实验试剂 | 第22-23页 |
| 2.2 实验方法 | 第23-28页 |
| 2.2.1 模板 DNA 的提取和质量检测 | 第23页 |
| 2.2.2 LAMP 引物的设计及处理 | 第23-24页 |
| 2.2.3 LAMP 引物的筛选 | 第24-26页 |
| 2.2.4 LAMP 反应条件的优化 | 第26页 |
| 2.2.5 比较 LAMP 法和 PCR 法的灵敏度 | 第26-27页 |
| 2.2.6 LAMP 法和 PCR 法检测转基因猪样本 | 第27-28页 |
| 第三章 实验结果 | 第28-46页 |
| 3.1 模板质量检测结果 | 第28页 |
| 3.2 引物筛选结果 | 第28-31页 |
| 3.2.1 PCR 法检测引物的特异性 | 第28-29页 |
| 3.2.2 LAMP 法检测引物特异性 | 第29-31页 |
| 3.3 LAMP 反应体系的优化 | 第31-41页 |
| 3.3.1 不同 Mg2+的浓度对 LAMP 反应扩增效率的影响 | 第31-33页 |
| 3.3.2 不同甜菜碱的浓度对 LAMP 反应扩增效率的影响 | 第33-35页 |
| 3.3.3 不同 dNTPs 的浓度对 LAMP 反应扩增效率的影响 | 第35-37页 |
| 3.3.4 不同外、内引物浓度比 LAMP 反应扩增效率的影响 | 第37-39页 |
| 3.3.5 不同 Bst DNA 聚合酶添加量对 LAMP 反应扩增效果的影响 | 第39-41页 |
| 3.4 比较 LAMP 法与 PCR 法的灵敏度 | 第41-43页 |
| 3.4.1 PCR 方法灵敏度检测结果 | 第42页 |
| 3.4.2 LAMP 法灵敏度检测结果 | 第42-43页 |
| 3.5 LAMP 法和 PCR 法检测转基因猪样本 | 第43-46页 |
| 第四章 讨论 | 第46-51页 |
| 4.1 模板 DNA 的提取与质量检测 | 第46页 |
| 4.2 LAMP 引物的设计 | 第46页 |
| 4.3 对 LAMP 引物的筛选和体系的初步建立 | 第46-48页 |
| 4.3.1 PCR 方法检测引物特异性 | 第46-47页 |
| 4.3.2 初步 LAMP 体系的建立 | 第47页 |
| 4.3.3 LAMP 法筛选最优引物 | 第47-48页 |
| 4.4 对 LAMP 体系的优化 | 第48-50页 |
| 4.4.1 对镁离子浓度的优化 | 第48页 |
| 4.4.2 对 Betaine 浓度的优化 | 第48-49页 |
| 4.4.3 对 dNTPs 浓度的优化 | 第49页 |
| 4.4.4 对外、内引物浓度比的优化 | 第49页 |
| 4.4.5 对 Bst DNA 聚合酶添加量的优化 | 第49-50页 |
| 4.5 LAMP 法和 PCR 法灵敏度检测实验 | 第50页 |
| 4.6 LAMP 法和 PCR 法检测转基因猪样本 | 第50-51页 |
| 第五章 结论 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-56页 |
| 导师及作者简介 | 第56-57页 |
| 致谢 | 第57页 |
