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实时定量PCR快速检测人全血中烟曲霉基因组DNA的方法学研究

中文摘要第1-6页
英文摘要第6-8页
中英文名词对照第8-10页
前言第10-14页
一、实验材料第14-18页
 (一) 主要仪器第14-15页
 (二) 试剂及耗材第15-16页
 (三) 菌种来源第16页
 (四) 标本采集第16-18页
二、实验方法第18-36页
 (一) 特异性引物及TaqMan探针设计第18页
 (二) 培养基的制备第18-19页
 (三) 单孢子悬液的制备第19-20页
 (四) 基因组DNA提取第20-22页
 (五) 引物有效性及特异性验证第22-24页
 (六) 探针有效性及特异性验证第24-25页
 (七) 标准品的制备第25-26页
 (八) 实时定量PCR引物和探针浓度优化第26-30页
 (九) 实时定量PCR反应体系建立及实验流程第30-34页
 (十) 检测限及灵敏度、特异度、阳性预告值与阴性预告值测定第34页
 (十一) 线性标准曲线的建立第34页
 (十二) 仪器准确度及重复性测定第34-35页
 (十三) 人全血标本中烟曲霉基因组的回收率测定第35页
 (十四) 模拟血标本存放稳定性监测第35页
 (十五) RQ-PCR对临床血标本中烟曲霉的检测第35页
 (十六) 统计学处理第35-36页
三、实验结果第36-47页
 (一) 特异性引物及TaqMan探针序列第36页
 (二) 引物和探针有效性及特异性验证第36-37页
 (三) 标准品初始浓度测定第37-38页
 (四) 实时定量PCR引物和探针浓度优化第38-41页
 (五) 检测限及特异度、灵敏度、阳性预告值与阴性预告值测定第41-42页
 (六) 标准曲线线性范围第42-44页
 (七) 仪器的准确度及重复性第44-45页
 (八) 血标本中烟曲霉基因组回收率测定第45-46页
 (九) 模拟血标本存放的稳定性第46页
 (十) 临床标本检测结果第46-47页
四、讨论第47-51页
文献综述第51-65页
参考文献第65-73页
致谢第73-74页
个人简历第74-75页

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