摘要 | 第4-6页 |
ABSTRACT | 第6-7页 |
前言 | 第10-12页 |
1 文献综述 | 第12-24页 |
1.1 植物自交不亲和性 | 第12-15页 |
1.1.1 甜樱桃自交不亲和性的分子机制 | 第13-14页 |
1.1.2 花柱中特异表达的S-RNase基因及其结构特点 | 第14-15页 |
1.2 确定S基因型的方法 | 第15-17页 |
1.3 SSR分子标记原理、种类及其在甜樱桃上的应用 | 第17-24页 |
1.3.1 分子标记的研究 | 第21页 |
1.3.2 分子标记在樱桃种质资源研究上的应用 | 第21-24页 |
2 材料与方法 | 第24-32页 |
2.1 实验材料 | 第24-25页 |
2.2 试验方法 | 第25-32页 |
2.2.1 基因组DNA提取与检测 | 第25-26页 |
2.2.2 S-等位基因条件的确定 | 第26-27页 |
2.2.3 SSR-PCR扩增条件确定 | 第27页 |
2.2.4 S-等位基因和SSR引物的筛选 | 第27-28页 |
2.2.5 S-等位基因PCR扩增产物回收与纯化 | 第28-29页 |
2.2.6 目的片段连接克隆载体 | 第29-30页 |
2.2.7 质粒DNA的热激转化 | 第30页 |
2.2.8 重组菌落PCR鉴定 | 第30-31页 |
2.2.9 SSR凝胶电泳及数据分析 | 第31-32页 |
3 结果与分析 | 第32-45页 |
3.1 S-等位基因PCR扩增各个因素对扩增结果的影响 | 第32-34页 |
3.1.1 退火温度对扩增结果的影响 | 第32页 |
3.1.2 10×PCR Buffer浓度的变化对扩增结果的影响 | 第32-33页 |
3.1.3 dNTP浓度的变化对扩增结果的影响 | 第33页 |
3.1.4 酶的浓度的变化对扩增结果的影响 | 第33-34页 |
3.1.5 模板DNA的浓度的变化对扩增结果的影响 | 第34页 |
3.2 不同引物组对甜樱桃S基因的扩增效果比较、分析及筛选 | 第34-37页 |
3.2.1 引物组合EM-PC2consFD+EM-PC3consRD对甜樱桃S基因的扩增效果 | 第34-35页 |
3.2.2 引物组合PruC2+PruC4R对甜樱桃S基因的扩增效果 | 第35页 |
3.2.3 引物组合BFP93+BFP94对甜樱桃S基因的扩增效果 | 第35-36页 |
3.2.4 S1、S5引物组合BFP208+BFP209和BFP212+BFP213对甜樱桃S基因的扩增效果 | 第36页 |
3.2.5 不同引物组合对甜樱桃S基因扩增电泳图比较 | 第36-37页 |
3.3 甜樱桃自交不亲和S基因型鉴定 | 第37-40页 |
3.3.1 甜樱桃S基因的克隆测序 | 第37-38页 |
3.3.2 甜樱桃品种S基因型的鉴定 | 第38-40页 |
3.4 甜樱桃品种遗传多样性的SSR分析 | 第40-45页 |
3.4.1 甜樱桃DNA的提取 | 第40-41页 |
3.4.2 引物筛选与SSR多态性 | 第41页 |
3.4.3 遗传相似性 | 第41-42页 |
3.4.4 甜樱桃材料的遗传关系分析 | 第42-45页 |
4 讨论 | 第45-47页 |
4.1 甜樱桃S基因型鉴定引物组合筛选 | 第45-46页 |
4.2 关于甜樱桃S基因确定 | 第46页 |
4.3 关于各甜樱桃品种间聚类关系 | 第46-47页 |
4.4 关于甜樱桃SSR的多态性引物 | 第47页 |
5 结论 | 第47-49页 |
5.1 甜樱桃S基因鉴定PCR扩增程序 | 第47-48页 |
5.2 甜樱桃S-PCR引物组合的筛选 | 第48页 |
5.3 甜樱桃各S基因扩增片段大小 | 第48页 |
5.4 甜樱桃S基因型的确定 | 第48页 |
5.5 甜樱桃SSR遗传关系分析 | 第48-49页 |
参考文献 | 第49-56页 |
致谢 | 第56页 |