| 摘要 | 第3-5页 |
| abstract | 第5-6页 |
| 第1章 前言 | 第10-13页 |
| 第2章 实验方法 | 第13-35页 |
| 2.1 实验小鼠 | 第13页 |
| 2.2 试剂及设备 | 第13-19页 |
| 2.2.1 实验试剂 | 第13-14页 |
| 2.2.2 试剂配制 | 第14-18页 |
| 2.2.3 实验仪器设备 | 第18-19页 |
| 2.3 实验方法 | 第19-35页 |
| 2.3.1 分子克隆 | 第19-22页 |
| 2.3.2 感受态细胞的制备 | 第22-23页 |
| 2.3.3 转化 | 第23页 |
| 2.3.4 PET-28a(+)-PPP3CC和PET-28a(+)-PPP3R2重组质粒构建 | 第23页 |
| 2.3.5 PCR产物回收（OMEGA试剂盒-Cycle Pure Kit） | 第23-24页 |
| 2.3.6 琼脂糖凝胶电泳 | 第24页 |
| 2.3.7 酶切产物回收（OMEGA试剂盒-Gel Extraction kit） | 第24-25页 |
| 2.3.8 小量质粒提取（OMEGA小提试剂盒） | 第25-26页 |
| 2.3.9 蛋白的体外原核诱导表达 | 第26页 |
| 2.3.10 体外原核诱导蛋白的提取 | 第26页 |
| 2.3.11 蛋白纯化 | 第26-27页 |
| 2.3.12 透析 | 第27页 |
| 2.3.13 GST pull-down实验 | 第27-28页 |
| 2.3.14 睾丸组织内质网膜蛋白提取 | 第28页 |
| 2.3.15 Western blot | 第28-31页 |
| 2.3.16 BCA蛋白定量 | 第31页 |
| 2.3.17 雄性小鼠FK506给药模型构建 | 第31-32页 |
| 2.3.18 免疫组化 | 第32-34页 |
| 2.3.19 统计学分析 | 第34-35页 |
| 第3章 实验结果 | 第35-48页 |
| 3.1 FK506给药后小鼠生育表型 | 第35-39页 |
| 3.1.1 雄性小鼠精子运动活力参数的检测 | 第35-38页 |
| 3.1.2 小鼠交配后精卵结合情况的检测 | 第38-39页 |
| 3.2 FKBP12及FKBP12.6在小鼠睾丸组织的表达分布 | 第39页 |
| 3.3 FKBP12.6和FKBP12与睾丸中calcineurin结合能力检测结果 | 第39-41页 |
| 3.4 带His标签的PPP3CC和PPP3R2重组质粒的构建和体外诱导表达 | 第41-43页 |
| 3.4.1 PPP3CC和PPP3R2重组质粒的构建与鉴定 | 第41-42页 |
| 3.4.2 PPP3CC和PPP3R2重组质粒的体外原核诱导表达 | 第42-43页 |
| 3.5 His-PPP3CC和His-PPP3R2蛋白纯化与体外相互作用 | 第43-45页 |
| 3.5.1 His-PPP3CC和His-PPP3R2蛋白的纯化 | 第43-44页 |
| 3.5.2 PPP3CC和PPP3R2蛋白体外相互作用研究。 | 第44-45页 |
| 3.6 H.E染色检测附睾与睾丸组织结构 | 第45-47页 |
| 3.7 结论 | 第47-48页 |
| 第4章 讨论 | 第48-51页 |
| 致谢 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-55页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第55页 |
