| 摘要 | 第11-13页 |
| ABSTRACT | 第13-14页 |
| 缩略词表 | 第15-16页 |
| 第一章 文献综述 | 第16-43页 |
| 1 鸡卵巢发育的过程 | 第16-23页 |
| 1.1 卵巢的分化和形成 | 第16-19页 |
| 1.1.1 鸡的性别决定机制 | 第17-18页 |
| 1.1.2 鸡的性别分化 | 第18-19页 |
| 1.2 鸡卵泡的发育 | 第19-23页 |
| 1.2.1 原始卵泡的形成 | 第20页 |
| 1.2.2 卵泡发育的启动（性成熟前） | 第20-21页 |
| 1.2.3 鸡等级卵泡的发育过程（性成熟后） | 第21-23页 |
| 2 颗粒细胞对卵泡发育的调控作用 | 第23-27页 |
| 2.1 颗粒细胞在卵泡发育过程的作用 | 第24-25页 |
| 2.1.1 原始卵泡的启动 | 第24页 |
| 2.1.2 在卵泡选择中的作用 | 第24-25页 |
| 2.2 颗粒细胞与卵泡其他细胞间的相互作用 | 第25-27页 |
| 2.2.1 与膜细胞间的相互作用 | 第25-26页 |
| 2.2.2 与卵母细胞间的相互作用 | 第26-27页 |
| 3 影响鸡卵泡颗粒细胞分化的分子机制 | 第27-34页 |
| 3.1 FSHR的转录调控机制 | 第27-28页 |
| 3.2 卵巢内生长因子对颗粒细胞的调控 | 第28-34页 |
| 3.2.1 胰岛素样生长因子系统 | 第29-30页 |
| 3.2.2 表皮生长因子家族 | 第30-31页 |
| 3.2.3 转化生长因子 β 家族 | 第31-34页 |
| 4 FOXL2在卵巢发育过程中的作用 | 第34-41页 |
| 4.1 FOXL2在卵巢发育过程中的功能 | 第35-37页 |
| 4.1.1 性别分化和早期性腺发育 | 第35-36页 |
| 4.1.2 卵泡发育和颗粒细胞分化与增殖 | 第36-37页 |
| 4.2 FOXL2作用的分子机制 | 第37-40页 |
| 4.2.1 与FOXL2相互作用的因子 | 第38-39页 |
| 4.2.2 FOXL2的转录调控以及转录后修饰 | 第39-40页 |
| 4.3 FOXL2在鸡卵巢发育过程中的作用 | 第40-41页 |
| 5 本研究的目的与意义 | 第41-43页 |
| 第二章 FOXL2在鸡胚性腺及成年鸡卵巢中的时空表达 | 第43-62页 |
| 1 前言 | 第43页 |
| 2 材料与方法 | 第43-56页 |
| 2.1 材料 | 第43-46页 |
| 2.1.1 实验动物 | 第43页 |
| 2.1.2 主要仪器设备 | 第43-44页 |
| 2.1.3 主要试剂 | 第44页 |
| 2.1.4 主要试剂配制 | 第44-46页 |
| 2.2 方法 | 第46-56页 |
| 2.2.1 组织采集 | 第46-47页 |
| 2.2.2 鸡胚胎组织DNA提取及性别鉴定 | 第47-48页 |
| 2.2.3 RNA提取和qPCR | 第48-50页 |
| 2.2.4 整体原位杂交 | 第50-54页 |
| 2.2.5 卵泡组织切片和免疫荧光 | 第54-55页 |
| 2.2.6 统计学分析 | 第55-56页 |
| 3 结果 | 第56-60页 |
| 3.1 FOXL2在鸡胚性腺中的时空表达 | 第56-58页 |
| 3.1.1 鸡胚性别的鉴定及鸡胚性腺总RNA提取 | 第56页 |
| 3.1.2 胚胎性腺发育过程中FOXL2的表达变化 | 第56-57页 |
| 3.1.3 FOXL2在胚胎泌尿生殖系统中的表达 | 第57-58页 |
| 3.2 FOXL2在成年鸡卵泡中的时空表达 | 第58-60页 |
| 4 讨论 | 第60-61页 |
| 4.1 FOXL2在鸡胚性腺中的时空表达 | 第60页 |
| 4.2 FOXL2在成年卵巢中的时空表达 | 第60-61页 |
| 5 本章小结 | 第61-62页 |
| 第三章 FOXL2在离体培养鸡颗粒细胞中的过表达 | 第62-72页 |
| 1 前言 | 第62页 |
| 2 材料与方法 | 第62-66页 |
| 2.1 材料 | 第62-63页 |
| 2.1.1 实验动物 | 第62页 |
| 2.1.2 主要仪器设备 | 第62页 |
| 2.1.3 主要试剂 | 第62-63页 |
| 2.1.4 主要试剂配制 | 第63页 |
| 2.2 方法 | 第63-66页 |
| 2.2.1 FOXL2过表达载体构建 | 第63-64页 |
| 2.2.3 去内毒素质粒提取 | 第64-65页 |
| 2.2.4 卵泡颗粒细胞的分离及离体培养 | 第65页 |
| 2.2.5 质粒转染 | 第65页 |
| 2.2.6 RNA提取和qPCR | 第65页 |
| 2.2.7 统计学方法 | 第65-66页 |
| 3 结果 | 第66-70页 |
| 3.1 FOXL2过表达载体构建 | 第66-67页 |
| 3.1.1 FOXL2全长序列扩增 | 第66页 |
| 3.1.2 pcDNA -FOXL2（PF）重组载体构建 | 第66-67页 |
| 3.2 鸡卵泡颗粒细胞的离体培养 | 第67-70页 |
| 3.2.1 颗粒细胞细胞的培养 | 第67-68页 |
| 3.2.2 颗粒细胞脂质体转染条件摸索 | 第68-69页 |
| 3.2.3 FOXL2在鸡颗粒细胞中的过表达 | 第69-70页 |
| 4 讨论 | 第70-71页 |
| 4.1 鸡等级前和等级卵泡颗粒细胞离体培养 | 第70-71页 |
| 4.2 离体培养颗粒细胞转染条件优化 | 第71页 |
| 5 本章小结 | 第71-72页 |
| 第四章 FOXL2在鸡卵泡颗粒细胞中的作用 | 第72-99页 |
| 1 前言 | 第72页 |
| 2 材料与方法 | 第72-77页 |
| 2.1 材料 | 第72-73页 |
| 2.1.1 样本 | 第72页 |
| 2.1.2 主要仪器设备 | 第72页 |
| 2.1.3 主要试剂 | 第72-73页 |
| 2.1.4 数据分析主要数据库及软件 | 第73页 |
| 2.2 方法 | 第73-77页 |
| 2.2.1 总RNA提取及检测 | 第73页 |
| 2.2.2 高通量测序 | 第73-74页 |
| 2.2.3 数据预处理 | 第74页 |
| 2.2.4 数据分析 | 第74-76页 |
| 2.2.5 差异基因的定量检测 | 第76-77页 |
| 3 结果 | 第77-94页 |
| 3.1 测序样本总RNA质量检测 | 第77-78页 |
| 3.2 原始数据（Raw reads）过滤统计 | 第78-79页 |
| 3.3 数据初步分析 | 第79-81页 |
| 3.3.1 参考序列比对 | 第79-80页 |
| 3.3.2 差异表达基因筛选 | 第80-81页 |
| 3.4 差异基因功能分析 | 第81-92页 |
| 3.4.1 GO功能分析 | 第81-83页 |
| 3.4.2 KEGG pathway分析 | 第83-85页 |
| 3.4.3 基因互作网络分析 | 第85-86页 |
| 3.4.4 不同处理组中差异基因的比较 | 第86-89页 |
| 3.4.5 FOXL2在颗粒细胞分化过程中影响的候选通路和基因的探索 | 第89-92页 |
| 3.5 部分差异表达基因验证 | 第92页 |
| 3.6 未命名（或注释）基因 | 第92-94页 |
| 4 讨论 | 第94-97页 |
| 4.1 颗粒细胞分化前后转录本的变化 | 第94-95页 |
| 4.2 FOXL2对等级前颗粒细胞分化的调节作用 | 第95-96页 |
| 4.3 FOXL2在等级前和等级卵泡颗粒细胞中的调控作用不同 | 第96-97页 |
| 5 本章小结 | 第97-99页 |
| 第五章 FOXL2与SF-1 对芳香化酶启动子的作用 | 第99-113页 |
| 1 前言 | 第99页 |
| 2 材料与方法 | 第99-104页 |
| 2.1 材料 | 第99-100页 |
| 2.1.1 细胞系及载体信息 | 第99页 |
| 2.1.2 主要仪器设备 | 第99页 |
| 2.1.3 主要试剂 | 第99-100页 |
| 2.1.4 主要试剂配制 | 第100页 |
| 2.2 方法 | 第100-104页 |
| 2.2.1 双荧光素酶载体构建 | 第100-101页 |
| 2.2.2 SF-1 过表达载体以及突变载体构建 | 第101-103页 |
| 2.2.3 细胞转染 | 第103页 |
| 2.2.4 双荧光素报告系统检测 | 第103-104页 |
| 2.2.5 统计方法 | 第104页 |
| 3 结果 | 第104-110页 |
| 3.1 CYP19A1（芳香化酶）在卵泡中的时空表达 | 第104-106页 |
| 3.2 载体构建 | 第106-107页 |
| 3.2.1 CYP19A1启动子双荧光素酶报告基因载体构建 | 第106-107页 |
| 3.2.2 SF-1 过表达载体构建 | 第107页 |
| 3.3 双荧光素酶报告系统检测 | 第107-110页 |
| 3.3.1 CYP19A1启动子缺失片段活性检测 | 第107-108页 |
| 3.3.2 FOXL2与SF1对CYP19A1启动子活性的影响 | 第108-109页 |
| 3.3.3 SF-1 与CYP19A1启动子的结合位点 | 第109-110页 |
| 4 讨论 | 第110-112页 |
| 4.1 鸡卵泡中芳香化酶的表达 | 第110页 |
| 4.2 FOXL2对芳香化酶启动子活性无影响 | 第110-111页 |
| 4.3 SF-1 可激活芳香化酶启动子 | 第111-112页 |
| 5 本章小结 | 第112-113页 |
| 结论与展望 | 第113-116页 |
| 1 本研究所取得的结果 | 第113-115页 |
| 2 本研究的创新点 | 第115页 |
| 3 本研究的不足之处 | 第115页 |
| 4 需要进一步研究的工作 | 第115-116页 |
| 参考文献 | 第116-138页 |
| 附录:在读期间发表论文 | 第138-139页 |
| 致谢 | 第139-140页 |
